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公开(公告)号:CN103484568B
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201310430466.0
申请日:2013-09-18
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法,该方法可以实现在一个待测样本中同时检测草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的存在,并能对两种病毒的负载水平进行定量。本发明还提供了一种用于草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测的试剂盒。本发明的检测方法及试剂盒操作简便,特异性强,检测灵敏度和准确率高、可靠,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103539842B
公开(公告)日:2015-05-13
申请号:CN201310513653.5
申请日:2013-10-25
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型S10基因编码的重组蛋白、由其制备的多克隆抗体及应用。草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型S10基因编码蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,编码该蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明获得的重组蛋白具有较好的免疫原性,与GCRV其它结构蛋白相比,其诱导免疫动物产生的特异性抗体效价更高。进一步试验表明,用S10重组蛋白免疫草鱼,可使草鱼诱导产生较高的特异性抗体,并能对草鱼呼肠孤病毒强毒株的攻击起到一定的免疫保护作用。因此,对GCRV Ⅱ型S10基因编码蛋白的研究和应用,对开发草鱼出血病新型疫苗及免疫学检测试剂盒具有极其重要的意义,为草鱼出血病提供新的有效解决途径。
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公开(公告)号:CN104388588A
公开(公告)日:2015-03-04
申请号:CN201410633166.7
申请日:2014-11-11
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6804 , C12Q2531/143 , C12Q2563/131
Abstract: 本发明公开了一种Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒NASBA-ELISA检测引物、探针及试剂盒。所述引物及探针的核苷酸序列如SEQIDNO.1~4所示。所述试剂盒中含有引物、探针、NASBA扩增缓冲液,酶混合液,扩增产物检测试剂,阴性对照和阳性对照。本发明的Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒NASBA-ELISA检测试剂盒检测时间周期短、检测效率高;检测病毒特异性高,准确率高;在进行病毒定性分析的同时还能进行病毒定量分析;检测灵敏度比普通PCR高;操作简单、易于推广;实验结果重复性好。
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公开(公告)号:CN103484568A
公开(公告)日:2014-01-01
申请号:CN201310430466.0
申请日:2013-09-18
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测方法,该方法可以实现在一个待测样本中同时检测草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的存在,并能对两种病毒的负载水平进行定量。本发明还提供了一种用于草鱼呼肠孤病毒Ⅰ型和Ⅱ型的双重荧光定量PCR检测的试剂盒。本发明的检测方法及试剂盒操作简便,特异性强,检测灵敏度和准确率高、可靠,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN103397106A
公开(公告)日:2013-11-20
申请号:CN201310302713.9
申请日:2013-07-18
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
Abstract: 本发明公开了杂交鳢弹状病毒荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法,试剂盒中含有特异性引物HSHRV-2F、HSHRV-2R和探针HSHRV-2probe,将该试剂盒用于检测杂交鳢弹状病毒,具有灵敏度高、重复性强、特异性好的特点,能够快速、准确地对杂交鳢弹状病毒进行定性和定量,对于杂交鳢病毒病的早期诊断、分子流行病学研究以及防控技术研究等具有重要意义。
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公开(公告)号:CN113604438B
公开(公告)日:2022-07-05
申请号:CN202110751722.0
申请日:2021-07-02
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗罗非鱼湖病毒的单克隆抗体及其细胞株和应用,该杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞TiLV S10E3,于2020年11月5日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C2020209。该杂交瘤细胞株由SP2/0骨髓瘤细胞与免疫了罗非鱼湖病毒S10节段编码蛋白的小鼠脾细胞融合得到,能够无限增殖并持续产生抗罗非鱼湖病毒S10节段编码蛋白的单克隆抗体,产生的单克隆抗体效价高,对罗非鱼湖病毒具有较好的特异性,可用于各类体外检测、野毒株病毒筛选分离以及抗病毒药物筛选等多个方面,具有极高的应用及科研价值。
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公开(公告)号:CN109517806B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN201811530181.3
申请日:2018-12-14
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12N7/00 , C12N15/11 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种罗非鱼湖病毒强毒株及其RPA检测引物和方法,本发明设计了针对RPA反应的引物组;本发明首次分离出罗湖病毒,而且检测方法快速简便、特异性强,灵敏度高,适用于养殖场的现场检测等,具有极高的应用价值。
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公开(公告)号:CN112048571B
公开(公告)日:2021-07-20
申请号:CN202010915296.5
申请日:2020-09-03
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6848 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了草鱼呼肠孤病毒II型巢式RT‑PCR检测引物组、试剂盒及其应用。本发明设计得到草鱼呼肠孤病毒II型巢式RT‑PCR引物组,并基于该引物组,通过特定法扩增体系和条件检测草鱼呼肠孤病毒II型。其PCR反应第一次扩增可以检测到103稀释的cDNA浓度,第二次扩增可以检测到104次稀释的cDNA浓度,特异性强,比现有国标中GCRVⅡ型病毒的检测敏感性更高。
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公开(公告)号:CN110527661B
公开(公告)日:2021-03-23
申请号:CN201910842355.8
申请日:2019-09-06
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12N5/071 , C12Q1/6888
Abstract: 本发明公开了一种剑尾鱼仔鱼细胞系,其通过原代培养和传代培养构建得到,本发明还提供了剑尾鱼仔鱼细胞系在水产动物病毒分离和在环境污染物监测中的应用。本发明对剑尾鱼仔鱼进行细胞培养,初步确定了细胞的培养条件,进行了染色体分析,检测了细胞对多种水生动物病毒的敏感性,并对抗生素类环境污染物利福平对细胞的诱导效应进行了研究,该细胞系的建立为后期水生动物病毒的研究及细胞系作为体外毒理学细胞模型应用于环境污染物的毒理学相关研究奠定了基础。
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公开(公告)号:CN106811550B
公开(公告)日:2020-09-18
申请号:CN201710143487.2
申请日:2017-03-11
Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明的所述基于高分辨率溶解曲线(HRM)的草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型疫苗株和野毒株鉴别诊断检测引物,由以下1对引物组成:HRM‑Ⅱ‑F:5'CACCGGAGTTAAACTTCATCGC‑3'(SEQ ID NO:1);HRM‑Ⅱ‑R:5'CCTGTGGCAGACCGGCAGATAA 3'(SEQ ID NO:2);根据草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型疫苗株和已知的Ⅱ型野毒株S2基因5’端和3’端保守区域设计而获得,疫苗株和野毒株扩增产物之间存在一个或多个固定的碱基突变位点,这些突变位点为疫苗株所特有,满足HRM对于的GCRVⅡ型疫苗株和野毒株的鉴定分析,同时本发明还根据所述基于高分辨率溶解曲线(HRM)的草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型疫苗株和野毒株鉴别诊断检测引物设计出相应的检测试剂和以及检测方法,提高该技术的实用性能。
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