公开(公告)号：CN103409500B

公开(公告)日：2017-01-11

申请号：CN201310173307.7

申请日：2013-05-10

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 高俊山 ,  谢鹏 ,  胡丽 ,  孟艳 ,  蔡永萍 ,  林毅

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/84

Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定烟草抗性基因的有效方法，本发明所用的农杆菌株系为GV3101(pMP90),属根癌农杆菌，在烟草的遗传转化中效果比较好。采用的转化方法是电击转化法，而不是常用的冻融法或热激法，使用伯乐公司的电转化仪，其转化参数为0.1cm电击杯、输出25mF、电压1.8kV和抗性200W，提高了转化效率；本发明所用的培养基是最常用的LB培养基，而不是较复杂的YEP或YEB培养基，且所加抗生素分别为25mg/mL卡那霉素和50mg/mL利福平，可以有效的杀死没有转化成功的农杆菌，节省了筛选时间。

公开(公告)号：CN103409500A

公开(公告)日：2013-11-27

申请号：CN201310173307.7

申请日：2013-05-10

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 高俊山 ,  谢鹏 ,  胡丽 ,  孟艳 ,  蔡永萍 ,  林毅

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/84

Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定烟草抗性基因的有效方法，本发明所用的农杆菌株系为GV3101(pMP90)，属根癌农杆菌，在烟草的遗传转化中效果比较好。采用的转化方法是电击转化法，而不是常用的冻融法或热激法，使用伯乐公司的电转化仪，其转化参数为0.1cm电击杯、输出25mF、电压1.8kV和抗性200W，提高了转化效率；本发明所用的培养基是最常用的LB培养基，而不是较复杂的YEP或YEB培养基，且所加抗生素分别为25mg/mL卡那霉素和50mg/mL利福平，可以有效的杀死没有转化成功的农杆菌，节省了筛选时间。