鉴别71型和非71型肠道病毒的单管二重一步法RT-PCR引物及其应用

    公开(公告)号:CN102559939B

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201210086272.9

    申请日:2012-03-29

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 鉴别71型和非71型肠道病毒的单管二重一步法RT-PCR引物及其应用。本发明提供的二重一步法RT-PCR引物包括肠道病毒通用引物TACTTCGAGAARCCTAGTAWCACC和ACGGACACCCAAAGTAGTCGGTTC,以及肠道病毒71型(EV71)特异性引物CCCAACACAGCYTAYATAATAGC和GTAYCCAYGCCCTGACGTGYTTC。通用引物用于扩增所有肠道病毒5’UTR基因,特异性引物用于扩增所有EV71VP1基因。本发明的优点:(1)两对引物同时在一个PCR管反应,快速简便,节省成本;(2)可早期鉴别EV71和非EV71型引起的手足口病;(3)检测灵敏度高,特异性好;(4)普通RT-PCR仪就能操作,易于推广。

    鉴别71型和非71型肠道病毒的单管二重一步法RT-PCR引物及其应用

    公开(公告)号:CN102559939A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201210086272.9

    申请日:2012-03-29

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 鉴别71型和非71型肠道病毒的单管二重一步法RT-PCR引物及其应用。本发明提供的二重一步法RT-PCR引物包括肠道病毒通用引物TACTTCGAGAARCCTAGTAWCACC和ACGGACACCCAAAGTAGTCGGTTC,以及肠道病毒71型(EV71)特异性引物CCCAACACAGCYTAYATAATAGC和GTAYCCAYGCCCTGACGTGYTTC。通用引物用于扩增所有肠道病毒5’UTR基因,特异性引物用于扩增所有EV71VP1基因。本发明的优点:(1)两对引物同时在一个PCR管反应,快速简便,节省成本;(2)可早期鉴别EV71和非EV71型引起的手足口病;(3)检测灵敏度高,特异性好;(4)普通RT-PCR仪就能操作,易于推广。

    肠道病毒71型特异性重组蛋白抗原及其应用

    公开(公告)号:CN102558313A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201210007599.2

    申请日:2012-01-12

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 肠道病毒71型特异性重组蛋白抗原及其应用,其氨基酸序列如SEQIDNO.1所述;核苷酸序列如SEQIDNO.2所述;该重组蛋白可应用于制备单克隆抗体、多克隆抗体以及肠道病毒71型特异性抗体的检测。本发明为肠道病毒71型感染的血清学检测提供了一种新的诊断抗原,经实验证明本发明提供的肠道病毒71型特异性抗原具有良好的敏感性和特异性,可被肠道病毒71型感染后的人血清以及灭活全病毒动物免疫血清识别,不但可以用于肠道病毒71型感染的血清学诊断,还可以用于疫苗研发以及使用过程中的免疫效果评价。与全病毒颗粒作为诊断抗原相比,本发明提供的特异性蛋白抗原制备简便,降低了试剂盒制备的成本。

    戊型肝炎蛋白-核酸复合疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN101564533B

    公开(公告)日:2012-01-04

    申请号:CN200910025685.4

    申请日:2009-06-12

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 一种戊型肝炎蛋白-核酸复合疫苗,其特征在于包括戊型肝炎病毒重组蛋白以及戊型肝炎病毒重组质粒,其中戊型肝炎病毒重组蛋白的含量为5-50ug/ml,戊型肝炎病毒重组质粒的含量为0.1-3mg/ml。本发明的复合疫苗可以有效的用于预防人及动物的戊型肝炎,动物实验表明,该复合疫苗可有效诱导机体同时产生体液免疫应答和细胞免疫应答,复合疫苗的两种组分间具有相互促进作用,明显优于单独的蛋白疫苗或核酸疫苗。

