一种产异丁香酚单加氧酶的自诱导培养基及其应用

    公开(公告)号:CN113151131B

    公开(公告)日:2023-04-28

    申请号:CN202110315377.6

    申请日:2021-03-24

    Abstract: 本发明涉及一种产异丁香酚单加氧酶的自诱导培养基,该培养基包括以下组分:2~10g/L的葡萄糖,1~7g/L的乳糖,20~50g/L的酵母浸粉,6~7g/L的Na2HPO4,2~4g/L的KH2PO4,0.3~0.7g/L的NaCl,0.8~1.2g/L的NH4Cl,0.1~0.3g/L的MgSO4,0.0~0.1g/L的CaCl2,pH为6~7。本发明采用改进后的自诱导培养基,并利用双温度控制的方式,能有效诱导重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET21a‑IEM的表达;该自诱导培养基以乳糖作为底物诱导目的蛋白表达,具有产酶量高,成本低,对环境友好等优点;重组异丁香酚单加氧酶的细胞酶活可达3180.8U/L。

    高热稳定性高活性异丁香酚单加氧酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN113151201B

    公开(公告)日:2022-12-16

    申请号:CN202110315426.6

    申请日:2021-03-24

    Abstract: 本发明公开了一种异丁香酚单加氧酶突变体及其应用,属于生物工程领域。将来源于硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens)Jin1的异丁香酚单加氧酶基因进行定点突变,使其编码的氨基酸序列在第83位由赖氨酸K突变为精氨酸R,第95位由赖氨酸K突变为精氨酸R,第273位由亮氨酸突变为苯丙氨酸F。本发明所述的异丁香酚单加氧酶突变体K83R/K95R/L273F的比活是突变之前的2.1倍,在25℃、30℃、35℃下半衰期分别提高了3.0倍、12.0倍、24.7倍。本发明的异丁香酚单加氧酶突变体在氧气作用下可以在较宽的温度范围内催化底物异丁香酚苯环上的丙烯基氧化从而生成香兰素,能广泛应用于食品、化工、制药等行业,具有广阔的前景。

    一种含增稠体系的圆珠笔墨水组合物长期稳定性的快速评估方法

    公开(公告)号:CN111551697A

    公开(公告)日:2020-08-18

    申请号:CN202010461336.3

    申请日:2020-05-27

    Inventor: 徐毅 杨光 郭亨长

    Abstract: 本发明提供一种含增稠体系的圆珠笔墨水组合物长期稳定性的快速评估方法,该圆珠笔墨水组合物包括中性墨水、水包油型(O/W)乳化墨水以及油包水型(W/O)乳化墨水等。根据时温等效原理,本发明通过高低温循环实验模拟墨水的长期存放过程,加速墨水的老化,使用旋转流变仪测量弹性模量G’的变化,在较短时间内对所涉及的圆珠笔墨水组合物的稳定性进行评估,获得其长期存放稳定性参数。所述方法包括对所述圆珠笔墨水组合物进行高低温循环实验,在恒定应变与频率下测试每个温度循环下的G’,与常温下测得的第一个G’值进行比较,通过评估G’在多次加热循环后的变化来确定墨水的长期稳定性,预测货架期。同时还可通过G’的变化对竞品配方的长期稳定性进行对比分析,从流变学的角度指导现有墨水配方的改善与新配方的研发。

    一种新型酰胺酶显色底物及其合成方法

    公开(公告)号:CN115947700B

    公开(公告)日:2024-08-09

    申请号:CN202310019875.5

    申请日:2023-01-06

    Abstract: 本发明涉及一种新型酰胺酶显色底物及其合成方法与应用,该合成方法包括以下步骤:步骤S1、在圆底烧瓶中加入I结构化合物氨噻肟酸与有机溶剂,缓慢滴加氯酰化剂,加毕,控温反应得到含有氨噻肟酰氯的黄色澄清溶液II;步骤S2、将反应液置于旋转蒸发仪中,以蒸发除去溶剂,生成黄色流状液体,向黄色流状液体中加入5‑氨基‑2‑硝基苯甲酸与丙酮,充分搅拌后,控温并滴加有机碱或无机碱,继续保温反应,反应结束后旋蒸除去溶剂,加入适量蒸馏水充分搅拌,用酸化剂调节pH,析出黄色固体,混匀离心,通过常规的过滤、洗涤与干燥得到目标产物III。本发明在酶活定量与筛选中具有灵敏度高、准确性好的优势;不需要终止剂,其具有步骤简单与反应温和等优点。

    一种抑制积墨圆珠笔墨水组合物

    公开(公告)号:CN110423514B

    公开(公告)日:2022-03-18

    申请号:CN201910721609.0

    申请日:2019-08-06

    Abstract: 本发明涉及一种抑制积墨型圆珠笔墨水组合物,该圆珠笔墨水组合物类型可以是中性墨水或W/O型乳化墨水。本发明使用改性黄原胶作为体系增稠剂,在保证体系黏度的同时,具有弹性应答占主导地位的黏弹性能,在匹配笔头应用方面,尤其在笔芯积墨性能方面,具有优良的抑制积墨性能。与现有以聚丙烯酸类合成高分子作为增稠剂的圆珠笔墨水组合物相比,解决了按动式中性圆珠笔无笔帽保护竖直放置过程中笔头积墨的问题,以及书写过程中出现的积墨现象。

    高热稳定性高活性异丁香酚单加氧酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN113151201A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110315426.6

    申请日:2021-03-24

    Abstract: 本发明公开了一种异丁香酚单加氧酶突变体及其应用,属于生物工程领域。将来源于硝基还原假单胞菌(Pseudomonas nitroreducens)Jin1的异丁香酚单加氧酶基因进行定点突变,使其编码的氨基酸序列在第83位由赖氨酸K突变为精氨酸R,第95位由赖氨酸K突变为精氨酸R,第273位由亮氨酸突变为苯丙氨酸F。本发明所述的异丁香酚单加氧酶突变体K83R/K95R/L273F的比活是突变之前的2.1倍,在25℃、30℃、35℃下半衰期分别提高了3.0倍、12.0倍、24.7倍。本发明的异丁香酚单加氧酶突变体在氧气作用下可以在较宽的温度范围内催化底物异丁香酚苯环上的丙烯基氧化从而生成香兰素,能广泛应用于食品、化工、制药等行业,具有广阔的前景。

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