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公开(公告)号：CN101481703A
公开(公告)日：2009-07-15
申请号：CN200910076382.5
申请日：2009-01-14
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种禽源启动子表达载体及其构建方法与应用。该禽源启动子表达载体是一种环状载体，包含原核复制起点、一个真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒；所述外源基因表达盒自上游至下游依次含有LTR启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号；所述LTR启动子的核苷酸序列为序列表中序列1自5′末端第1－607位；所述连接片段含有EcoRV识别序列。使用本发明的pAPP－Vector构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效，可以快速完成大量外源基因的表达载体的构建。将在转基因动物研究中发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN101463362A
公开(公告)日：2009-06-24
申请号：CN200910077103.7
申请日：2009-01-15
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种融合表达绿色荧光蛋白的表达载体及其构建方法与应用。该载体是一种环状载体，包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和绿色荧光蛋白基因表达盒；所述绿色荧光蛋白基因表达盒自上游至下游依次由两个转录方向相同的启动子、连接片段、绿色荧光蛋白编码区基因和多聚腺苷酸加尾信号组成；所述绿色荧光蛋白编码区基因缺失起始密码子，所述连接片段含有EcoRV识别序列，所述绿色荧光蛋白编码区基因自5’末端第1位和第2位与EcoRV识别序列自5’末端的最后两位重叠；所述连接片段含有或不含有起始密码子；当所述连接片段含有起始密码子时，所述起始密码子与所述EcoRV识别序列自5’末端第一位间隔2+3n或1+3n位，n为正整数。该载体含有绿色荧光蛋白基因，且只有在插入的外源基因正确表达的情况下才能表达，从而可以有效的排除出发载体表达荧光而出现的干扰问题。
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公开(公告)号：CN101348777A
公开(公告)日：2009-01-21
申请号：CN200810117227.9
申请日：2008-07-25
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种A型流感病毒核蛋白捕获ELISA抗原诊断试剂盒及专用单克隆抗体。该抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体，是由保藏号为CGMCC No.2575的对A型流感病毒NP蛋白杂交瘤细胞株C4分泌产生的。该试剂盒，包括已包被所述的单克隆抗体的固体载体和酶标记的所述的单克隆抗体。本发明的抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体效价和特异性高。所述的试剂盒操作简单，敏感性高，特异性强，可用于A型流感病毒临床检测和实验室检测，具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN1635163A
公开(公告)日：2005-07-06
申请号：CN200410088716.8
申请日：2004-11-01
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测H5N1亚型禽流感病毒的方法及其专用试剂盒。本发明提供的检测H5N1亚型禽流感病毒的专用试剂盒，包括A型禽流感病毒通用引物NPF和NPL，H5亚型禽流感病毒血凝素的特异性引物H5F和H5L以及N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶特异性引物N1F和N1L；所述NPF具有序列表中序列1的核苷酸序列，所述NPL具有序列表中序列2的核苷酸序列，所述H5F具有序列表中序列3的核苷酸序列，所述H5L具有序列表中序列4的核苷酸序列，所述N1F具有序列表中序列5的核苷酸序列，所述N1L具有序列表中序列6的核苷酸序列。本发明的方法及试剂盒不但可用于实验室的诊断与科研，还可用于大规模的流行病学调查。
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公开(公告)号：CN110438258B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201910661585.4
申请日：2019-07-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明涉及病毒分子生物学技术领域，具体涉及一种利用凝胶迁移检测H7N9亚型禽流感病毒基因组vRNA‑vRNA相互作用的方法。本发明将H7N9亚型禽流感病毒的待测RNA对经变性、杂交后进行凝胶迁移，分析所述待测RNA对的相互作用。利用本发明的方法能够得到纯度和浓度较高的H7N9病毒基因组RNA片段，同时能够有效保证杂交的特异性和敏感性，RNA杂交条带清晰，进而显著提高了vRNA‑vRNA相互作用检测的准确性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109402071B
公开(公告)日：2021-04-27
