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公开(公告)号:CN104099332B
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201410204418.4
申请日:2014-05-12
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种猪akirin2基因启动子及其应用,其核苷酸序列如SEQ:ID:1所示。本发明所述的猪akirin2基因启动子在外源基因真核表达、转基因猪中的应用。本发明确定了200bp的最小启动子片段的活性最强。本发明提供寡核苷酸引物序列、克隆载体、表达载体、转化的宿主、外源蛋白表达的方法。这些为进一步开展猪akirin2基因在猪的肌卫星细胞及其他相关细胞中调控的研究提供了基础,同时可用于哺乳动物细胞中进行外源蛋白的表达及转基因研究。
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公开(公告)号:CN104531699A
公开(公告)日:2015-04-22
申请号:CN201410525824.0
申请日:2014-10-09
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/67
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种增强外源基因表达的猪的UCOE调控元件片段。所述UCOE调控元件片段的碱基序列如序列表所示。该调控元件片段在外源蛋白表达的方面,通过构建重组质粒表达载体pCpG-Mini-GFP-UCOE,转染HEK293T细胞,可以增强GFP表达。本发明以人的1.5kbUCOE片段作为对照,利用酶切方法和RT-PCR方法将猪UCOE片段分割成不同长度的片段,构建不同表达载体,转染HEK293T细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测报告基因GFP的相对表达量筛选出最佳的能够增强外源基因表达的UCOE片段序列,即本发明所请求保护的基因序列。
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公开(公告)号:CN101874739A
公开(公告)日:2010-11-03
申请号:CN200910309775.6
申请日:2009-11-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61B5/15
Abstract: 本发明涉及一种血管瘘,包括外管,外管内设置有隔离塞,隔离塞将外管分隔为前后两个腔,前腔为入血控制腔,入血控制腔上设置有入血孔,入血控制腔的外壁设置有防脱弹性球囊,外管段上还止退穿装有止退套托,外管的后腔内穿设有防脱控制管、阀控管和采血管,防脱控制管一端与防脱弹性球囊连通、另一端悬伸于外管外且连通有防脱控制阀囊;阀控管一端位于入血控制腔另一端悬伸于外管外,阀控管位于入血控制腔内的端部连通有弹性管,阀控管的另一端连通有采血通断控制阀囊,弹性管正对入血孔;采血管的一端与入血控制腔连通另一端悬伸于外管的后腔外,采血管悬伸于外管外的端部设置有通断控制阀;采血通断控制阀囊及防脱控制阀囊内均有收涨控制液。
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公开(公告)号:CN105018510A
公开(公告)日:2015-11-04
申请号:CN201510389502.2
申请日:2015-07-06
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域,具体涉及一种提高免疫用口蹄疫蛋白可溶性的方法。该方法为,在采用基因工程进行口蹄疫蛋白表达时,通过基因工程手段,在口蹄疫蛋白的C端增加His6-MBP标签可增加口蹄疫蛋白的可溶性;所述His6表示6个组氨酸标签,MBP表示麦芽糖酶结合蛋白。本发明还提供了利用该方法所制备的针对A型口蹄疫用免疫口蹄疫蛋白CDG276。本发明与现有的基因工程所制备的FMDV VPI蛋白相比,表达量有较为明显提高,同时由于加入了可溶性的标签麦芽糖结合蛋白(MBP),所表达的FMDVA1蛋白可溶度提升明显,因而具有较好的推广应用价值。
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公开(公告)号:CN104293832A
公开(公告)日:2015-01-21
申请号:CN201410525855.6
申请日:2014-10-09
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种细胞永生化过程中所使用的真核重组微环表达载体Minicircle-MRPS18及其制备方法。该载体由微环质粒与猪的MRPS18基因重组构建,其碱基序列如序列表所示。该载体通过Tubofect试剂转染法转染Hela细胞可制备永生化细胞。本发明特异性的结合了Minicircle质粒载体与MRPS18基因的优点,所制备的真核重组微环表达载体,具有转基因持续表达时间长;不会引起真核细胞的应激非病毒式诱导系统,低免疫源性,安全稳定的优点;且该质粒表达载体表达GFP,便于跟踪反应;同时具备转染效率高、简单易用等优点,可以获得较好的永生化细胞制备效果。
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公开(公告)号:CN104099332A
公开(公告)日:2014-10-15
申请号:CN201410204418.4
申请日:2014-05-12
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种猪akirin2基因启动子及其应用,其核苷酸序列如SEQ:ID:1所示。本发明所述的猪akirin2基因启动子在外源基因真核表达、转基因猪中的应用。本发明确定了200bp的最小启动子片段的活性最强。本发明提供寡核苷酸引物序列、克隆载体、表达载体、转化的宿主、外源蛋白表达的方法。这些为进一步开展猪akirin2基因在猪的肌卫星细胞及其他相关细胞中调控的研究提供了基础,同时可用于哺乳动物细胞中进行外源蛋白的表达及转基因研究。
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公开(公告)号:CN101874739B
公开(公告)日:2011-09-14
申请号:CN200910309775.6
申请日:2009-11-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61B5/15
Abstract: 本发明涉及一种血管瘘,包括外管,外管内设置有隔离塞,隔离塞将外管分隔为前后两个腔,前腔为入血控制腔,入血控制腔上设置有入血孔,入血控制腔的外壁设置有防脱弹性球囊,外管段上还止退穿装有止退套托,外管的后腔内穿设有防脱控制管、阀控管和采血管,防脱控制管一端与防脱弹性球囊连通、另一端悬伸于外管外且连通有防脱控制阀囊;阀控管一端位于入血控制腔另一端悬伸于外管外,阀控管位于入血控制腔内的端部连通有弹性管,阀控管的另一端连通有采血通断控制阀囊,弹性管正对入血孔;采血管的一端与入血控制腔连通另一端悬伸于外管的后腔外,采血管悬伸于外管外的端部设置有通断控制阀;采血通断控制阀囊及防脱控制阀囊内均有收涨控制液。
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公开(公告)号:CN116790643A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202310397789.8
申请日:2023-04-14
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物工程领域,尤其涉及编码突变体的核酸分子、重组蛋白及其应用。本发明提供了编码突变体的核酸分子,所述突变体包括单突变体、三突变体和/或多突变体中的一种或多种;编码所述单突变体的核酸分子经编码野生型TEV蛋白酶突变获得;编码所述三突变体的核酸分子经编码所述单突变体的核酸分子突变获得;编码所述多突变体的核酸分子经编码所述三突变体的核酸分子突变获得。本发明筛选到一条高表达TEVP的基因序列:31C‑3MP‑S219V,可极大地提高TEVP在原核细胞中的表达量,为TEV蛋白酶的高效表达和生产提供了一种经济、操作简单的方法。
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