公开(公告)号：CN118892113A

公开(公告)日：2024-11-05

申请号：CN202410933465.6

申请日：2024-07-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 牛英杰 ,  吴高远 ,  郑丹 ,  任文杰 ,  刘广政 ,  李碧春 ,  靳锴 ,  左其生 ,  陈国宏 ,  孙红艳

IPC: A01N1/02 ,  C12N5/0735

Abstract: 本发明公开了鸡胚胎期性腺的冷冻保护液、冻存及原始生殖细胞分离培养方法，涉及畜牧学和生物技术领域。冷冻保护液包括A液和B液；其中，A液包括：胎牛血清、CO2独立培养基和GlutaMAX，且胎牛血清、CO2独立培养基和GlutaMAX的体积比为80～90:10～20:1；B液包括：A液和二甲基亚砜，且A液和二甲基亚砜的体积比为4～6:1。冻存及原始生殖细胞分离培养方法包括：鸡胚性腺的获取；鸡胚性腺的冻存；鸡胚性腺的复苏；原始生殖细胞的分离培养。本发明可以将鸡胚胎期性腺冻存后，在合适的时间和地点再进行复苏，对性腺中的PGCs进行培养建系，且冻存、复苏和PGCs建系的效率高，获得的PGCs细胞系依然保持PGCs的生物学特性。

公开(公告)号：CN116855444A

公开(公告)日：2023-10-10

申请号：CN202310819378.3

申请日：2023-07-06

Applicant: 扬州大学

Inventor： 牛英杰 ,  任文杰 ,  郑丹 ,  刘广政 ,  李碧春 ,  靳锴 ,  左其生 ,  张亚妮 ,  陈国宏 ,  孙红艳

IPC: C12N5/073 ,  C12M1/26 ,  C12M1/12

Abstract: 本发明涉及一种鸡原始生殖细胞单克隆细胞系建立的方法，属于畜牧学和生物技术领域；通过自制简易口吸管，用FAcs培养基对PGCs进行稀释，用口吸管分选单个PGCs，在5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱中进行培养，每三天换一次培养液，建立PGCs的单克隆细胞系；本发明提供的方法可以在普通实验室高效稳定建立鸡PGCs单克隆细胞系，且不需要复杂昂贵的仪器，分选和建系效率高，为研究鸡PGCs生物学特性提供了一种新的途径，为家禽的良种扩繁、基因修饰及修饰后筛选、家禽分子设计育种和种质资源冷冻保存等提供了新的方法、奠定了实验基础。

公开(公告)号：CN117683705A

公开(公告)日：2024-03-12

申请号：CN202311756853.3

申请日：2023-12-20

Applicant: 扬州大学 ,  江苏省家禽科学研究所

Inventor： 牛英杰 ,  吴骏 ,  任文杰 ,  刘广政 ,  李碧春 ,  韩威 ,  李国辉 ,  靳锴 ,  左其生 ,  张亚妮 ,  陈国宏

IPC: C12N5/0735

Abstract: 本发明公开一种鸡多能干细胞体外培养方法，属于畜牧学和生物技术领域；通过添加FGF2、IWR‑1和XAV‑93，并以STO细胞为饲养层，建立FIX培养体系，从鸡新鲜种蛋EGK.X期分离胚盘明区细胞，在FIX培养体系中，采用5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱进行培养，每天更换培养液，每2‑3天传代一次，进行鸡多能干细胞PSCs体外培养；本发明提供的方法可以在短期内使鸡PSCs快速增殖，且维持其多能性和分化潜能；为研究鸡PSCs生物学特性提供了材料，为家禽的良种扩繁、基因修饰、家禽分子设计育种和种质资源冷冻保存等提供了新的方法、奠定了实验基础。