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公开(公告)号：CN117625688B
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410109544.5
申请日：2024-01-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了B亚型禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus,aMPV)反向遗传操作系统及其应用。所述的反向遗传操作系统包括B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒以及辅助质粒，所述的B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了该系统在研究B亚型禽偏肺病毒致病机制以及制备以B亚型禽偏肺病毒为载体的疫苗中的应用。通过该反向遗传操作系统本发明制备得到了一种表达vvIBDV VP2蛋白的重组B亚型aMPV弱毒疫苗株，并对该疫苗株的免疫保护效果进行评价，结果发现该疫苗株可对vvIBDV和aMPV两种病毒提供100%的免疫保护。本发明为B亚型禽偏肺病毒致病机制的研究以及作为疫苗载体提供了技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117625688A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202410109544.5
申请日：2024-01-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了B亚型禽偏肺病毒(Avian metapneumovirus,aMPV)反向遗传操作系统及其应用。所述的反向遗传操作系统包括B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒以及辅助质粒，所述的B亚型禽偏肺病毒全长cDNA感染性克隆质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了该系统在研究B亚型禽偏肺病毒致病机制以及制备以B亚型禽偏肺病毒为载体的疫苗中的应用。通过该反向遗传操作系统本发明制备得到了一种表达vvIBDV VP2蛋白的重组B亚型aMPV弱毒疫苗株，并对该疫苗株的免疫保护效果进行评价，结果发现该疫苗株可对vvIBDV和aMPV两种病毒提供100%的免疫保护。本发明为B亚型禽偏肺病毒致病机制的研究以及作为疫苗载体提供了技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116836945A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310747124.5
申请日：2023-06-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。所述的基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑JS20‑9304，其保藏号为：CGMCCNO.45564。将本发明分离得到的ARV‑JS20‑9304毒株制备灭活疫苗免疫SPF鸡，攻毒后连续观察10天，每日观察鸡只临床症状并记录发病情况。实验结果发现，灭活疫苗免疫组在整个观察期内，鸡只未出现任何发病状态，所有鸡只精神状态良好，爪垫也未出现任何肿胀状态，表明ARV‑JS20‑9304毒株制备灭活疫苗可为同基因型强毒提供完全保护。本发明的提出为当前鸡呼肠孤病毒新基因型疫苗储备研究提供了新的候选疫苗株，同时也为了解我国ARV变异株的流行及遗传进化特征提供了重要的理论依据。
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公开(公告)号：CN115704032A
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202210114184.9
申请日：2022-01-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/55 , C12N15/85 , C07K14/705
Abstract: 本发明公开了一种突变后的A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)受体基因及其在抗A亚群禽白血病病毒感染中的应用。本发明鉴定了介导A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)感染鸡细胞的受体蛋白Tva的关键功能性氨基酸位点为L55及W69，发现将这两个位点突变后，将导致ALV‑A无法感染宿主细胞。进一步的，本发明还公开了一种构建抗ALV‑A感染的DF‑1细胞系的方法，该方法利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选，将Tva基因作为ALV‑A受体的关键氨基酸位点L55及W69进行突变。结果表明，含有L55及W69位点突变的替换序列可高效定点替换Tva基因的相应序列；Tva基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑A的感染。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立抗ALV‑A感染新技术奠定基础。
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公开(公告)号：CN119842636A
公开(公告)日：2025-04-18
申请号：CN202510315013.6
申请日：2025-03-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/34 , C12N15/63 , C12N15/66 , A61K39/255 , A61K39/235 , A61K39/295 , A61K35/761 , A61K35/763 , A61K48/00 , A61P31/14 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了一种表达血清4型禽腺病毒Fiber2基因的重组马立克氏病病毒及其构建方法和应用，属于生物技术领域。所述的重组马立克氏病病毒是将包含SV40启动子序列、FAdV‑4 Fiber2基因及终止子序列的基因片段SV40‑Fiber2插入马立克氏病病毒Meq基因缺失疫苗株的UL41基因内部获得的。攻毒保护试验结果表明，重组病毒rMDV‑Fiber2免疫鸡后对FAdV‑4以及MDV攻毒能够提供良好保护，对FAdV‑4强毒株以及MDV强毒攻击引起的死亡分别提供80%以及100%保护。重组病毒rMDV‑Fiber2的构建为研制HHS重组MDV活载体疫苗提供了技术手段，对HHS的防控具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119736256A