    甲型肝炎-乙型肝炎-戊型肝炎联合疫苗

    公开(公告)号:CN101085347B

    公开(公告)日:2010-05-19

    申请号:CN200710024412.9

    申请日:2007-06-15

    Applicant: 东南大学

    CPC classification number: Y02A50/464

    Abstract: 一种甲型肝炎-乙型肝炎-戊型肝炎联合疫苗,其特征在于包括灭活甲型肝炎病毒以及重组乙型肝炎病毒表面抗原和重组戊型肝炎病毒抗原,其灭活甲型肝炎病毒含量为200-1000U/mL;其重组乙型肝炎病毒表面抗原10-40μg/mL;其戊型肝炎病毒重组蛋白的含量为10-50μg/mL。本发明的联合疫苗中使用了经充分证明具有良好安全性及免疫原性的灭活HAV和重组HBsAg,以往的研究已经证实,本研究组制备的重组HEV蛋白同样具有良好的安全性和免疫原性,可以用于戊肝疫苗的研制。因此本发明的联合疫苗不仅在技术上可行,而且由于联合疫苗具有方便、多效、低成本的优点,所以本发明能够大大降低病毒性肝炎疫苗的生产成本和市场价格,提高疫苗的覆盖率。

    甲型肝炎-戊型肝炎联合疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN100446813C

    公开(公告)日:2008-12-31

    申请号:CN200510040733.9

    申请日:2005-06-24

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 孟继鸿 戴星 董晨

    CPC classification number: Y02A50/464

    Abstract: 本发明公开了一种甲型肝炎-戊型肝炎联合疫苗,包括戊型肝炎病毒重组蛋白以及甲型肝炎减毒活疫苗或甲型肝炎灭活疫苗;一种用于制备上述甲型肝炎-戊型肝炎联合疫苗的方法:在制备最终的甲型肝炎-戊型肝炎联合疫苗之前,将甲型肝炎减毒活疫苗病毒和/或甲型肝炎灭活疫苗病毒吸附于氢氧化铝凝胶,将戊型肝炎病毒重组蛋白吸附于氢氧化铝凝胶,将调整了pH的上述组份混合。本发明具有方便、多效、低成本、并能够有效预防人及动物甲型肝炎和戊型肝炎等优点。

    甲型肝炎-乙型肝炎-戊型肝炎联合疫苗

    公开(公告)号:CN101085347A

    公开(公告)日:2007-12-12

    申请号:CN200710024412.9

    申请日:2007-06-15

    Applicant: 东南大学

    CPC classification number: Y02A50/464

    Abstract: 一种甲型肝炎-乙型肝炎-戊型肝炎联合疫苗,其特征在于包括灭活甲型肝炎病毒以及重组乙型肝炎病毒表面抗原和重组戊型肝炎病毒抗原,其灭活甲型肝炎病毒含量为200-1000U/mL;其重组乙型肝炎病毒表面抗原10-40μg/mL;其戊型肝炎病毒重组蛋白的含量为10-50μg/mL。本发明的联合疫苗中使用了经充分证明具有良好安全性及免疫原性的灭活HAV和重组HBsAg,以往的研究已经证实,本研究组制备的重组HEV蛋白同样具有良好的安全性和免疫原性,可以用于戊肝疫苗的研制。因此本发明的联合疫苗不仅在技术上可行,而且由于联合疫苗具有方便、多效、低成本的优点,所以本发明能够大大降低病毒性肝炎疫苗的生产成本和市场价格,提高疫苗的覆盖率。

    乙型肝炎-戊型肝炎联合疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN1814286A

    公开(公告)日:2006-08-09

    申请号:CN200510122604.4

    申请日:2005-11-29

    Applicant: 东南大学

    Abstract: 本发明公开了一种乙型肝炎-戊型肝炎联合疫苗(乙-戊肝联合疫苗),包括戊型肝炎病毒(HEV)重组蛋白以及重组乙型肝炎病毒表面抗原(重组HBsAg),所说的重组HBsAg含量为50-500μg/ml,HEV重组蛋白的含量为50-500μg/ml。及乙-戊肝联合疫苗的制备方法:(a)在制备最终的乙-戊肝联合疫苗之前,将重组HBsAg吸附于氢氧化铝凝胶,将HEV重组蛋白吸附于氢氧化铝凝胶,调整pH至5.5-9.6;(b)将调整了pH的上述组份混合。使用联合疫苗,则可以大大降低疫苗成本,因此具有显著的优越性。

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