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公开(公告)号：CN117384948A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202311283988.2
申请日：2023-09-28
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明提供了一种用于在靶位点‑4位实现A/T精准替换的基因序列及替换方法。本发明在单一载体上导入NmCas9和SpCas9双表达框，实验证明，利用SpCas9在植物中相对偏好碱基缺失和NmCas9相对偏好单碱基插入，在共切点的基因组靶标上引入适配SpCas9的靶标sgRNA和适配NmCas9的且靶标序列带有‑4位单碱基缺失的sgRNA，进而构建水稻靶向编辑载体，导入水稻细胞后可以造成水稻在该位点‑4位任意单碱基高频替换A或T，从而实现有DSB无模板的植物基因组精准单碱基替换。
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