公开(公告)日：2025-04-01
申请号：CN202411894723.0
申请日：2024-12-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024399的杂交瘤细胞，本发明公开了前述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。该抗体能够识别鸡白细胞介素‑1β前体蛋白。
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公开(公告)号：CN118325854B
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202410750444.0
申请日：2024-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种表达varIBDV VP2基因的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒株及其构建方法与应用。所述的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒株是利用重组克隆技术，将包含CMV启动子序列、varIBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入Meq基因缺失的马立克氏病病毒株rMSΔMeq US2基因内部，并替换rMSΔMeq基因组第156501‑157116位之间的核苷酸序列获得的，命名为rMDV‑varVP2。研究表明，本发明获得的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒rMDV‑varVP2具有与亲本病毒rMSΔMeq株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且，rMDV‑varVP2免疫鸡后可对IBDV变异株提供良好的保护效果。本发明为重组MDV活载体疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN117625689B
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410109575.0
申请日：2024-01-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/45 , C12N15/40 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/155 , A61K39/15 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达IBDV VP2蛋白的B亚型禽偏肺病毒疫苗株。所述的疫苗株是由表达传染性法氏囊病病毒新型变异株VP2蛋白的重组B亚型禽偏肺病毒株全长cDNA感染性克隆质粒通过病毒拯救后获得的，所述的质粒命名为pOK‑LN16A‑nVarVP2，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。将拯救后获得的rLN16A‑nVarVP2株免疫2周龄SPF鸡并进行了免疫保护评价，发现rLN16A‑nVarVP2株可同时诱导免疫鸡只产生针对nVarIBDV和aMPV的中和抗体，可对nVarIBDV和aMPV两种病毒提供100%免疫保护，并且有效的预防aMPV和nVarIBDV对靶器官鼻甲骨和法氏囊的病理损伤。因此，本发明的提出为B亚型aMPV和nVarIBDV两种病毒病的防控提供了新的技术手段，对家禽业健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116478937B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202310686418.1
申请日：2023-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株基因III型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。本发明从送检的病鸡关节组织中成功分离到1株基因III型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑HLJ21‑1690401，该变异株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.45563。σC基因遗传进化分析结果表明，该变异株位于ARV基因III型分支。该变异株对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性，可引起接种鸡胚90%死亡，接种6周龄SPF鸡100%发病。将其制备灭活疫苗，免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平，并能为同基因型毒株提供完全免疫保护。本发明的提出为预防禽呼肠孤病毒病提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN115704033A
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202210114185.3
申请日：2022-01-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/55 , C12N15/85 , C07K14/705
Abstract: 本发明公开了一种突变后的K亚群禽白血病病毒(ALV‑K)受体基因(Tva)及其在抗K亚群禽白血病病毒感染中的应用。本发明鉴定了介导ALV‑K感染鸡细胞的受体蛋白Tva的关键功能性氨基酸位点E53、L55、H59及G70，发现将这四个位点突变后，将导致ALV‑K无法感染宿主细胞。进一步的，本发明还公开了一种构建抗ALV‑K感染的DF‑1细胞系的方法，该方法利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选，将Tva基因作为ALV‑K受体的关键氨基酸位点E53、L55、H59及G70进行突变。结果表明，含有上述位点突变的替换序列可高效定点替换Tva基因的相应序列；Tva基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑K的感染。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立抗ALV‑K感染新技术奠定了基础。
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