公开(公告)号：CN114891095A

公开(公告)日：2022-08-12

申请号：CN202210382554.7

申请日：2022-04-13

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 孙明霞 ,  安同庆 ,  孙悦 ,  杨勇博

IPC: C07K16/10 ,  C07K19/00 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种用于检测PRRSV抗原的纳米抗体对、试剂盒及其应用，属于生物技术检测技术领域。为了提供一种特异性检测PRRS病毒的抗体对。本发明提供了一种用于检测PRRSV抗原的Nb12抗体和N35抗体，Nb12抗体的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7‑9，N35抗体可变区序列如SEQ ID NO:10‑12。抗体对能特异性识别PRRSV抗原，最低检测1.0×103TCID50/100μL病毒。

公开(公告)号：CN114656553A

公开(公告)日：2022-06-24

申请号：CN202210267146.7

申请日：2022-03-17

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 孙明霞 ,  蔡雪辉 ,  汤艳东

IPC: C07K16/08 ,  C12N5/20 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  G01N33/58 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一株识别非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)P72蛋白的单克隆抗体、含有该单克隆抗体的试剂盒及其应用。其中，能够特异性识别并阻断ASFV P72抗体的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.45030的杂交瘤细胞株分泌产生。通过间接免疫荧光实验和WB试验，鉴定所得到的单克隆抗体特异性识别P72蛋白构象表位，阻断ELISA试验结果表明，该单克隆抗体可以竞争性阻断猪血清中ASFV抗体与P72蛋白结合。本发明以偶联HRP单克隆抗体为竞争抗体，建立了一种阻断ELISA方法，该ELISA方法可以特异性检测ASFV感染的猪血清中抗体水平，操作简便，特异性好，敏感性高。本发明为ASFV感染的临床诊断和流行病学调查提供了一种新的检测手段。

公开(公告)号：CN111057145B

公开(公告)日：2021-10-08

申请号：CN201911157547.1

申请日：2019-11-22

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 蔡雪辉 ,  刘永刚 ,  孙明霞 ,  宋欢

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2蛋白纳米抗体及其应用。所述的纳米抗体命名为Nb12，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明将截短表达的Nsp2重组蛋白免疫骆驼后分离骆驼外周血淋巴细胞利用RT‑PCR扩增经过免疫的双峰驼VHH基因，将其连入pCANTAB 5E噬菌体载体，构建双峰驼重链抗体可变区文库，利用噬菌体展示技术经过3轮淘选，共筛选到44株Nsp2特异性纳米抗体，试验证明这些纳米抗体能够与Nsp2蛋白特异性反应，其中Nb12有较强的结合力。抗病毒试验结果表明在接毒量为0.01个MOI时，纳米抗体Nb12在PAM细胞和Marc‑145细胞上均显示出对病毒复制的抑制作用。因此，本发明的提出为后续PRRSV Nsp2的研究以及PRRSV的防控和诊断提供了新的技术手段。

公开(公告)号：CN117487006B

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202311839446.9

申请日：2023-12-29

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) ,  兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

Inventor： 孟凡丹 ,  安同庆 ,  蔡雪辉 ,  孙明霞 ,  汤艳东 ,  王海伟 ,  周函蓉 ,  卢宇 ,  陈瑾

IPC: C07K16/10 ,  C07K14/085 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  A61K39/125 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供一种抗A型塞内卡病毒的单克隆抗体以及抗原表位及应用，属于生物抗体技术领域。本发明为了提供一种能够特异性识别SVA VP2蛋白的抗体序列，及该抗体识别的抗原位点序列。本发明提供一株抗A型塞内卡病毒的单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。为进一步合理设计表位疫苗，开发SVA感染特异性血清学诊断方法提供依据。

公开(公告)号：CN117487006A

公开(公告)日：2024-02-02

申请号：CN202311839446.9

申请日：2023-12-29

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) ,  兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

Inventor： 孟凡丹 ,  安同庆 ,  蔡雪辉 ,  孙明霞 ,  汤艳东 ,  王海伟 ,  周函蓉 ,  卢宇 ,  陈瑾

IPC: C07K16/10 ,  C07K14/085 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  A61K39/125 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供一种抗A型塞内卡病毒的单克隆抗体以及抗原表位及应用，属于生物抗体技术领域。本发明为了提供一种能够特异性识别SVA VP2蛋白的抗体序列，及该抗体识别的抗原位点序列。本发明提供一株抗A型塞内卡病毒的单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。为进一步合理设计表位疫苗，开发SVA感染特异性血清学诊断方法提供依据。

公开(公告)号：CN116444682A

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202310342828.4

申请日：2023-03-31

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 孟凡丹 ,  孙明霞 ,  安同庆 ,  蔡雪辉 ,  汤艳东 ,  苏世博

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  A61K39/395 ,  A61K39/385 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种靶向降解PRRSV关键复制酶的生物型蛋白降解靶向嵌合体及其应用。所述的生物型蛋白降解靶向嵌合体由1至多个PRRSVnsp9纳米抗体nsp9nb及/或nsp2纳米抗体nsp2nb串联后再与E3泛素连接酶接头蛋白SPOP中BTB结构域融合后得到。本发明利用筛选出的特异性结合PRRSV关键复制酶Nsp2，Nsp9蛋白的纳米抗体，并用纳米抗体替代E3泛素连接酶复合体(SPOP)底物识别结构域，构建靶向降解PRRSV关键复制酶的生物型蛋白降解靶向嵌合体。本发明的提出为PRRS的治疗以及抗PRRS育种提供了新的技术手段。

公开(公告)号：CN109536456A

公开(公告)日：2019-03-29

申请号：CN201811261025.1

申请日：2018-10-26

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) ,  哈尔滨维科生物技术开发公司

Inventor： 蔡雪辉 ,  孙明霞 ,  涂亚斌 ,  王淑杰

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/08 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明公开了一种识别PCV2病毒样颗粒的单克隆抗体及其在定性及定量检测PCV2病毒样颗粒中的应用。其中，能够特异性识别猪圆环病毒2型病毒样颗粒的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.15793的杂交瘤细胞株分泌产生。通过间接免疫荧光实验鉴定所得到的单克隆抗体3H9的特异性，结果表明该单克隆抗体可以特异性识别PCV2病毒粒子，并且能够与PCV2 VLPs反应，而不与线性cap蛋白包被的ELISA板反应。因此，本发明建立了一种可以同时定性和定量分析PCV2 VLPs的简便方法，解决了PCV2 VLP粒子结构检测仪器昂贵，操作困难以及定量方法不能区分非特异性蛋白和破碎亚基的问题。