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公开(公告)号：CN1763104A
公开(公告)日：2006-04-26
申请号：CN200410043953.2
申请日：2004-10-20
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种基因VII型新城疫病毒NP抗体的重组原核表达检测抗原及制备方法。基因VII型新城疫病毒NP抗体的重组原核表达检测抗原是应用RT－PCR技术扩增基因VII型新城疫病毒NP基因基础上，将NP基因定向亚克隆到原核表达载体pGEX－6p上，然后转化大肠杆菌表达系统进行诱导表达所得到的基因工程蛋白，该蛋白的表达形式是融合蛋白，表达的融合蛋白的分子量为81.9ku。通过本方法制备的基因工程重组蛋白可用于VII型新城疫抗NP蛋白抗体的检测。
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公开(公告)号：CN114107230A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111446165.8
申请日：2021-11-29
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/38 , C12N15/85 , A61K39/265 , A61P31/22
Abstract: 本发明提供了一种牛疱疹病毒1型UL41缺失毒株及其获取方法，属于基因工程技术与生物制品制备技术领域。提供一种牛疱疹病毒1型UL41缺失毒株和提高BHV‑1毒株编辑效率。本发明提供了一种牛疱疹病毒(Bovine herpes virus type Ⅰ)1型UL41缺失毒株，所述牛疱疹病毒1型UL41缺失毒株是以通过敲除亲本病毒中UL41基因得到的毒株，本发明所构建的牛疱疹病毒1型缺失毒株在病毒生物学特性上与亲本毒株表现出一定的差异性，即缺失毒株的复制起始时间要早于亲本毒株约12小时，且相较于亲本毒株，缺失毒株对酸性环境和温度变化表现出更强的敏感性，而对碱性环境的敏感程度与亲本毒株相近。
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公开(公告)号：CN105242043B
公开(公告)日：2017-11-07
申请号：CN201510680061.1
申请日：2015-10-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种可鉴别诊断口蹄疫病毒感染的多物种通用AGL‑ELISA试剂盒，包括包被8BF蛋白的酶标板和酶标记的重组蛋白[AGL]n，重组蛋白[AGL]n为将金黄色葡萄球菌A蛋白免疫球蛋白结合结构域中B结构域、链球菌蛋白G蛋白免疫球蛋白结合结构域中C2结构域、大消化链球菌蛋白L蛋白免疫球蛋白结合结构域中B3结构域这三种蛋白结构域进行基因优化和串联，形成的多拷贝重组蛋白，n为1、2或3。本发明重组蛋白[AGL]2进行酶标记，酶标记产物经Western‑blot、ELISA检测，可与多物哺乳动物免疫球蛋白结合，可作为各种哺乳动物血清学检测中通用抗体，可替代物种特异性抗体，进行多物种共患传染病检测。AGL‑ELISA可检测多种动物口蹄疫感染，并能鉴别疫苗免疫和自然感染动物以及持续感染动物。
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公开(公告)号：CN105647875A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201610136765.7
申请日：2016-03-10
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/28 , G01N33/577 , G01N33/569
CPC classification number: C07K16/2812 , G01N33/56966 , G01N2333/70514
Abstract: 本发明公开了抗鹅CD4胞外区单克隆抗体及其在检测禽类外周血中CD4+T淋巴细胞中的应用。本发明利用携带鹅CD4胞外区的原核表达载体pET-30a-CD4ex，采用大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS表达鹅CD4胞外区基因，得到重组蛋白rGopET-30a-CD4ex。以重组蛋白rGopET-30a-CD4ex为免疫原，免疫三次BALB/c小鼠，加强免疫后，经重组蛋白rGopET-30a-CD4ex筛选获得1株稳定分泌抗鹅CD4胞外区单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为5A9，保藏号是：CGMCC NO.11192。研究表明，由该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能与纯化的重组鹅CD4胞外区蛋白rGopET-30a-CD4ex反应，同时也能够与分离的鹅、鸭以及鸡外周血淋巴细胞发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测禽类外周血中CD4+T淋巴细胞提供了一种新的、有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN105242043A
公开(公告)日：2016-01-13
申请号：CN201510680061.1
申请日：2015-10-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种可鉴别诊断口蹄疫病毒感染的多物种通用AGL-ELISA试剂盒，包括包被8BF蛋白的酶标板和酶标记的重组蛋白[AGL]n，重组蛋白[AGL]n为将金黄色葡萄球菌A蛋白免疫球蛋白结合结构域中B结构域、链球菌蛋白G蛋白免疫球蛋白结合结构域中C2结构域、大消化链球菌蛋白L蛋白免疫球蛋白结合结构域中B3结构域这三种蛋白结构域进行基因优化和串联，形成的多拷贝重组蛋白，n为1、2或3。本发明重组蛋白[AGL]2进行酶标记，酶标记产物经Western-blot、ELISA检测，可与多物哺乳动物免疫球蛋白结合，可作为各种哺乳动物血清学检测中通用抗体，可替代物种特异性抗体，进行多物种共患传染病检测。AGL-ELISA可检测多种动物口蹄疫感染，并能鉴别疫苗免疫和自然感染动物以及持续感染动物。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104231071A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410317401.X
