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公开(公告)号：CN106480085A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610954179.3
申请日：2016-11-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82
CPC classification number: C12N15/8206 , C12N15/8212
Abstract: 本发明公开了一种以叶肉原生质体为受体的杂交鹅掌楸高效的瞬间基因表达方法，包括：杂交鹅掌楸叶肉原生质体的制备、质粒的准备、转化和观察。本发明以杂交鹅掌楸叶肉细胞的原生质体做为遗传转化的受体系统，通过PEG介导的方法，以绿色荧光蛋白GFP基因作为报告基因，通过荧光显微镜检测到GFP基因高效的瞬间表达。本发明采用杂交鹅掌楸叶片作为原生质体的来源，取材方便，活力强，建立的瞬间表达体系可为鹅掌楸及木兰科植物基因功能的研究提供一个快速方便的操作平台。
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公开(公告)号：CN106222181A
公开(公告)日：2016-12-14
申请号：CN201610655955.X
申请日：2016-08-11
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8205 , C12N15/8261
Abstract: 本发明公开了杉木植物磺肽素CLPSK2基因及其应用，杉木植物磺肽素CLPSK2基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的杉木植物磺肽素CLPSK2基因，通过试验证实，在功能上既能促进根的生长，又能促进愈伤组织增殖，在植物育种已经生长中将具有广泛的应用。
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公开(公告)号：CN106069785A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610652356.2
申请日：2016-08-10
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
CPC classification number: A01H4/008
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法，包括：1）杂交鹅掌楸胚性愈伤组织的诱导；2）以3/4MS+VC 5mg/L+蔗糖30g/L+氨基寡糖素0.01~0.1mg/L为基本培养基，24℃暗培养杂交鹅掌楸胚性愈伤组织；3）将材料转移至光照培养室组培瓶中，以3/4MS基本培养基继续培养至再生植株；4）将再生植株驯化后移栽。本发明的杂交鹅掌楸体胚纯固体培养植株再生方法，通过纯固体培养方式，跳过体胚发生过程中悬浮培养和平板培养这两个体胚诱导环节，优化并丰富杂交鹅掌楸体胚发生系统，从而更加高效便捷地获得高质量体胚再生植株。建立出稳固、高频、操作简单、苗木抗性良好的杂交鹅掌楸纯固体培养基体胚发生体系，为建立更加高效的杂交鹅掌楸遗传转化受体体系提供参考。
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公开(公告)号：CN105219784A
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201510698634.3
申请日：2015-10-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , C12N5/10 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhRGL1基因及其应用，LhRGL1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过对杂交鹅掌楸LhRGL1基因的克隆与鉴定，基因的表达分析，验证其功能，发现转LhPIN1基因植株生长发育迟缓，植株矮化，分枝数目增多，可见该基因在植物育种中将有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN103229693B
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201310058606.6
申请日：2013-02-01
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杉木优良个体的选择方法，利用基于空间分析方法估计空间残差方差与空间自相关、限制性极大似然法估计遗传方差和最佳线性无偏预测杉木个体育种值的混合线性模型方法，分析杉木主要经济性状包括树高、胸径、木材基本密度和微纤丝角等的遗传变异、遗传控制和性状间的遗传相关，预测杉木每个个体每个性状的育种值，并根据杉木的多性状指数选择公式选出杉木生长与材性在遗传上兼优的优良个体。该方法，在遗传参数估计时剔除了环境影响的同时，基于育种值的多性状指数选择能有效选出综合性状在遗传上表现优良的个体，准确性高，所选出的优良个体可以作为杉木无性快繁的材料，也可以作为杉木下一代育种群体的育种材料。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103088059B