申请号：CN201811324183.7
申请日：2018-11-08
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/44 , C07K14/11 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种表达H9N2亚型禽流感病毒H9蛋白的重组火鸡疱疹病毒。该重组火鸡疱疹病毒是出发火鸡疱疹病毒的基因组进行如下改造得到的：增加了含有H9N2亚型禽流感病毒H9蛋白的编码基因的DNA分子；所述H9N2亚型禽流感病毒H9蛋白的氨基酸序列如序列表中序列2所示。实验证明，实验第1天，向1日龄SPF鸡颈部皮下接种重组火鸡疱疹病毒；实验第35天，鼻腔接种BJ/15病毒株；实验第38天和第40天，SPF鸡的口腔和泄殖腔均不排毒，BJ/15病毒株不能够在SPF鸡的脏器(如内脏器官、气管、肺、脾和肾脏)中有效复制。由此可见，重组火鸡疱疹病毒对H9N2亚型AIV具有优良的免疫保护效果。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN106636475B
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN201710119861.5
申请日：2017-03-01
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测北美H3N8亚型犬流感病毒的引物组及其应用。本发明提供了一种引物组，包括引物对甲和引物对乙；所述引物对甲由引物F1和引物R1组成；所述引物对乙由引物F2和引物R2组成；引物F1如序列1所示；引物R1如序列2所示；引物F2如序列3所示；引物R2如序列4所示。所述引物组的用途为如下(c1)辅助鉴定北美H3N8亚型犬流感病毒；(c2)辅助鉴定待测样本中是否含有北美H3N8亚型犬流感病毒。采用本发明提供的引物组进行检测，特异性好、敏感性高，只需要4‑5小时的时间即可对临床样品进行检测，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用，对于北美H3N8亚型犬流感病毒疫病诊断和流行病学调查具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN110512026A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201910661584.X
申请日：2019-07-22
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6816 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒分子生物学技术领域，具体涉及一种检测H7N9亚型禽流感病毒基因组vRNA-vRNA相互作用的生物素标记方法。本发明采用生物素标记H7N9亚型禽流感病毒的待测RNA对，将待测RNA对经变性、杂交和凝胶迁移后，通过链霉亲和素结合反应对待测RNA对的相互作用进行分析。利用本发明的方法能够得到纯度和浓度较高的生物素标记基因组RNA片段，同时能够有效保证杂交的特异性以及vRNA杂交条带的清晰度，进而显著提高了vRNA-vRNA结合和相互作用检测的准确性，实现了vRNA-vRNA相互作用强度的定量检测。
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公开(公告)号：CN105039270B
公开(公告)日：2018-01-02
申请号：CN201510490809.1
申请日：2015-08-11
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N7/04 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种H9N2亚型流感病毒冷适应减毒株及其应用。本发明提供的H9亚型禽流感冷适应病毒H9AIV‑SD/01/10‑CA，保藏登记号为CGMCC NO.10908。本发明提供的H9AIV‑SD/01/10‑CA毒株为减毒株，可以作为活疫苗使用，相对于现有的灭活疫苗具有如下优势：(1)可以产生具有交叉保护效力的细胞免疫和粘膜免疫，抵抗不同流行毒株的感染；(2)可以诱导细胞免疫反应，在免疫后迅速产生保护效力，在免疫后10‑14天即可抵抗流感病毒的感染；(3)接种次数少，免疫持续期长。本发明对于H9N2病毒的防治至关重要。
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公开(公告)号：CN106676103A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201710117199.X
申请日：2017-03-01
Applicant: 中国农业大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种检测北美H3N1亚型猪流感病毒的引物组及其应用。本发明提供了一种引物组，包括引物对甲和引物对乙引物对甲由引物F1和引物R1组成；引物对乙由引物F2和引物R2组成；引物F1如序列1所示；引物R1如序列2所示；引物F2如序列3所示；引物R2如序列4所示。所述引物组的用途为如下(c1)或(c2)：(c1)辅助鉴定北美H3N1亚型猪流感病毒；(c2)辅助鉴定待测样本中是否含有北美H3N1亚型猪流感病毒。采用本发明提供的引物组进行检测，特异性好、敏感性高，只需要4‑5小时的时间即可对临床样品进行检测，操作简单、容易推广，便于基层操作和应用，对于北美H3N1亚型猪流感病毒疫病诊断和流行病学调查具有重大的应用价值。
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