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公开(公告)号：CN110878305A
公开(公告)日：2020-03-13
申请号：CN201911249683.3
申请日：2019-12-09
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H4/00 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一种高效的单碱基编辑系统OsSpCas9-eCDA及其应用和育种方法。本发明通过大量的实验，尝试采用不同的方式对SpCas9-ABE进行改造，终于成功获得了一个高单碱基编辑效率、宽窗口的CP1249-OsSpCas9-eABE编辑器。并且本发明还提供了包含该CP1249-OsSpCas9-eABE基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的CP1249-OsSpCas9-eABE基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现由A/T碱基突变成C/G。利用该编辑器进行水稻基因编辑，可以编辑更多的突变体，获得更多的随机突变或者得到突变更多的突变体库。
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公开(公告)号：CN106755059B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201610997402.2
申请日：2016-11-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于基因工程的骨干质粒载体，所述骨干质粒载体包含crRNA表达框和Cpf1核酸酶表达框，crRNA表达框和Cpf1核酸酶表达框位于同一双元载体中，crRNA表达框由水稻U3启动子，壮观霉素抗性基因和Poly‑T终止子依次构成；LbCpf1核酸酶表达框由ZmUBI启动子，水稻偏好密码子改造后的LbCpf1编码序列和35s终止子依次构成。本发明还提供了利用所述质粒载体构建的含有靶标序列的重组载体，及其在水稻基因打靶中的应用。本发明的骨干质粒载体能够用于进行有效地目标片段的基因打靶，获得带有目的基因中靶标片段上的随机插入和/或随机缺失的水稻植株。
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公开(公告)号：CN105602956B
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201610188718.7
申请日：2016-03-25
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种水稻花粉强表达启动子OsPoll4及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、作物表达载体以及利用其驱动目标基因表达的方法。具体而言，本发明的发明人发现并提取了日本晴水稻中一段1864bp的DNA序列，发明人发现该序列具有驱动基因在花粉中强表达的能力，并且对上述能力进行了鉴定，将其命名为OsPoll4。本发明将上述启动子应用在作物基因工程中。由于本发明提供的启动子可以特异地驱动外源基因在花粉中强表达，其具有分析花粉发育过程中重要基因的功能，对水稻花粉发育及相关的基础生物学研究具有重要的理论意义，而且对杂交稻及水稻转基因育种具有重要的实际意义。
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公开(公告)号：CN104762302B
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201510164459.X
申请日：2015-04-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了一种植物基因序列。本发明从日本晴水稻中分离克隆和鉴定了一个镉(Cd)强烈诱导的水稻特异基因的启动子Cd S2，并对获得的转基因水稻进行镉(Cd)处理，经过GUS化学染色发现，在处理后转基因植株在各个部位都有明显的染色。且通过RT‑qPCR鉴定处理前后的Gus基因表达量分析发现，镉(Cd)处理后，转基因植株中的Gus基因表达量是处理前的887.9倍，达到组成型启动子ACTIN活性的4倍。该启动子能够用于通过其在水稻中的表达量来反应土壤中镉污染的强度，其操作简单、检出限低、微量灵敏且准确度高的特性，对从研究环境关系到改善生态环境，在可持续发展中发挥重要意义，并且可以积极地对形成污染的原理进行分析，进一步为它们避免与可控转化提供宝贵经验。
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公开(公告)号：CN105861506B
公开(公告)日：2019-05-10
申请号：CN201610389751.6
申请日：2016-05-31
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种水稻胚乳不表达启动子SAFES2及其分离方法与应用。本发明的发明人发现、提取并鉴定了日本晴水稻中一段具有转录调控活性的DNA序列，命名为启动子SAFES2或SAFES2。该启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.1中所示序列或为该序列的同源衍生物。本发明利用作物双元表达载体pCAMBIA1391，将启动子SAFES2构建于GUS报告基因上游，构建重组表达载体，通过农杆菌介导转化水稻愈伤组织再生水稻植株，GUS染色实验证实该启动子是胚乳不表达启动子。采用本发明的启动子与具有提高植株生长特性的基因配合使用，可以在提高植株根、茎、叶等躯干部位性状的同时，避免对植株胚乳部分带来任何不良影响，具有显著的应用价值和远期前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105779451B
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201610131213.7
申请日：2016-03-08
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供一种作物种子不表达启动子SAFES5及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒和作物表达载体。具体而言，本发明将上述启动子应用在作物基因工程中。本发明提供的启动子可以特异地驱动外源基因在作物叶、绿色组织或其他非种子组织中表达。因此，如果利用本发明的启动子对作物进行改造，可以限制抗虫等重要基因的表达位置，既能提高外源基因利用效率，同时也避免了异源毒蛋白在食用部位的表达和积累，降低过敏概率，减少社会和公众的担忧。
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公开(公告)号：CN105695466B
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201610183959.2
申请日：2016-03-25
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种水稻花粉强特异表达启动子OsPoll3及其应用。本发明的启动子包含序列表中SEQ ID NO.1或2中所示的核苷酸序列，或者二者的衍生物。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、作物表达载体。本发明的发明人发现、提取并鉴定了日本晴水稻中的一段具有转录调控活性的DNA序列，并对其进行了实验性应用。具体而言，本发明将上述启动子应用在作物基因工程中。本发明提供的启动子能够驱动目标基因在花粉中特异表达，从而创造雄性不育材料，应用于杂交制种；或者进行基因剔除，防止外源基因通过花粉污染其他非转基因(作物)植物，提高转基因作物的生物安全性。
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公开(公告)号：CN108753785A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810719642.5
申请日：2018-07-03
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8227
Abstract: 本发明公开了一种可用于对水稻根部进行改良的水稻特异表达启动子及其应用。本发明提供的启动子可以启动外源基因在植物中表达，特别能够驱动外源基因在水稻根部表达，而在其它组织中不表达。本发明可以用于提高和改善水稻的生长特性，特别是改善水稻的根部形状和性能，从而培育出理想的水稻品种。将本发明所述的启动子序列用于取代组成型启动子，驱动目的基因在水稻的根部位特异性表达，可以增加转基因的效果，避免不必要的物质能量浪费，有效改良水稻的根部特性，培育出理想的转基因水稻品种。因此该启动子在实际应用中具有显著价值。
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公开(公告)号：CN104846010B
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201510253826.3
申请日：2015-05-18
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种删除转基因水稻标记基因的方法，属于植物基因工程领域。本发明利用CRISPR/Cas9系统介导的基因组定点编辑技术建立了一个在植株水平上高效率删除转基因水稻标记基因的方法。利用本发明的方法可以有效地删除整段标记基因，并且能够针对性地只删除标记基因的表达框，而不改变转基因水稻中其他成分的表达。因此利用本发明的方法可以高效率培育无筛选标记基因的转基因水稻，从而能完全消除人们对筛选标记基因的安全性疑虑。
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公开(公告)号：CN105087588B
公开(公告)日：2018-01-05
申请号：CN201510604681.7
申请日：2015-09-21
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供一种植物胚和糊粉层特异启动子OsEmb3及相应获取方法。所述植物胚和糊粉层特异启动子OsEmb3包含SEQ ID No:1所示的DNA序列或其同源物、衍生物。本发明的启动子能够驱动外源基因在胚和糊粉层部位特异表达。本发明可以与具有改善植物的胚部位性状能力的基因结合使用，将本发明的启动子与性状改善基因相连接导入植物中，并驱动性状改善基因在植物胚部位特异表达而并不会对植物的其他部位造成影响。从环境安全和食品安全两个角度来讲，本发明的启动子都是具有极高商业价值的。
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