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公开(公告)号:CN114990201B
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202210639547.0
申请日:2022-06-08
Applicant: 东北林业大学 , 深圳华大生命科学研究院
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12Q1/6888 , G16B20/40 , G16B20/10 , G16B20/20 , G16B25/20 , G16B30/10 , G16B30/20
Abstract: 一种基于粪便总DNA应用于不同遗传分析的可行性评估方法,属于分子生物学技术领域。为了填补当前粪便DNA应用于不同遗传分析场景下的质控方法以及可行性标准的空白,本发明以细菌的16srRNA基因、动物线粒体基因组上的ND5基因和核基因组上的RPS27A基因为目标,采用相应引物建立荧光定量PCR体系,分别测定粪便总DNA中细菌DNA、动物线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nuDNA)的拷贝数。以细菌DNA的拷贝数为参照,构建了mtDNA和nuDNA相对丰度(RmtDNA、RnuDNA)两个指标,并分别建立了粪便DNA应用于以PCR技术为基础的SNP分型、STR分型和以高通量测序技术为基础的线粒体基因组组装和全基因组重测序场景下的成功率与RmtDNA和RnuDNA的关系模型,作为预评估粪便DNA在不同遗传分析中可用性的工具。
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公开(公告)号:CN113186185A
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202010037073.3
申请日:2020-01-14
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种从哺乳动物粪便中高效富集宿主DNA的方法,属于分子生物学技术领域。针对目前哺乳动物粪便样本提取DNA时,宿主DNA富集效率低、对陈旧粪便提取效果差、大量细菌DNA的残留严重干扰后续反应,而且成本居高不下等问题,本发明提供了一种从粪便中高效富集宿主DNA的方法,在提取前,对粪便样本进行SDS预处理:将粪便样本与10mmol/L磷酸缓冲液PBS溶液混合后,加入SDS溶液至终浓度为0.01%~5%(质量)混匀,在室温下静置1min~30min;然后离心取上清,从上清液中提取DNA。本发明成本低廉,不受样本数量的限制,拓展了粪便样本在动物研究和保护监测中的应用。
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公开(公告)号:CN101218898A
公开(公告)日:2008-07-16
申请号:CN200710144900.3
申请日:2007-12-24
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 大鸨人工孵化和育雏方法及大鸨雏鸟饲料,它涉及一种鸟类人工孵化和育雏方法及雏鸟饲料。它解决了目前人工饲养大鸨出雏率低、成活率低、饲喂难、常常在雏鸟7~15日龄时死亡的问题。大鸨人工孵化分为孵化前期、孵化中期、孵化后期和出雏期4个时期。大鸨雏鸟饲料由动物性饲料和植物性饲料组成。大鸨育雏过程中,出雏时首日育雏箱温度为36℃,随日龄的增长每天降低1℃,12日龄幼雏放入育雏床,育雏床温度为24~28℃,2月龄之后室外饲养。本发明大鸨人工孵化方法出雏率为81.81%,大鸨育雏方法成活率为88.8%;解决了大鸨雏鸟常常在7~15日龄时死亡的问题。本发明大鸨雏鸟饲料针对大鸨雏鸟的生理特点设计,具有营养丰富、提高雏鸟体质的优点。
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公开(公告)号:CN119082102A
公开(公告)日:2024-12-06
申请号:CN202411437636.2
申请日:2024-10-15
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种降低角化DNA提取物中外源DNA污染的方法,属于分子生物学技术领域。本发明为解决现有技术中角化组织DNA提取过程中分型位点的丢失、稳定性低、出现错误结果的现象,提供了一种有效降低角化DNA提取物中外源DNA污染的方法,所述方法可针对于不同类型的角化组织采用常规清洗DetW、酶解处理EnzW和碱除处理AlkW同的处理方案。本发明提供的降低角化DNA提取物中外源DNA污染的方法,有效降低了细菌DNA的比例,保证了内源性DNA的富集效率;适合所有类型的角化组织,提高了多种角化组织的可应用性,具有成本低廉,操作简单的优点。
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公开(公告)号:CN119541634A
公开(公告)日:2025-02-28
申请号:CN202411599910.6
申请日:2024-11-11
Applicant: 东北林业大学
IPC: G16B20/40 , C12Q1/6869 , C12Q1/6888 , C12N15/11 , G16B25/00 , G16B30/10 , G16B45/00
Abstract: 一种单独使用全基因组重测序数据进行杂交检测的方法,属于分子生物学技术领域。本发明为解决现有技术中杂交检测的方法存在高成本、准确率较低、需要纯父母本参考基因组信息的技术问题,提供了一种基于核线粒体DNA重测序数据检测杂交个体的方法,所述方法基于目标个体的全基因组重测序数据与核线粒体DNA片段,根据核线粒体DNA片段与其线粒体同源片段之间的遗传距离数据集所绘制的折线图进行杂交检测结果的判断。本发明提供的杂交个体的检测方法具有较高的准确性,规避了需要设计对父母本都有效的遗传标记的技术难题,以及无需检测目标个体的纯父母本参考基因组,降低了检测成本,扩大了适用范围。
