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公开(公告)号：CN109295005B
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN201811126187.4
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体2H1的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号是CGMCC NO.16212的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明进一步提供了采用该单抗为检测抗体所建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、竞争性强、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN116694578A
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202310482267.8
申请日：2023-04-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了稳定表达T7聚合酶细胞系、轮状病毒反向遗传系统及其构建方法和应用。本发明从新生犊牛腹泻粪便中分离获得两株牛轮状病毒分离株并进一步构建稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系，其微生物保藏编号是：CGMCC No.45342；在此基础上建立了轮状病毒的反向遗传操作系统并拯救了牛轮状病毒分离株、疫苗株BLR株以及表达ZsGreen的报告病毒株，仅需构建牛轮状病毒株的全基因组的11质粒、不依赖辅助质粒即高效拯救病毒，拯救效率达100％。本发明应用所构建反向遗传操作系统对猴轮状病毒株、猪轮状病毒株和人轮状病毒株进行拯救，均能拯救获得相应的病毒，表明本发明建立的轮状病毒反向遗传系统具有毒株广谱性。
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公开(公告)号：CN109293747A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126936.3
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系2H1，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，并且与检测血清有强竞争性。本发明准确鉴定了单抗2H1所识别的抗原表位，其序列为SEQ ID No.2所示；本发明对该抗原表位肽突变得到系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体与口蹄疫感染猪、牛、羊的FMDV抗体阳性血清呈现良好反应能力，用其作为包被抗原建立的抗体ELISA试剂盒能准确区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，并且用一种该检测试剂盒就能检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109293748A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126944.8
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10，其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力，并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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