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公开(公告)号：CN104357409B
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201410619456.6
申请日：2014-11-07
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡新城疫病毒毒株及其在制备鸡新城疫病疫苗中的应用。本发明提供的鸡新城疫病毒毒株，其制备方法包括如下步骤：将重组质粒pBrClone30‑chIL2、pBL‑N质粒、pBL‑P质粒和pBL‑L质粒共转染哺乳动物细胞并培养，得到所述鸡新城疫病毒毒株；所述重组质粒pBrClone30‑chIL2为具有序列表的序列1所示的DNA分子的质粒。序列表的序列3自5ˊ末端2703‑18414位核苷酸即为rClone30‑chIL2病毒的基因组DNA。本发明通过在现有新城疫活疫苗基因组中引入分子佐剂chIL2，可以有效提高免疫效果，提高免疫保护率。本发明对于新城疫病的防治具有重大价值。
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公开(公告)号：CN103352042A
公开(公告)日：2013-10-16
申请号：CN201310330960.X
申请日：2013-08-01
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组病毒，即表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的重组新城疫病毒核苷酸序列及其在肿瘤抑制方面的应用。本发明提供的肿瘤治疗药物，具有良好的肿瘤抑制效果，同时本发明为重组新城疫病毒治疗肿瘤的提供了依据。
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公开(公告)号：CN101948795B
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201010274276.0
申请日：2010-09-07
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了可溶性表达Not I的工程菌及其构建方法和应用。本发明工程菌包括：甲基化酶Eag I M基因、限制性内切酶Not I基因和大肠杆菌(E.coli)ER2566(mcrC-mrr)。本发明在分离和鉴定了Not I基因后，通过重组体的改建，获得高效可溶性表达Not I的工程菌。本发明通过对重组工程菌进行诱导条件摸索及蛋白纯化工艺的优化，制备出高纯度的Not I限制性内切酶。
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公开(公告)号：CN101967485A
公开(公告)日：2011-02-09
申请号：CN201010274258.2
申请日：2010-09-07
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了人FGF21突变基因及制备重组人FGF21蛋白方法。本发明将人FGF21基因进行突变，突变后碱基序列为SEQ IDNO.1所示，突变后的基因在原核细胞中的表达量有显著提高。本发明还提供了一种提高人FGF21蛋白表达量的方法，包括：将6×His标签基因、SUMO标签基因、羟胺切割位点基因和人FGF21突变基因依次连接在一起后得到SEQ ID NO.3所示基因；将其与表达载体相连接，得到重组表达载体；将其转化宿主细胞；培养，诱导重组蛋白表达，收集并纯化所表达的蛋白，羟胺切割，再纯化，即得。本发明方法具有特异性好、稳定性高、能在较宽范围的反应环境体系中保持切割活性、制备成本低等优点。
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公开(公告)号：CN101948795A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010274276.0
申请日：2010-09-07
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了可溶性表达Not I的工程菌及其构建方法和应用。本发明工程菌包括：甲基化酶Eag I M基因、限制性内切酶Not I基因和大肠杆菌(E.coli)ER2566(mcrC-mrr)。本发明在分离和鉴定了Not I基因后，通过重组体的改建，获得高效可溶性表达Not I的工程菌。本发明通过对重组工程菌进行诱导条件摸索及蛋白纯化工艺的优化，制备出高纯度的Not I限制性内切酶。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109097382A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201810741545.6
申请日：2018-08-28