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公开(公告)号:CN119479791A
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202411497928.5
申请日:2024-10-25
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 一种片段化DNA重测序数据中变异位点的筛选方法,属于生物技术领域。本发明为解决现有技术中缺少高效、准确筛选片段化DNA重测序数据中变异位点的方法,提供了一种片段化DNA重测序数据中变异位点的筛选方法,所述筛选方法在序列比对中‑fq转.sai文件时,选择‑l min‑size‑n 0.04为参数;在序列比对中‑.sai转.sam文件时,选择‑o=1000为参数;在变异位点筛选时,选择参数MQ阈值为36。本发明提供的筛选方法,与传统变异位点筛选方法相比,在保证高效比对率的同时,显著缩短了差异位点筛选的运行时间,提高了少选结果的准确度,所述方法可应用于片段化DNA重测序数据中变异位点的筛选。
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公开(公告)号:CN119446288A
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202411467387.1
申请日:2024-10-21
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 一种基于粪便DNA计算年龄的模型及构建方法,属于生物信息学技术领域。本发明通过以粪便为材料解决了现有技术中所需材料不宜获的问题,并且本发明首次公开了一种mtDNA异质性位获得的方法,可以更精准捕捉目标mtDNA异质性位点。基于目标mtDNA异质性位点和机器学习构建了一套筛选与年龄相关的检测位点的方法学流程,并构建了一种基于粪便DNA中的mtDNA异质性位点计算年龄的模型,该模型主要应用于计算大型动物或野生动物年龄,该模型解决了现有技术中成本较高的问题。
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公开(公告)号:CN111154751B
公开(公告)日:2023-02-17
申请号:CN202010044705.9
申请日:2020-01-14
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/10 , C12Q1/6806
Abstract: 一种高效的提取毛干中DNA的方法,属于分子生物学技术领域。为了提高毛干DNA回收效率,减少色素等污染物对下游实验的干扰,扩大毛干适用范围,本发明用1%SDS和4M NaOH溶液处理样本,然后按一定比例加入SDS、DTT、PK和Ca2+进行消化,随后用EDTA溶液螯合掉Ca2+和其他离子,提高毛发消化效率,最后利用磁珠对DNA的强吸附能力吸附DNA,再使用漂洗液A处理不同类型的发干,最终获得毛干中DNA。本发明方法获得的DNA经过一轮PCR,就可以检测到核基因组的目的片段,SNP和STR分型的成功率和正确率均较高。本发明适用于动物生态、法医鉴定等各种条件下人类和动物毛干DNA的提取。
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公开(公告)号:CN114990201A
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN202210639547.0
申请日:2022-06-08
Applicant: 东北林业大学 , 深圳华大生命科学研究院
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12Q1/6888 , G16B20/40 , G16B20/10 , G16B20/20 , G16B25/20 , G16B30/10 , G16B30/20
Abstract: 一种基于粪便总DNA应用于不同遗传分析的可行性评估方法,属于分子生物学技术领域。为了填补当前粪便DNA应用于不同遗传分析场景下的质控方法以及可行性标准的空白,本发明以细菌的16srRNA基因、动物线粒体基因组上的ND5基因和核基因组上的RPS27A基因为目标,采用相应引物建立荧光定量PCR体系,分别测定粪便总DNA中细菌DNA、动物线粒体DNA(mtDNA)和核DNA(nuDNA)的拷贝数。以细菌DNA的拷贝数为参照,构建了mtDNA和nuDNA相对丰度(RmtDNA、RnuDNA)两个指标,并分别建立了粪便DNA应用于以PCR技术为基础的SNP分型、STR分型和以高通量测序技术为基础的线粒体基因组组装和全基因组重测序场景下的成功率与RmtDNA和RnuDNA的关系模型,作为预评估粪便DNA在不同遗传分析中可用性的工具。
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公开(公告)号:CN111154751A
公开(公告)日:2020-05-15
申请号:CN202010044705.9
申请日:2020-01-14
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/10 , C12Q1/6806
Abstract: 一种高效的提取毛干中DNA的方法,属于分子生物学技术领域。为了提高毛干DNA回收效率,减少色素等污染物对下游实验的干扰,扩大毛干适用范围,本发明用1%SDS和4M NaOH溶液处理样本,然后按一定比例加入SDS、DTT、PK和Ca2+进行消化,随后用EDTA溶液螯合掉Ca2+和其他离子,提高毛发消化效率,最后利用磁珠对DNA的强吸附能力吸附DNA,再使用漂洗液A处理不同类型的发干,最终获得毛干中DNA。本发明方法获得的DNA经过一轮PCR,就可以检测到核基因组的目的片段,SNP和STR分型的成功率和正确率均较高。本发明适用于动物生态、法医鉴定等各种条件下人类和动物毛干DNA的提取。
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