用于鉴定桉树无性系的STR引物、PCR试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN107354222A

    公开(公告)日:2017-11-17

    申请号:CN201710761216.3

    申请日:2017-08-30

    Abstract: 本发明公开了用于鉴定桉树无性系的STR引物、PCR试剂盒及方法。本发明通过大量的STR标记分型检测,筛选出了8对多态性高、扩增条带清晰的桉树STR引物用于鉴定桉树无性系,并建立了多重荧光检测体系。将该STR引物组用于鉴定桉树无性系,具有效率高、检测准确、操作方便等优势。本发明可有效甄别假冒和错乱的无性系,切实保障良种培育人和营林种植者的权益;并可为今后快速进行桉树种质资源遗传评价、遗传图谱构建、分子标记辅助育种、无性系指纹图谱构建和鉴定提供重要的技术支撑。

    一种针对二倍体PCR产物的Sanger测序中个体内SNP的识别方法

    公开(公告)号:CN103593659B

    公开(公告)日:2016-09-14

    申请号:CN201310611263.1

    申请日:2013-11-26

    Abstract: 本发明公开了一种针对二倍体PCR产物的Sanger测序中个体内SNP的识别方法,首先单独分离出色谱图中包含的腺瞟呤A、鸟瞟呤G、胞嘧啶C和胸腺嘧啶T四种碱基的荧光数据;采用小波多尺度分析方法对分离的荧光数据分别进行滤波去噪处理;再分析四种碱基荧光数据的波形特征,检测出波形的第一峰与第二峰,选择波峰距离、高度比值和起伏度比值这三个波形特征,作为SNP位点判别的要素;选择结构为3‑10‑1的BP神经网络作为SNP位点检测的分类器,并采用Levenberg Marquardt算法来对BP神经网络进行训练;采用分段线性变换将输出映射为0~100的SNP评价分数,根据评价分数将SNP位点的类别定义为1~5级,并据此判定该位点的SNP置信度。本发明能够有效检测测序文件的个体内SNP位点。

    一种针对二倍体PCR产物的Sanger测序中个体内SNP的识别方法

    公开(公告)号:CN103593659A

    公开(公告)日:2014-02-19

    申请号:CN201310611263.1

    申请日:2013-11-26

    Abstract: 本发明公开了一种针对二倍体PCR产物的Sanger测序中个体内SNP的识别方法,首先单独分离出色谱图中包含的腺瞟呤A、鸟瞟呤G、胞嘧啶C和胸腺嘧啶T四种碱基的荧光数据;采用小波多尺度分析方法对分离的荧光数据分别进行滤波去噪处理;再分析四种碱基荧光数据的波形特征,检测出波形的第一峰与第二峰,选择波峰距离、高度比值和起伏度比值这三个波形特征,作为SNP位点判别的要素;选择结构为3-10-1的BP神经网络作为SNP位点检测的分类器,并采用Levenberg Marquardt算法来对BP神经网络进行训练;采用分段线性变换将输出映射为0~100的SNP评价分数,根据评价分数将SNP位点的类别定义为1~5级,并据此判定该位点的SNP置信度。本发明能够有效检测测序文件的个体内SNP位点。

    一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法

    公开(公告)号:CN101899520A

    公开(公告)日:2010-12-01

    申请号:CN201010239919.8

    申请日:2010-07-28

    Abstract: 本发明提供了一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法,包括以下步骤:(1)配制PCR反应体系:取1.0μL 10×buffer、dNTP 25~50μM、MgCl22.0mM、前向引物0.5μM、后向引物0.5μM、Taq酶1个单位、荧光dUTP10pmol和基因组DNA 5ng混合,加超纯水补至10μL;(2)进行降落PCR:94℃4min;20个循环:94℃30s、70~60℃或者66~56℃30s且每个循环降低0.5℃、72℃1min;再26个循环:94℃30s、60或者56℃30s、72℃1min;最后72℃10min,得PCR产物;(3)取PCR产物1.0μL加入9.34μL超纯甲酰胺、0.16μL分子量内标,95℃5min后放置冰上快速冷却,在测序仪上进行标记检测。

    一种基于双酶切的简化基因组测序文库的构建方法

    公开(公告)号:CN110343741B

    公开(公告)日:2023-06-06

    申请号:CN201910665025.6

    申请日:2019-07-23

    Abstract: 本发明提供了一种基于双酶切的简化基因组测序文库的构建方法,属于全基因组重测序技术领域,包括利用限制性内切酶MspI和MseI对基因组DNA进行酶切,将接头序列分别连接到酶切产物上,得到连接产物;将连接产物进行等质量混合,将得到的混合物进行双轮磁珠分选,得到350bp的片段;以得到的片段为模板,用引物对进行PCR扩增,将得到的扩增产物纯化后,构建得到基于双酶切的简化基因组测序文库;所述引物对的上游引物的序列如SEQ ID No.1所示,下游引物的序列如SEQ ID No.2所示。采用本发明提供的构建方法最终开发的SNP位点有225,744个,提高了SNP位点的开发。

    用于鉴定桉树无性系的STR引物及其应用

    公开(公告)号:CN107385052A

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201710671363.1

    申请日:2017-08-08

    Abstract: 本发明公开了用于鉴定桉树无性系的STR引物及其应用。本发明通过大量的STR标记分型检测,筛选出了8对多态性高、扩增条带清晰的桉树STR引物用于鉴定桉树无性系,并建立了多重荧光检测体系。将该STR引物组用于鉴定桉树无性系,具有效率高、检测准确、操作方便等优势。本发明可有效甄别假冒和错乱的无性系,切实保障良种培育人和营林种植者的权益;并可为今后快速进行桉树种质资源遗传评价、遗传图谱构建、分子标记辅助育种、无性系指纹图谱构建和鉴定提供重要的技术支撑。

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