一种甲醛脱氢酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN114621935B

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202011460232.7

    申请日:2020-12-11

    Inventor: 赵宗保 王俊婷

    Abstract: 本申请公开了一种甲醛脱氢酶突变体及其应用,所述甲醛脱氢酶突变体选自以SEQ ID NO.1所示的野生型甲醛脱氢酶为基础进行如下突变后的突变体中的任一种:第192位的A突变为R;第236位的L突变为V;第223位的L突变为V;第223位的L突变为T;第218位的L突变为V;第267位的R突变为V;第192位的A突变为R、第236位的L突变为V;第192位的A突变为R、第236位的L突变为V、第223位的L突变为V;第192位的A突变为R、第236位的L突变为V、第223位的L突变为T。所述甲醛脱氢酶突变体可以更好地利用甲醛类化合物还原NAD类似物得到还原态NAD类似物。

    一种NAD类似物的还原方法
    93.
    发明授权

    公开(公告)号:CN109837321B

    公开(公告)日:2023-01-13

    申请号:CN201711230338.6

    申请日:2017-11-29

    Abstract: 本发明公开了一种NAD类似物的还原方法及其应用。该方法中还原剂为甲酸化合物,催化剂为可利用甲酸化合物的甲酸脱氢酶,甲酸脱氢酶氧化甲酸化合物的同时,将NAD类似物转化为其还原态。该方法可用于生产还原态NAD类似物或氘代的还原态类似物,也可为消耗还原态NAD类似物的酶促反应提供还原力,还原态的NAD类似物可作为辅酶应用于苹果酸酶ME‑L310R/Q401C、D‑乳酸脱氢酶DLDH‑V152R、酿酒酵母醇脱氢酶等酶催化的还原反应,有利于NAD类似物的广泛应用。该NAD类似物还原方法可在温和条件下,再生还原态NAD类似物用于苹果酸或乳酸的制备;也可作为一种氧化还原力调控微生物体内苹果酸或乳酸的代谢强度。

    一种工程菌株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN112980709B

    公开(公告)日:2022-06-03

    申请号:CN201911285329.6

    申请日:2019-12-13

    Abstract: 本申请公开了一种工程菌株,所述工程菌株为LDP1基因和CALs基因功能灭活的工程菌株ΔCALsΔLDP1。本申请提供了一种通过脂滴蛋白基因的敲除实现对脂滴大小调控的方法。本申请通过基因工程,实现调控脂滴大小并弱化油脂合成代谢途径,为天然产油酵母菌株工程改造,使代谢流更多地流向其他代谢途径,为萜类化合物的合成奠定了基础,将有力促进今后圆红冬孢酵母或其他产油酵母萜类化合物合成的代谢工程研究。

    一种生物催化甘油产1,3-丙二醇的方法

    公开(公告)号:CN110964753B

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN201811154814.5

    申请日:2018-09-30

    Abstract: 本发明公开了一种生物催化甘油产1,3‑丙二醇的方法。该方法先通过甘油脱水酶将甘油转化为中间体3‑羟基丙醛,中间体在NAD类似物依赖型1,3‑丙二醇脱氢酶与可再生NAD类似物的NAD类似物依赖型氧化还原酶偶联催化下,还生产1,3‑丙二醇。该体系可用于胞外无细胞体系或在微生物体内催化生物柴油副产物甘油产1,3‑丙二醇,显著降低1,3‑丙二醇生产成本,提高产物得率。

    一种工程菌株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN112980709A

    公开(公告)日:2021-06-18

    申请号:CN201911285329.6

    申请日:2019-12-13

    Abstract: 本申请公开了一种工程菌株,所述工程菌株为LDP1基因和CALs基因功能灭活的工程菌株ΔCALsΔLDP1。本申请提供了一种通过脂滴蛋白基因的敲除实现对脂滴大小调控的方法。本申请通过基因工程,实现调控脂滴大小并弱化油脂合成代谢途径,为天然产油酵母菌株工程改造,使代谢流更多地流向其他代谢途径,为萜类化合物的合成奠定了基础,将有力促进今后圆红冬孢酵母或其他产油酵母萜类化合物合成的代谢工程研究。

