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公开(公告)号：CN114836382A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210560056.7
申请日：2022-05-23
申请人： 广东海洋大学
摘要： 本发明提供了一种尼罗罗非鱼星形胶质细胞系及其构建方法和应用，涉及生物细胞模型技术领域。本发明针对尼罗罗非鱼脑组织，采用胰酶消化法分离脑组织细胞，再利用差速贴壁法能进一步减少成纤维细胞的干扰，能更大程度保留脑组织中的胶质细胞进行原代培养，荧光免疫组化检测GFAP信号呈阳性，成功构建罗非鱼脑星形胶质细胞系，可连续传至100代以上，还能维持良好的生长状态，可冷冻保存。本发明所述尼罗罗非鱼脑星形胶质细胞系可以直接用于罗非鱼湖病毒(TiLV)的病原特征分析及疫苗开发研究，还可运用于罗非鱼无乳链球菌脑膜炎机制及鱼源链球菌病的渔药开发研究。
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公开(公告)号：CN113981006A
公开(公告)日：2022-01-28
申请号：CN202111204944.7
申请日：2021-10-15
申请人： 广东海洋大学
IPC分类号： C12N15/867 , C12N5/10 , C12N15/12
摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种慢病毒传染鱼类或两栖类细胞系的方法，所述慢病毒传染鱼类或两栖类细胞系的方法包括：进行目的基因启动子及基因序列的扩增及获得；根据扩增获得的目的基因启动子及基因序列进行重组质粒的构建；进行携带所述重组质粒的慢病毒的构建；进行慢病毒传染鱼类或两栖类细胞系的构建。本发明提供的慢病毒传染鱼类或两栖类细胞系的方法，简单易行可靠，传染效率高，可以利用慢病毒构建稳定表达外源基因的鱼类细胞或两栖类细胞系，避免繁琐的筛选工作，可广泛用于筛选药物所构建的细胞系，并能准确的判断候选化合物的生物学活性，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN113862277A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111340895.X
申请日：2021-11-12
申请人： 广东海洋大学深圳研究院 , 深圳义海生物科技有限公司
IPC分类号： C12N15/12 , C07K14/46 , C12N15/81 , C12N15/66 , C12N1/19 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61P31/04 , A23K20/147 , A23K20/195 , A23K50/80 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白制备方法和应用，通过编码斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin基因的ORF获得斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽蛋白，并利用斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽蛋白构建能够大量表达斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白的重组毕赤酵母GS115菌株，获得的斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白纯化后能够制备抗革兰氏阳性和/或革兰氏阴性菌的水产养殖饲料添加剂或抗菌药物或日化用品添加剂。
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公开(公告)号：CN113817744A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202111339161.X
申请日：2021-11-12
申请人： 广东海洋大学深圳研究院 , 深圳义海生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种尼罗罗非鱼抗菌肽NK‑Lysin基因及成熟肽蛋白和应用，本发明编码了尼罗罗非鱼抗菌肽NK‑Lysin基因的ORF获得尼罗罗非鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽蛋白，并利用尼罗罗非鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽蛋白构建能够大量表达尼罗罗非鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白的重组毕赤酵母GS115菌株，获得的尼罗罗非鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白纯化后能够制备抗革兰氏阳性和/或革兰氏阴性菌的水产养殖饲料添加剂或抗菌药物或日化用品添加剂。
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公开(公告)号：CN114836382B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202210560056.7
申请日：2022-05-23
申请人： 广东海洋大学
摘要： 本发明提供了一种尼罗罗非鱼星形胶质细胞系及其构建方法和应用，涉及生物细胞模型技术领域。本发明针对尼罗罗非鱼脑组织，采用胰酶消化法分离脑组织细胞，再利用差速贴壁法能进一步减少成纤维细胞的干扰，能更大程度保留脑组织中的胶质细胞进行原代培养，荧光免疫组化检测GFAP信号呈阳性，成功构建罗非鱼脑星形胶质细胞系，可连续传至100代以上，还能维持良好的生长状态，可冷冻保存。本发明所述尼罗罗非鱼脑星形胶质细胞系可以直接用于罗非鱼湖病毒(TiLV)的病原特征分析及疫苗开发研究，还可运用于罗非鱼无乳链球菌脑膜炎机制及鱼源链球菌病的渔药开发研究。
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公开(公告)号：CN117683702A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311598000.1
申请日：2023-11-28
申请人： 广东海洋大学
摘要： 本发明公开了一种硬骨鱼类内皮细胞系及其构建方法和应用，属于细胞模型技术领域。本发明采用胰酶消化的方式分离获得细胞系，并在培养期间按时添加含有多种诱导因子的星形胶质细胞条件培养基，诱导TVEC‑01细胞系具备更多脑微血管内皮细胞的生物特性，保藏编号为CGMCC NO.45733。本发明所述内皮细胞可经过80余次传代屏障功能仍未丧失，可对硬骨鱼机体的多个生物过程所涉及的机制进行研究；用于研究体外研究鱼类血管疾病相关机制；血管相关疾病的体外药物筛选以及相关靶点的研究；TVEC‑01细胞构建体外血脑屏障模型。本发明利用该模型进行脑膜炎致病菌无乳链球菌的感染实验，为无乳链球菌的跨细胞途径提供了研究工具。
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公开(公告)号：CN113862277B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202111340895.X
申请日：2021-11-12
申请人： 广东海洋大学深圳研究院 , 深圳义海生物科技有限公司
IPC分类号： C12N15/12 , C07K14/46 , C12N15/81 , C12N15/66 , C12N1/19 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61P31/04 , A23K20/147 , A23K20/195 , A23K50/80 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白制备方法和应用，通过编码斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin基因的ORF获得斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽蛋白，并利用斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽蛋白构建能够大量表达斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白的重组毕赤酵母GS115菌株，获得的斜带石斑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白纯化后能够制备抗革兰氏阳性和/或革兰氏阴性菌的水产养殖饲料添加剂或抗菌药物或日化用品添加剂。
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公开(公告)号：CN118325820A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410627852.7
申请日：2024-05-21
申请人： 广东海洋大学
摘要： 本发明提供了一种硬骨鱼体外血脑屏障模型及其构建方法和应用，属于细胞模型和药学研究技术领域。本发明的硬骨鱼体外血脑屏障模型由硬骨鱼中两种同源的细胞系共培养构成，两种细胞相互交错，以更紧密的方式融合生长，比单细胞血脑屏障模型更可靠、准确，可应用于硬骨鱼脑膜炎致病机制的研究和硬骨鱼神经中枢相关疾病的体外药物筛选以及相关靶点的研究。
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公开(公告)号：CN113912693A
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202111341289.X
申请日：2021-11-12
申请人： 广东海洋大学深圳研究院 , 深圳义海生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/46 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P21/02 , A61K38/17 , A61P31/04 , A23K20/147 , A23K50/80 , C12R1/84
摘要： 本发明公开了一种公子小丑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽蛋白及其表达和应用，利用公子小丑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽蛋白构建能够大量表达公子小丑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白的重组毕赤酵母GS115菌株，获得的公子小丑鱼抗菌肽NK‑Lysin成熟肽重组蛋白纯化后能够制备抗革兰氏阳性和/或革兰氏阴性菌的水产养殖饲料添加剂或抗菌药物或日化用品添加剂。
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