一种利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法

    公开(公告)号:CN110736705B

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN201911056720.9

    申请日:2019-10-31

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: G01N21/19 G01N21/25 G01N21/75

    摘要: 本发明涉及一种利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法。本发明将差向异构酶加入到二肽对映异构体初始溶液中进行催化反应,利用圆二色光谱检测催化反应前后二肽对映异构体溶液的CD信号强度变化,若有变化,代表差向异构酶有活性,若无变化,代表差向异构酶无活性。本发明利用圆二色光谱快速测量差向异构酶活性的方法无需衍生反应、操作简便、重现性好、误差范围小、灵敏度高、线性范围宽、连续可测、可用于原位检测,为手性识别的研究提供了一个新的领域。

    一种简易、低成本制备深海弹性蛋白酶Pseudoalterin的方法

    公开(公告)号:CN109321557A

    公开(公告)日:2019-02-12

    申请号:CN201811215865.4

    申请日:2018-10-18

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: C12N9/66 C12R1/01

    摘要: 本发明涉及一种简易、低成本制备深海弹性蛋白酶Pseudoalterin的方法,该方法将深海细菌Pseudoalteromonas sp.CF6-2种子培养液接种于添加甘氨酸母液的发酵培养基中进行发酵培养,得到的发酵液透析、离心、洗脱,得到深海细菌弹性蛋白酶,该方法用甘氨酸替代屠宰厂副产品牛心管,进行细菌菌株CF6-2胞外弹性蛋白酶的产酶发酵,不仅发酵成本大为降低,并且因其易获得易储存没有其他副产物的特点,节省人力物力和时间,使菌株CF6-2胞外酶活达到136.37±3.2U/mL,与牛心管发酵技术相当,具有很好的环境效益和社会效益。

    一种提高深海弹性蛋白酶稳定性的复合保护剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN106119236B

    公开(公告)日:2019-01-04

    申请号:CN201610524737.2

    申请日:2016-07-05

    申请人: 山东大学

    IPC分类号: C12N9/96 C12N9/66

    摘要: 本发明涉及一种提高深海弹性蛋白酶稳定性的复合保护剂及其制备方法。提高深海弹性蛋白酶稳定性的复合保护剂,组分如下:葡萄糖,海藻糖,甘油,蔗糖,Tris‑HCl溶液配制,pH8.0~9.0。本发明还涉及该复合保护剂的制备方法。本发明所述提高深海弹性蛋白酶稳定性的复合保护剂能够显著提高酶制剂的热稳定性,与弹性蛋白酶液混合后在37℃下保存3天后,仍保持80%左右的酶活,5天后仍有60%左右的酶活,在4℃保存7个月后,仍保持90%以上的酶活,解决了深海弹性蛋白酶长期保存容易失活的问题。本发明所述复合保护剂能显著提高多种酶的热稳定性。