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公开(公告)号：CN118325854A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410750444.0
申请日：2024-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种表达varIBDV VP2基因的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒株及其构建方法与应用。所述的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒株是利用重组克隆技术，将包含CMV启动子序列、varIBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入Meq基因缺失的马立克氏病病毒株rMSΔMeq US2基因内部，并替换rMSΔMeq基因组第156501‑157116位之间的核苷酸序列获得的，命名为rMDV‑varVP2。研究表明，本发明获得的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒rMDV‑varVP2具有与亲本病毒rMSΔMeq株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且，rMDV‑varVP2免疫鸡后可对IBDV变异株提供良好的保护效果。本发明为重组MDV活载体疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN117625688B
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410109544.5
申请日：2024-01-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了B亚型禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus,aMPV)反向遗传操作系统及其应用。所述的反向遗传操作系统包括B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒以及辅助质粒，所述的B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了该系统在研究B亚型禽偏肺病毒致病机制以及制备以B亚型禽偏肺病毒为载体的疫苗中的应用。通过该反向遗传操作系统本发明制备得到了一种表达vvIBDV VP2蛋白的重组B亚型aMPV弱毒疫苗株，并对该疫苗株的免疫保护效果进行评价，结果发现该疫苗株可对vvIBDV和aMPV两种病毒提供100%的免疫保护。本发明为B亚型禽偏肺病毒致病机制的研究以及作为疫苗载体提供了技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117625688A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202410109544.5
申请日：2024-01-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了B亚型禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus,aMPV)反向遗传操作系统及其应用。所述的反向遗传操作系统包括B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒以及辅助质粒，所述的B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了该系统在研究B亚型禽偏肺病毒致病机制以及制备以B亚型禽偏肺病毒为载体的疫苗中的应用。通过该反向遗传操作系统本发明制备得到了一种表达vvIBDV VP2蛋白的重组B亚型aMPV弱毒疫苗株，并对该疫苗株的免疫保护效果进行评价，结果发现该疫苗株可对vvIBDV和aMPV两种病毒提供100%的免疫保护。本发明为B亚型禽偏肺病毒致病机制的研究以及作为疫苗载体提供了技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116836945A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310747124.5
申请日：2023-06-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。所述的基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑JS20‑9304，其保藏号为：CGMCCNO.45564。将本发明分离得到的ARV‑JS20‑9304毒株制备灭活疫苗免疫SPF鸡，攻毒后连续观察10天，每日观察鸡只临床症状并记录发病情况。实验结果发现，灭活疫苗免疫组在整个观察期内，鸡只未出现任何发病状态，所有鸡只精神状态良好，爪垫也未出现任何肿胀状态，表明ARV‑JS20‑9304毒株制备灭活疫苗可为同基因型强毒提供完全保护。本发明的提出为当前鸡呼肠孤病毒新基因型疫苗储备研究提供了新的候选疫苗株，同时也为了解我国ARV变异株的流行及遗传进化特征提供了重要的理论依据。
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公开(公告)号：CN116574696A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202211057927.X
申请日：2022-08-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种构建表达IBDVVP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒疫苗株的方法、该疫苗株和应用，属于医学或兽医学技术领域。所述的表达IBDVVP2基因的重组火鸡疱疹病毒是由含有HVT基因组DNA片段的重组粘粒H1、H2、H3、H5以及含有VP2表达框架的重组粘粒H4UL55‑VP2共转染CEF细胞后，通过病毒拯救获得的。具体地，本发明利用重组克隆技术，将包含IBDVVP2基因以及CMV启动子的基因片段CMV‑VP2插入到火鸡疱疹病毒(HVT)的UL55和HVT066基因之间的间隔区中，构建获得在UL55和HVT066基因之间插入CMV‑VP2表达框架的重组粘粒，由其拯救获得表达IBDVVP2基因的重组HVT疫苗株rHVTUL55‑VP2。本发明还涉及该重组HVT疫苗株在制备鸡传染性法氏囊病疫苗中的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115704032A
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202210114184.9