    酶促合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸的方法及其应用

    公开(公告)号:CN112695063A

    公开(公告)日:2021-04-23

    申请号:CN201911004591.9

    申请日:2019-10-22

    Inventor: 赵宗保 王雪颖

    Abstract: 本发明涉及一种酶促合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸的方法及其应用。利用烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体为催化剂,催化烟酰胺单核苷酸和胞嘧啶核苷三磷酸耦合反应,制备烟酰胺胞嘧啶二核苷酸。在微生物细胞内表达烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶突变体的编码基因,工程菌利用内源代谢物合成烟酰胺胞嘧啶二核苷酸,并且胞内烟酰胺胞嘧啶二核苷酸可作为辅酶,选择性介导氧化还原反应,提高目标代谢产物产量。在一个典型实例中,L‑苹果酸产量提高了79%。在另一个典型实例中,L‑苹果酸生产D‑乳酸的转化率提高了2.4倍。

    一种产油微生物制脂肪酸甘油脂的方法及其甘油脂和应用

    公开(公告)号:CN106318984B

    公开(公告)日:2020-11-17

    申请号:CN201510388017.3

    申请日:2015-06-30

    Abstract: 本发明公开了一种利用产油微生物制备脂肪酸甘油脂的方法。直接以脂肪酸为酰基供体,或补充甘油或甘油与葡萄糖的混合物后,以产油酵母为全细胞催化剂,有氧发酵获得含油脂菌体,并从菌体中提取微生物油脂。该方法能够获得含有多种脂肪酸并以一种为主的油脂,经分离提取后,在研究患有脂肪代谢疾病病体内甘油酯代谢情况中的应用,以及作为精细化学品、医药、食品添加剂或材料中间体,为微生物油脂的高值化生产提供了新途径,具有良好的应用前景。

    一种生产ω-1-羟基脂肪酸的方法

    公开(公告)号:CN111218485A

    公开(公告)日:2020-06-02

    申请号:CN201811421284.6

    申请日:2018-11-26

    Abstract: 本发明公开了一种生产ω-1-羟基脂肪酸的方法。以NADH类似物依赖型的细胞色素P450为生物催化剂,以NADH类似物为辅因子,催化底物脂肪酸次末端C-H羟基化,生成ω-1-羟基脂肪酸。NADH类似物依赖型的细胞色素P450可用于与再生NADH类似物的再生酶及对应再生底物偶联催化下,利用NAD类似物为辅因子,生成ω-1-羟基脂肪酸。该NADH类似物依赖型细胞色素P450酶可用于构建生物正交的不依赖天然辅因子NADPH的合成羟化脂肪酸的代谢途径,实现P450酶催化的能量消耗与内源能量代谢解偶联。

    一种预处理木质纤维生物质提高其产糖率的方法

    公开(公告)号:CN105385722B

    公开(公告)日:2019-07-12

    申请号:CN201410458818.8

    申请日:2014-09-09

    CPC classification number: Y02P20/542

    Abstract: 本发明提供一种使用离子液体与γ‑戊内酯组成的混合溶剂溶解预处理木质纤维素生物质,提高其产糖率的方法。包括以下步骤:1)将离子液体、γ‑戊内酯、木质纤维素生物质混合形成预溶解预处理体系;2)将预溶解混合物体系加热溶解,形成溶液;3)往溶液体系加入反溶剂,使溶解的木质纤维生物质沉淀、再生;4)取再生木质纤维素生物质,加入缓冲溶液与纤维素酶及木聚糖酶进行酶解,获得糖溶液。本发明利用生物基γ‑戊内酯部分代替离子液体,组成混合体系,具有工艺简单,溶剂成本低,操作方便,溶剂可循环使用,经处理的木质纤维素里的纤维素、半纤维素具有酶水解速度快、产糖率高等优点。

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