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公开(公告)号:CN111961654B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202010780070.9
申请日:2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了耐热表型稳定遗传、携带负标记的重组口蹄疫病毒无毒株及O/A型口蹄疫二价灭活疫苗。本发明构建FMDV病毒cDNA感染性克隆质粒,其携带有病毒衣壳耐热表型的分子决定因素、在体内失去复制能力的分子因素、3A和3B蛋白表位缺失的负标记因素及在P1编码区两侧引入Pst I酶切位点,可针对任何流行株替换其衣壳蛋白编码区快速构建并拯救热稳定而且被标记的口蹄疫病毒无毒株,用作口蹄疫灭活疫苗种子病毒。用该通用质粒针对当前两个优势流行株构建两株重组病毒并用其制备O/A型口蹄疫二价灭活疫苗,免疫动物诱导高水平中和抗体并产生免疫保护;用该疫苗接种动物进行抗体检测可实现疫苗接种动物与自然感染动物的鉴别诊断。
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公开(公告)号:CN109295005B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN201811126187.4
申请日:2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体2H1的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号是CGMCC NO.16212的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系,其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,与血清竞争性强,可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明进一步提供了采用该单抗为检测抗体所建立的阻断ELISA检测试剂盒,采用一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、竞争性强、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号:CN113801854A
公开(公告)日:2021-12-17
申请号:CN202110995235.9
申请日:2021-08-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(European type Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,EU‑type PRRSV)特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系及其应用,还公开了由该杂交瘤细胞系分泌的抗欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的特异性单克隆抗体及竞争ELISA方法的建立。该杂交瘤细胞系命名为EU1,其微生物保藏号是:CGMCC NO.23019。本发明的杂交瘤细胞系能够稳定分泌特异性识别EU‑type PRRSV的单克隆抗体,可用于特异性针对EU‑type PRRSV的竞争ELISA方法的建立。本发明的EU1杂交瘤细胞系及其分泌的单克隆抗体可以用于制备竞争法抗体诊断试剂盒,基于EU1建立的抗体鉴别诊断试剂盒可以区分EU‑type PRRSV和其它类型PRRSV的感染。
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公开(公告)号:CN118359708A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410431956.0
申请日:2024-04-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体及其应用,涉及生物检测技术领域。该单克隆抗体包括氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的轻链CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示的轻链CDR2、氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示的轻链CDR3、氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示的重链CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示的重链CDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示的重链CDR3。该单克隆抗体可以特异性识别北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒,从而为鉴别北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒及其抗体提供了有力的技术支持。
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公开(公告)号:CN117965808A
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202410192009.0
申请日:2024-02-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了PRRSV‑1和PRRSV‑2双重荧光一步RT‑PCR引物探针组合、试剂盒及应用,属于分子生物学技术领域。所述引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑6所示,利用该引物探针组合构建的PRRSV‑1和PRRSV‑2双重荧光一步RT‑PCR试剂盒以及检测方法,可以一步实现用于对不同样本中PRRSV‑1和PRRSV‑2的核酸检测,具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点。本发明可以对不同亚型的PRRSV‑1毒株和PRRSV‑2毒株实现全覆盖区分检测,具有重要的实际应用价值。
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公开(公告)号:CN113801854B
公开(公告)日:2023-02-28
申请号:CN202110995235.9
申请日:2021-08-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(European type Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,EU‑type PRRSV)特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞系及其应用,还公开了由该杂交瘤细胞系分泌的抗欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的特异性单克隆抗体及竞争ELISA方法的建立。该杂交瘤细胞系命名为EU1,其微生物保藏号是:CGMCC NO.23019。本发明的杂交瘤细胞系能够稳定分泌特异性识别EU‑type PRRSV的单克隆抗体,可用于特异性针对EU‑type PRRSV的竞争ELISA方法的建立。本发明的EU1杂交瘤细胞系及其分泌的单克隆抗体可以用于制备竞争法抗体诊断试剂盒,基于EU1建立的抗体鉴别诊断试剂盒可以区分EU‑type PRRSV和其它类型PRRSV的感染。
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公开(公告)号:CN109293747A
公开(公告)日:2019-02-01
申请号:CN201811126936.3
申请日:2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系2H1,其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,并且与检测血清有强竞争性。本发明准确鉴定了单抗2H1所识别的抗原表位,其序列为SEQ ID No.2所示;本发明对该抗原表位肽突变得到系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体与口蹄疫感染猪、牛、羊的FMDV抗体阳性血清呈现良好反应能力,用其作为包被抗原建立的抗体ELISA试剂盒能准确区分FMDV感染血清与抗原免疫血清,并且用一种该检测试剂盒就能检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号:CN109293748A
公开(公告)日:2019-02-01
申请号:CN201811126944.8
申请日:2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10,其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力,并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定,其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示,位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清,采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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