申请日：2022-01-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/55 , C12N15/85 , C07K14/705
Abstract: 本发明公开了一种突变后的A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)受体基因及其在抗A亚群禽白血病病毒感染中的应用。本发明鉴定了介导A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)感染鸡细胞的受体蛋白Tva的关键功能性氨基酸位点为L55及W69，发现将这两个位点突变后，将导致ALV‑A无法感染宿主细胞。进一步的，本发明还公开了一种构建抗ALV‑A感染的DF‑1细胞系的方法，该方法利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选，将Tva基因作为ALV‑A受体的关键氨基酸位点L55及W69进行突变。结果表明，含有L55及W69位点突变的替换序列可高效定点替换Tva基因的相应序列；Tva基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑A的感染。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立抗ALV‑A感染新技术奠定基础。
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公开(公告)号：CN112501129B
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202011466765.6
申请日：2020-12-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了抗IBDV VP2蛋白的单克隆抗体组合及其在鉴别检测IBDV中的用途。所述的单克隆抗体组合由抗IBDV VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D以及25C所分泌的单克隆抗体组成，其中杂交瘤细胞株7D以及25C的菌种保藏编号分别为CGMCC NO.21009以及CGMCC NO.21008。实验证明，7D对IBDV经典毒、超强毒和变异株均能识别，而25C只能识别IBDV经典毒和超强毒，不能识别IBDV变异株。此外，本发明还利用该两株单克隆抗体建立了间接免疫荧光技术，可鉴别检测IBDV变异株和非变异株(经典毒和超强毒)，因此，本发明的提出为IBDV的鉴别提供了新的技术手段，对于IBD的综合防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111690688B
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202010426220.6
申请日：2020-05-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/90 , C12N15/869 , C12N15/66 , C12N15/113 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组马立克氏病病毒及其应用。本发明构建了靶向REV基因组序列的CRISPR/Cas9系统，通过对设计的靶向REV的sgRNAs进行筛选，获得了具有最佳敲除效果的sgRNA。研究发现，靶向REV的CRISPR/Cas9能够有效阻止REV对宿主细胞的感染。将上述CRISPR/Cas9表达框架插入MDV基因组，构建了表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV；该重组病毒能够有效阻止REV对宿主细胞的感染，并对REV强毒的攻击具有明显的预防和病毒清除作用。本发明提出的一种表达靶向REV的CRISPR/Cas9的重组MDV有望作为一种新型疫苗用于禽网状内皮组织增生病的防控。
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公开(公告)号：CN111235117B
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202010090643.5
申请日：2020-02-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其应用。所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株命名为IBD17JL01，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.19291。该病毒株为本发明首次分离鉴定的一株自然适应DF1和CEF体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典毒株，该株病毒能够直接在体外传代细胞系DF1细胞、CEF细胞或DT40细胞上增殖。将该毒株灭活后制备成灭活疫苗，可使免疫雏鸡对强毒攻击产生100％的保护效果。因此，该病毒株(IBD17JL01株)可以作为天然适应体外细胞培养的疫苗候选株，用于IBDV的免疫防控。
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公开(公告)号：CN113151193A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110308742.0
申请日：2021-03-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , C12N15/63 , C12N15/66 , A61K39/235 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一株血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rR188I及其构建方法和应用。本发明的疫苗株rR188I是在我国FAdV‑4新近分离株HLJFAd15基因组全长的感染性克隆粘粒Fos‑rFAdV4基础上将Hexon基因的第563位碱基由G突变为A，即编码的第188位氨基酸由R突变为I，获得感染性克隆粘粒Fos‑rR188I，然后利用Fos‑rR188I成功拯救出疫苗株rR188I。致病性实验显示rR188I对SPF鸡无致病性(突变之前具有100％的死亡率)。免疫保护实验证明，接种rR188I的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株的攻毒感染，证明rR188I具有非常好的免疫原性，可以作为疫苗候选毒株，同时致弱毒株大大降低了强毒株生物安全的隐患。
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