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201310037010.8
申请日：2013-01-31
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸高效遗传转化方法，包括：杂交鹅掌楸转化受体的建立、农杆菌制备、侵染、脱菌培养和筛选培养。本发明以杂交鹅掌楸悬浮培养的单细胞作为遗传转化受体系统，通过农杆菌介导的方法，以GUS基因为报告基因，通过细胞学方法检测GUS基因的瞬间表达、长期表达、通过分子生物学方法检测等确定外源基因的高效转化。本发明采用杂交鹅掌楸单细胞起源的体细胞胚胎发生体系，有利于外源基因的导入，并降低了嵌合体的产生。
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公开(公告)号：CN104293808A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410587281.5
申请日：2014-10-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杂交鹅掌楸LhMKK2基因及其表达蛋白和应用，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。本发明在已建立完善的杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生体系﹑且已获得部分转录组数据的基础上，同源克隆获得杂交鹅掌楸LhMKK2基因全长，命名为LhMKK2，通过基因表达分析，证明了杂交鹅掌楸LhMKK2基因在植物中的广泛表达，参与植株的生长发育，以及逆境胁迫响应过程，通过对其功能分析发现，过表达LhMKK2基因增强植株对盐胁迫响应的抗性，影响植株的生长发育，可为开展杂交鹅掌楸抗逆性分子育种提供理论依据，并进一步在植物抗逆境胁迫中有较广泛的应用。
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公开(公告)号：CN102335234B
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201110225387.7
申请日：2011-08-08
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K36/57 , A61P35/00 , A61K127/00 , A61K129/00
Abstract: 本发明公开了一种鹅掌楸的生物碱提取物及其提取方法和应用，鹅掌楸的生物碱提取物由如下方法得到：取鹅掌楸植物材料，35℃烘干，粉碎至约40目的细粉末；用10％氨水浸润12h，过滤，得残渣；1h后，用2L氯仿回流2h，过滤，浓缩，用1%~2%的盐酸萃取5次，100mL/次，将盐酸萃取液用10%的氨水调节pH＞8，然后用氯仿萃取，100mL/次，总计3次，过滤，合并，蒸干得总生物碱提取物。鹅掌楸的生物碱提取物，提取方法简单，方便，生物碱得率高，该提取物具有良好的抑制肿瘤细胞的生长、增值与转移能力，在制备用于治疗癌症细胞药物中的具有广泛的用途，具有一定的实用性，能够产生很好的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号：CN102250944B
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201110146621.7
申请日：2011-06-02
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种CdSe/ZnS量子点与植物细胞的共孵育方法，所述的量子点材料为CdSe/ZnS量子点，尺寸为30nm以内，表面电荷性质为正电荷。该植物细胞的量子点材料在以纳米基因载体建立高效的植物细胞转基因体系中的应用。本发明以CdSe/ZnS量子点与杂交鹅掌楸的胚性悬浮细胞采用不同的条件进行共孵育，结果表明胞吞进入完整细胞内部的表面携带正电荷的CdSe/ZnS纳米颗粒的量明显与共培养时间、温度有明显的依赖关系，它们可以通过细胞的液相胞吞作用进入杂交鹅掌楸细胞内，且不影响细胞的活性；因此以表面携带正电荷的CdSe/ZnS量子点纳米材料作为基因载体，在植物悬浮细胞的转基因研究和应用中具有广泛的前景，能够为植物基因工程提供新型的无机纳米基因载体和转基因技术体系。
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公开(公告)号：CN102657152A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210135145.3
申请日：2012-05-04
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01N3/00
Abstract: 本发明公开了一种胚性材料的超低温冷冻保存方法，包括以下步骤：取待保存的胚性材料接种入高渗液体培养基，25℃培养3~10d；过滤胚性材料装入冷冻管，加入复合玻璃化保护剂，0℃放置脱水0～70min，然后装入冷冻盒直接投入液氮速冻，液氮中长期保存即可。本发明的胚性材料的超低温冷冻保存方法，操作简单，方便可行，解决了林木体胚产业化的重要瓶颈问题，可实现胚性材料长期保存到1年以上，并能使其保持高频增殖能力，具有很好的实用性，能够产生很好的经济效益和社会效应。
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