一种病毒诱导的芜菁基因沉默体系及其应用

    公开(公告)号:CN113355351A

    公开(公告)日:2021-09-07

    申请号:CN202110647649.2

    申请日:2021-06-10

    Abstract: 本发明公开了一种病毒诱导的芜菁基因沉默体系及其应用。本发明提供了一种沉默芜菁中目标基因的方法,包括如下步骤:(1)根据目标基因按照特定原则设计干扰序列;(2)制备干扰载体;所述干扰载体的出发载体为pTY‑S载体;所述干扰载体中具有步骤(1)得到的干扰序列和其反向互补序列;(3)在芜菁植株的叶片摩擦制造伤口,然后接种所述干扰载体。本发明的有益效果为:不需借助农杆菌转染,省去了基因枪轰击等复杂步骤;建立了芜菁病毒诱导基因沉默体系,采用简单的摩擦接种,历时短、操作简单、对植物伤害小,沉默效率大大提高,可以同时观察到多个器官的沉默表型。本发明对于芸薹属作物的的品种改良具有重要意义。

    一种白菜瞬时转化的方法
    14.
    发明公开

    公开(公告)号:CN107653263A

    公开(公告)日:2018-02-02

    申请号:CN201711089577.4

    申请日:2017-11-08

    CPC classification number: C12N15/8205 C12N15/8207

    Abstract: 本发明公开了一种白菜瞬时转化的方法。本发明的方法包括如下步骤:将目的基因导入农杆菌中,得到重组菌;用重组菌侵染白菜外植体,实现白菜的瞬时转化;目的基因通过重组载体导入农杆菌中;重组载体中用于启动目的基因表达的启动子为甘露醇合成酶启动子;用重组菌侵染白菜外植体的方法包括如下步骤:将OD600为0.1的重组菌与OD600为0.2的p19菌液混匀,得到混合菌液;用混合菌液侵染白菜子叶。本发明在烟草农杆菌注射方法的基础之上,对注射部位,注射农杆菌浓度,注射载体等方面进行调整,建立了适用于白菜的农杆菌注射渗透介导的瞬时表达体系。通过实验证明:本发明的方法可成功实现白菜瞬时转化,且有较高的转化效率。

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