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用细菌表面展示系统筛选单链抗体的方法。该方法包括如下步骤：A)构建由不同待检测单链抗体编码基因组成的基因编码库；用于扩增抗体VH和VL的引物对均为同种属简并引物对，用于连接VH和VL的接头为同种属CH1；B)获得特异于所述靶标抗原的所述目标单链抗体的基因编码序列；靶标抗原和待检测单链抗体共表达，并用标签蛋白Flag标记抗原，借助荧光标记抗标签蛋白抗体通过流式细胞分选法筛选获得携带有目标单链抗体的重组细菌后，通过提取质粒重转宿主菌的方法拯救目标单链抗体。本发明在传统的细菌展示技术的基础上，做了改进和创新，根据抗体展示载体所必需的元件和基本原理构建了新的抗体细菌展示系统。
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公开(公告)号：CN108484759A
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201810171177.6
申请日：2018-03-01
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公布了两种scFv抗体、其编码基因及其在制备治疗或预防鸡传染性法氏囊病制剂中的应用。发明提供了两种单链抗体(即scFv抗体)，scFv抗体具有与IBDV结构蛋白2(VP2)蛋白及多种IBDV毒株特异性结合的能力，可阻断IBDV对鸡胚成纤维细胞产生细胞病变(CPE)，可保护IBDV感染的青年鸡。免疫血清和卵黄抗体在使用过程中存在制备繁琐、生产成本高、效果不稳定以、工业化生产质量难以控制及引发水平传播疾病等弊端。本发明提供的scFv抗体可以克服上述弊端，具有特异性强、治疗效果好、工业化生产质量可控等优点，避免了卵黄抗体引起的水平传播疾病的问题，将在IBDV的防治史上，乃至整个动物病毒病的防治史上开辟了一个新的局面。
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公开(公告)号：CN104404004B
公开(公告)日：2018-03-02
申请号：CN201410619497.5
申请日：2014-11-07
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种鸡新型新城疫病毒毒株及其应用。本发明提供的鸡新城疫病毒毒株，其制备方法包括如下步骤：将重组质粒pBrClone30‑chIL15和辅助质粒pBL‑N、pBL‑P和pBL‑L共转染哺乳动物细胞BHK‑21并培养，得到所述鸡新城疫病毒毒株；所述重组质粒pBrClone30‑chIL15为具有序列表的序列1所示的DNA分子的质粒。序列表的序列3自5ˊ末端第2703‑18546位核苷酸即为rClone30‑chIL15病毒的基因组DNA。本发明通过在现有新城疫活疫苗基因组中引入分子佐剂chIL15，可以有效提高免疫效果，提高免疫保护率。本发明对于新城疫病的防治具有重大意义。
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公开(公告)号：CN106892982A
公开(公告)日：2017-06-27
申请号：CN201710217125.3
申请日：2017-04-05
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向IL‑17和TNFα的新型融合多肽及其应用。本发明所提供的新型融合多肽是通过抗体的铰链区将抗人IL‑17的单链抗体与可溶性肿瘤坏死因子受体1相连接，并且在所述可溶性肿瘤坏死因子受体1的C端连接免疫球蛋白的Fc片段后得到的。本发明提供的融合多肽Anti‑IL‑17scFv/sTNFR1‑Fc可有效地抑制胶原蛋白和多种前炎症因子的表达，有效地缓解类风湿关节炎的临床症状。本发明对于类风湿关节炎的治疗具有重大应用价值。
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公开(公告)号：CN102603886A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210031800.0
申请日：2012-02-14
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/50 , C12N15/12 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12N15/70 , A61K38/18 , A61P3/10 , A61P3/06 , A61P3/00
Abstract: 本发明公开了突变的成纤维细胞生长因子（FGF-21）及其在治疗内分泌疾病中的用途。本发明突变的成纤维细胞生长因子-21的氨基酸序列为SEQIDNO:2所示，其编码基因序列为SEQIDNO:1所示。本发明以野生型FGF-21为模板，通过下游引物引入两个精氨酸（Arg），PCR后获得突变体，主要利用Arg的强碱性以及它在生理条件下带正电荷，不仅上调FGF-21的等电点，还帮助FGF-21结合到细胞膜表面。动物学试验结果表明，本发明突变的FGF-21能够更加有效降低动物体内的血糖水平，此外，本发明突变体在降低血糖水平方面还具有起效快、药效持续时间长等优点。本发明突变的FGF-21可作为药物治疗糖尿病，代谢综合症或脂代谢紊乱等内分泌疾病。
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