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公开(公告)号:CN112500458A
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN202011473614.3
申请日:2020-12-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行,本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计,引入了利于其正确构象形成的元件,构建了重组原核表达质粒,制备了重组大肠杆菌基因工程菌,经过表达条件和纯化条件的摸索,高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒,将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗,试验结果显示,该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100%的免疫保护,而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN111690688A
公开(公告)日:2020-09-22
申请号:CN202010426220.6
申请日:2020-05-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/90 , C12N15/869 , C12N15/66 , C12N15/113 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组马立克氏病病毒及其应用。本发明构建了靶向REV基因组序列的CRISPR/Cas9系统,通过对设计的靶向REV的sgRNAs进行筛选,获得了具有最佳敲除效果的sgRNA。研究发现,靶向REV的CRISPR/Cas9能够有效阻止REV对宿主细胞的感染。将上述CRISPR/Cas9表达框架插入MDV基因组,构建了表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV;该重组病毒能够有效阻止REV对宿主细胞的感染,并对REV强毒的攻击具有明显的预防和病毒清除作用。本发明提出的一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV有望作为一种新型疫苗用于禽网状内皮组织增生病的防控。
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公开(公告)号:CN110261599A
公开(公告)日:2019-09-20
申请号:CN201910406683.3
申请日:2019-05-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/537
Abstract: 本发明公开了一种检测A、B亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-A gp85蛋白以及截短表达的ALV-B gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV-A gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的截短表达的ALV-B gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用截短表达的A、B亚群禽白血病病毒的gp85蛋白建立了A、B亚群禽白血病病毒的抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该试剂盒用于检测A、B亚群禽白血病病毒抗体时,其敏感性与同类进口试剂盒相当,但特异性优于同类进口试剂盒,与J亚群禽白血病病毒抗体无交叉反应。本发明的提出为A、B亚群禽白血病病毒的检测和流行病学调查以及早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN110244039A
公开(公告)日:2019-09-17
申请号:CN201910367890.2
申请日:2019-05-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/536
Abstract: 本发明公开了一种检测J亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-J gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV-J gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用截短表达的J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85蛋白建立了ALV-J抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该方法特异性好,与AB亚群ALV抗体无交叉,且其敏感性和特异性优于同类进口试剂盒,本发明的提出为ALV-J的检测和流行病学调查以及ALV-J的早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN116478937A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310686418.1
申请日:2023-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株基因III型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。本发明从送检的病鸡关节组织中成功分离到1株基因III型禽呼肠孤病毒变异株,命名为ARV‑HLJ21‑1690401,该变异株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC NO.45563。σC基因遗传进化分析结果表明,该变异株位于ARV基因III型分支。该变异株对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性,可引起接种鸡胚90%死亡,接种6周龄SPF鸡100%发病。将其制备灭活疫苗,免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平,并能为同基因型毒株提供完全免疫保护。本发明的提出为预防禽呼肠孤病毒病提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN116445493A
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202211216666.1
申请日:2022-09-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种突变后的Tva基因及其在抗A亚群及K亚群禽白血病病毒感染中的应用。所述的突变后的禽白血病病毒受体基因(Tva)所编码的Tva蛋白的第58位的氨基酸G突变为N、第59位的H突变为D,第69位的W突变为L、第70位的G突变为PQR。本发明发现Tva作为A亚群及K亚群禽白血病病毒的共受体分子,将其关键功能性氨基酸位点G58、H59、W69及G70突变后,构建相应的Tva表达质粒,将其转染Tva缺失的DF‑1细胞后,其无法介导A、K亚群ALV感染宿主细胞,丧失了其作为禽白血病病毒受体的功能。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立同时抗A、K亚群ALV感染的细胞系提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN115287270B
公开(公告)日:2023-01-06
申请号:CN202211223789.8
申请日:2022-10-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , A61P11/02 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种B亚型禽偏肺病毒传代致弱株及其应用。本发明通过在Vero细胞中连续传代来致弱LN16‑V毒株,获得了致弱株LN16‑A,命名为LN16‑A株,其保藏号为:CGMCC NO.45261。将传代致弱株LN16‑A免疫3周龄SPF鸡并进行了系统的免疫保护评价,结果表明LN16‑A免疫机体后,可以诱导产生较高水平的aMPV特异性抗体和中和抗体,对强毒的攻击可提供100%的免疫保护,具有良好的免疫保护效果,可以有效预防强毒攻击造成的病理损伤。本发明为B亚型禽偏肺病毒病的防控提供了新的技术手段,对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号:CN110261599B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN201910406683.3
申请日:2019-05-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/537
Abstract: 本发明公开了一种检测A、B亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV‑A gp85蛋白以及截短表达的ALV‑B gp85蛋白的酶标板,其中,所述的截短表达的ALV‑A gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述的截短表达的ALV‑B gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用截短表达的A、B亚群禽白血病病毒的gp85蛋白建立了A、B亚群禽白血病病毒的抗体间接ELISA检测方法,试验表明,该试剂盒用于检测A、B亚群禽白血病病毒抗体时,其敏感性与同类进口试剂盒相当,但特异性优于同类进口试剂盒,与J亚群禽白血病病毒抗体无交叉反应。本发明的提出为A、B亚群禽白血病病毒的检测和流行病学调查以及早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号:CN111647568A
公开(公告)日:2020-09-11
申请号:CN202010312138.0
申请日:2020-04-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株反向遗传疫苗株及其应用。所述的鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株反向遗传疫苗株,命名为rGtVarVP2,该疫苗株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.19383,保藏时间为2020年3月12日。rGtVarVP2是一株以弱毒株Gt为骨架,其主要保护性抗原基因VP2被新型变异株SHG19相应区段替换的重组IBDV,且SHG19的VP2被引入了双点突变Q253H/A284T。双点突变Q253H/A284T的引入使原本不能够适应体外细胞系的重组毒株能够在DF1细胞上增殖。将重组病毒rGtVarVP2在DF1细胞上扩繁,然后制备成IBDV新型变异株反向遗传疫苗(rGtVarVP2株),动物试验表明,IBDV新型变异株反向遗传疫苗(rGtVarVP2株)安全、有效。
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公开(公告)号:CN110358733A
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201910439753.5
申请日:2019-05-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株稳定表达A亚群禽白血病病毒(ALV-A)gp85蛋白的细胞系及应用。所述的稳定表达A亚群禽白血病病毒gp85蛋白的细胞系,命名为293F-Agp85,该细胞系保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其菌种保藏编号为CGMCC NO.17420。实验证明,该细胞系可以高效稳定表达A亚群禽白血病病毒gp85蛋白,其表达量高达25mg/L。此外,通过与细胞受体Tva互作和结合试验结果表明,由本发明细胞系表达获得的ALV-A gp85蛋白具有正常的生物学活性,能够与细胞受体正常结合,并没有影响其生物学活性,且由于其表达量高,不需要转染,成本低,在体外研究ALV-A感染细胞的机制和建立抗体检测方法等防控技术领域将具有良好的应用前景和意义。
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