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公开(公告)号：CN110551853B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201910888108.1
申请日：2019-09-19
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种快速区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360‑505R基因缺失株的三重PCR检测引物组，三对检测引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1～6所示。本发明利用三对引物一次性扩增非洲猪瘟病毒CD2V、P72、360‑505R三个基因，减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间；且只需一次PCR反应即可扩增三个不同长度的基因，辨别毒株是否存在基因的缺失。仅需一次PCR扩增即可鉴别出三个基因，对于传统方法分别扩增检测三个基因的样本来说，成本降低了约2/3，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN106916842B
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN201710184041.4
申请日：2017-03-24
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12N15/70 , C07K14/435 , C07K1/113 , C07K1/22 , C07K1/34
Abstract: 本发明公开一种猫桎首蚤跳蚤唾液过敏原FSA1的表达方法，包括以下步骤：1)使用如SEQ ID No.1和PCR SEQ ID No.2所示的引物对进行PCR扩增；2)构建原核表达载体；3)筛选；4)诱导表达；5)纯化和6)复性。该方法各步骤操作简单，快速高效，是一种针对跳蚤唾液过敏原FSA1原核表达蛋白的纯化工艺，该工艺克服了已有工艺复性后复性浓度小，蛋白易聚集的缺陷，并且大大提高生产效率，降低生产成本，适合工业化大规模生产。
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公开(公告)号：CN106434568B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201610828630.7
申请日：2016-09-18
Applicant: 广东温氏大华农生物科技有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗猪流行性腹泻病毒S蛋白杂交瘤细胞株及其应用，该杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株7D3F11，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉·武汉大学，保藏号为CCTCC NO：C201660。本发明通过生物技术手段制备的抗猪流行性腹泻病毒S蛋白杂交瘤细胞株7D3F11，为检测PEDV的感染建立了基础。
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公开(公告)号：CN107556380B
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN201710787730.4
申请日：2017-09-04
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种减少抗猪圆环病毒多克隆抗体中非特异性抗体的方法，具体为：通过应用PK‑15细胞碎片及由不同动物血清包被的ELISA板与抗猪圆环病毒多克隆抗体在常温下培育，使抗猪圆环病毒多克隆抗体中的非特异性抗体与PK‑15细胞碎片及ELISA板中的抗原相结合，进而除去抗猪圆环病毒多克隆抗体中的部分非特异性抗体。本发明的方法可以有效降低抗猪圆环病毒多克隆抗体中的非特异性抗体含量。
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公开(公告)号：CN111074000A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911127987.2
申请日：2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360-505R基因缺失株的三重荧光定量PCR检测材料及试剂盒，检测材料包括引物和探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～9所示。本发明利用三组引物探针进行三重荧光定量PCR扩增非洲猪瘟病毒P72、CD2V和360-505R基因，减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间；可以辨别毒株是否存在基因的缺失，且具有良好的特异性及灵敏度。对于传统qPCR，每次仅扩增一个基因来说，本发明每次PCR反应同时扩增3个基因，成本降低了约2/3。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110791591A
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201911127959.0
申请日：2019-11-18
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和360-505R双基因缺失疫苗株LAMP检测引物及其LAMP检测试剂盒，所述检测引物包括两套引物，一套引物针对非洲猪瘟病毒野毒株的CD2v序列，能特异性检测非洲猪瘟病毒野毒株；另一套针对双基因缺失疫苗株,引物的位置在于360-505R基因27942-35500位缺失区两侧，能特异性的检测出该非洲猪瘟疫苗株。该检测方法采用恒温反应的检测手段，仅需加热即可实现整个反应，可以实现快速现场检测，所述方法检测灵敏度高、特异性强、重复性好、检测速度快，可以作为有效的非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v和360-505R双基因缺失疫苗株的的基层检测手段。
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公开(公告)号：CN110551853A
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201910888108.1
申请日：2019-09-19
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
Abstract: 本发明公开了一种快速区分非洲猪瘟病毒野毒株与CD2V和/或360-505R基因缺失株的三重PCR检测引物组，三对检测引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1～6所示。本发明利用三对引物一次性扩增非洲猪瘟病毒CD2V、P72、360-505R三个基因，减少了鉴定不同基因的检测成本和检测时间；且只需一次PCR反应即可扩增三个不同长度的基因，辨别毒株是否存在基因的缺失。仅需一次PCR扩增即可鉴别出三个基因，对于传统方法分别扩增检测三个基因的样本来说，成本降低了约2/3，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN109593729A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201811638643.3
申请日：2018-12-29
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: C12N7/00 , C12N7/02 , A61K39/235 , A61P31/20
Abstract: 一种禽减蛋综合征病毒全悬浮培养方法，包括以下步骤：(1)在EB66悬浮传代细胞系中驯化禽减蛋综合征病毒，得到种毒；(2)将EB66细胞接种至生物反应器，使其在pH＝7.20±0.1的条件下进行悬浮培养；(3)按禽减蛋综合征病毒与细胞培养基体积比2/1000的比例，将步骤(1)所得种毒接种EB66细胞，培养pH＝7.40±0.1，在病毒效价达到最高时收获病毒液并保存。采用上述方法制得病毒液具有高纯度、高滴度的特点，将其灭活后制备的禽减蛋综合征疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号：CN108261543B
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201810128488.4
申请日：2018-02-08
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: A61K39/17 , A61K39/215 , A61K39/145 , C12N7/00 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12R1/09
Abstract: 本发明提供了一种传代细胞源鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感三联灭活疫苗的制备方法及其应用，包括步骤如下：取EB66细胞于生物反应器中进行生长培养，用于病毒接种；采用二阶培养法，向EB66细胞接种新城疫病毒、传染性支气管炎病毒或禽流感病毒；在接毒24h后，病毒EID50达到最高时收获病毒并保存，得到病毒液；重复上述步骤以分别获得新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液并灭活；将灭活后的新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和禽流感病毒液混合，制备灭活疫苗。本发明采用EB66传代细胞系进行鸡新城疫病毒、传染性支气管炎和禽流感病毒的培养，避免了使用鸡胚造成胚体异源蛋白和外源病毒污染的风险，提高病毒的生产品质，简化病毒的生产工艺。
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公开(公告)号：CN109295008A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811172271.X
申请日：2018-10-09
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸭肝炎病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：步骤1：鸭胚细胞衍生的传代细胞系的复苏与传代培养。步骤2：采用二阶培养法，向全悬浮培养的鸭胚细胞衍生的传代细胞接种鸭肝炎病毒，实现病毒大规模培养。步骤3：接毒后，每隔12h取样测定病毒的ELD50，在病毒ELD50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸭肝炎病毒。本发明的全悬浮培养方法提高了病毒培养规模和效率，符合未来疫苗生产的趋势，有广阔的应用前景及蕴含良好的经济效益。
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