申请日：2014-07-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/705 , C12N15/12 , C12N5/20 , C07K16/28 , G01N33/577 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/7051 , C07K16/2809 , G01N33/56966
Abstract: 本发明公开了鹅CD3ε链胞外区单克隆抗体及其在检测鹅CD3+T淋巴细胞中的应用。以鹅胸腺cDNA为模板扩增得到鹅CD3ε基因，根据GoCD3ε胞外区基因特点，设计1对特异性引物扩增得到鹅CD3ε胞外区基因(CD3εex)，采用大肠杆菌表达鹅CD3εex。以含有CD3εex的重组质粒为免疫原，免疫BALB/c小鼠，重组蛋白rGoCD3ε加强免疫，获得1株稳定分泌鹅CD3ε链胞外区单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3C11)。该单克隆抗体能与纯化的重组蛋白rGoCD3反应，同时能够与分离的鹅外周血淋巴细胞发生特异性反应。因此，本发明的提出为检测鹅中CD3+T淋巴细胞提供了一种新的、有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN101696453B
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN200910073126.0
申请日：2009-11-02
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 检测牛病毒性腹泻病毒的方法逆转录环介导等温扩增反应试剂盒的制备及其使用方法，它涉及反应试剂盒的制备及其使用方法。它解决了现有检测牛病毒性腹泻病毒的方法存在成本昂贵，需要专业设备及专业人员参与检测且不适于现阶段中国畜牧业发展状况的问题。方法：首先设计引物，然后配制逆转录环介导等温扩增反应液，即完成。使用方法：取含牛病毒性腹泻病毒样品的RNA提取物，加入反应液，混合后进行逆转录环介导等温扩增反应，再离心检测；或加入10000×SYBR GREEN I，然后置于紫外灯下检测；或进行电泳检测；或采用Real-time PCR仪进行保温反应检测。本发明反应试剂盒的检测方便，常规检测无需复杂仪器，降低成本。
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公开(公告)号：CN1858246B
公开(公告)日：2011-10-26
申请号：CN200610009840.X
申请日：2006-03-22
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明提供的是一种口蹄疫病毒RT-PCR检测和分型方法。本方法通过引物P1/P2和S1/S2可以对口蹄疫病毒进行检测；通过引物S1/S2的PCR产物核苷酸同源性比较进行口蹄疫病毒血清型鉴定。本方法检测过程包括：(1)设计特异检测口蹄疫病毒的引物P1/P2和S1/S2；(2)提取口蹄疫病毒的RNA；(3)以提取的RNA为模板，利用反转录引物，在反转录酶的作用下合成cDNA；(4)利用PCR技术进行口蹄疫病毒的核酸扩增；(5)将引物S1/S2的PCR产物克隆到pMD18-T载体，进行核苷酸序列测定，然后利用生物学软件通过核苷酸同源性比较进行血清型鉴定。用本发明的方法检测口蹄疫病毒和分型的快速、稳定性好、灵敏度高、特异性强、无散毒危险。
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公开(公告)号：CN101603043B
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN200910072332.X
申请日：2009-06-19
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/21
Abstract: 一种鹅干扰素-α多肽基因，它涉及一种鹅干扰素-α基因。它解决了目前天然的鹅干扰素-α基因在大肠杆菌内不能表达的问题。本发明鹅干扰素-α多肽基因序列如SEQ ID NO：1所示。本发明木糖还原酶基因序全长505bp，10bp处有起始密码子ATG，496bp处有终止密码子TAA，有489bp完整的开放阅读框。本发明鹅干扰素-α多肽基因能够在大肠杆菌表达系统中高效表达鹅干扰素-α成熟多肽。本发明的鹅干扰素-α多肽基因转录后mRNA的二级结构明显优于天然鹅干扰素-α多肽基因，提高了鹅干扰素-α在大肠杆菌系统中的表达量，实现了高效表达。
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公开(公告)号：CN101392256A
公开(公告)日：2009-03-25
申请号：CN200710144345.4
申请日：2007-09-21
Applicant: 黑龙江省农业科学院畜牧研究中心 , 东北农业大学
CPC classification number: Y02A50/473
Abstract: 野猪α－干扰素的基因合成和载体构建及产物的生产方法，国内重组菌株或者是表达量不高，或者是产物是以融合状态表达，或者是产物带有纯化标签，或者是没有高密度发酵工艺，存在诸多问题。本发明组成包括：用大肠杆菌偏爱密码子以及密码子对合成了野猪α－干扰素基因，构建高效表达载体并转化高效表达菌株，工程菌高密度发酵、包涵体的分离纯化、目的蛋白的变性、复性和纯化以及表达产物的生物活性测定方法。本发明属于生物制药中的基因工程生产多肽药物技术领域。
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