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公开(公告)号：CN103305635A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310239863.X
申请日：2013-06-18
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明涉及一种分子检测侵染甘蔗的高粱花叶病毒（SrMV）的方法。通过提取甘蔗植株叶片总RNA、进行反转录反应（RT）获得模板、利用高粱花叶病毒不同株系外壳蛋白基因保守序列简并引物进行聚合酶链式反应（PCR)、利用限制性内切酶NsiI和BsmI对PCR产物进行双酶切反应，用4%的低熔点琼脂糖凝胶电泳检测限制性内切酶条带长度多态性（RFLP）来鉴定是否感染SrMV及其株系类型。该方法将快速与简便的检测甘蔗高粱花叶病毒分离物不同株系。本发明的分子检测侵染甘蔗的高粱花叶病毒的方法，克服了生物学鉴定和常规RT-PCR等方法的缺点，提供了一种快速、特异、准确的SrMV不同病毒株系的检测方法。
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公开(公告)号：CN103305509A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310239362.1
申请日：2013-06-18
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明涉及一种克隆高粱花叶病毒甘蔗分离物全基因组的引物组及方法，克隆高粱花叶病毒甘蔗分离物全基因组的引物组包括7对引物，依次具有如序列表中SEQIDNO.1~SEQIDNO.14所示的核苷酸序列；以感染SrMV的甘蔗叶片总RNA为模板进行反转录反应，再以反转录产物作为模板，分别利用上述引物进行PCR扩增，对所有片段进行测序和拼接，即获得SrMV基因组全长序列。本发明的引物扩增片段相互重叠，覆盖了SrMV基因组近全长序列，能够克隆SrMV不同株系的全基因序列；本发明利用分段克隆SrMV全基因组的方法，具有简便、有效、快速的优点，为克隆SrMV全基因组序列提供了便捷有效的新途径。
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公开(公告)号：CN103305635B
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201310239863.X
申请日：2013-06-18
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明涉及一种分子检测侵染甘蔗的高粱花叶病毒（SrMV）的方法。通过提取甘蔗植株叶片总RNA、进行反转录反应（RT）获得模板、利用高粱花叶病毒不同株系外壳蛋白基因保守序列简并引物进行聚合酶链式反应（PCR)、利用限制性内切酶NsiI和BsmI对PCR产物进行双酶切反应，用4%的低熔点琼脂糖凝胶电泳检测限制性内切酶条带长度多态性（RFLP）来鉴定是否感染SrMV及其株系类型。该方法将快速与简便的检测甘蔗高粱花叶病毒分离物不同株系。本发明的分子检测侵染甘蔗的高粱花叶病毒的方法，克服了生物学鉴定和常规RT-PCR等方法的缺点，提供了一种快速、特异、准确的SrMV不同病毒株系的检测方法。
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