肝包虫基因片段筛选方法、扩增引物及试剂盒

    公开(公告)号:CN113355431A

    公开(公告)日:2021-09-07

    申请号:CN202010854980.7

    申请日:2020-08-24

    摘要: 肝包虫基因片段筛选方法、扩增引物及试剂盒,该筛选方法通过从细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫的全基因组中排出人类基因组、近亲缘关系绦虫组基因组的影响,筛选得到第三细粒棘球绦虫基因片段、第三多房棘球绦虫基因片段和共同基因片段,并分别以三类基因片段设计三类扩增引物;通过进一步筛选得到用于检测人体组织的包虫病的引物对组,基于该引物对组提供试剂盒及试剂盒使用方法。本发明从根源上避免了由于待检测组织DNA中存在的人类基因或近亲缘关系绦虫基因所导致的假阳性,且引物在设计时所针对的待检测DNA为人体组织样本,显著降低了临床检测中的假阴性结果,特异性引物的准确率更高、特异性更强,显著增强引物对和试剂盒的临床应用效果。

    一种ddPCR检测包虫病的扩增引物及其构建方法、应用

    公开(公告)号:CN113637774B

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202110962259.4

    申请日:2021-08-20

    摘要: ddPCR检测肝包虫病的引物构建方法、扩增引物及其应用,该方法包括以下步骤:筛选细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的共同基因片段,基于共同基因片段设计多个第一引物;采用第一引物扩增第一病患组的血浆cfDNA样本,将能够扩增第一病患组的血浆cfDNA样本的第一引物作为第二引物;采用反应体系包括第二引物的ddPCR检测第二病患组的血浆cfDNA样本,筛选出阳性检出率大于预设值的第二引物作为目标扩增引物。本发明得到的扩增引物能够扩增释放进入外周血液中的以血浆游离DNA的形式存在的棘球绦虫的DNA片段,结合ddPCR方法能够通过检测人体血浆诊断是否感染包虫病,实现了细粒棘球绦虫与多房棘球绦虫的超早期诊断,为研发包虫病精准疗法提供了足够灵敏的检测工具。

    去羟肌苷在抑制肝包虫病中的应用

    公开(公告)号:CN115671126A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110824531.2

    申请日:2021-07-21

    IPC分类号: A61K31/708 A61P33/10

    摘要: 本发明提供了一种去羟肌苷在抑制肝包虫病中的应用,去羟肌苷能够抑制细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴体内嘌呤核苷磷酸化酶的作用,导致虫体内脱氧三磷酸鸟苷大量积累,进而促进细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴发生细胞凋亡,通过碱性磷酸酶试验和台盼蓝染色试验验证了去羟肌苷能够在体外有效地杀伤细粒棘球蚴和多房棘球蚴,故可以作为主要或辅助杀伤肝包虫的药物或药物组分,为研制替代阿苯达唑的抗肝包虫病药物提供参考。

    劳拉西泮在抑制包虫病中的应用

    公开(公告)号:CN115671113A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110824529.5

    申请日:2021-07-21

    IPC分类号: A61K31/5513 A61P33/10

    摘要: 本发明提供了劳拉西泮在抑制包虫病中的应用,劳拉西泮能够通过阻断细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴体内转位蛋白的功能,促进细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴发生细胞凋亡,通过碱性磷酸酶试验和台盼蓝染色试验验证了劳拉西泮能够在体外有效地杀伤细粒棘球蚴和多房棘球蚴,且杀伤效率强于阿苯达唑,故可以作为主要或辅助杀伤肝包虫的药物或药物组分,为研制替代阿苯达唑的抗肝包虫病药物提供参考。

    醋甲唑胺在抑制肝包虫病中的应用

    公开(公告)号:CN115671100A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110824535.0

    申请日:2021-07-21

    IPC分类号: A61K31/433 A61P33/10

    摘要: 本发明提供了醋甲唑胺在抑制肝包虫病中的应用,醋甲唑胺能够通过抑制细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴体内II型碳酸酐酶的作用,导致细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴无法从体内组织排除二氧化碳,进而导致虫体发生酸中毒并发生细胞坏死,通过碱性磷酸酶试验和台盼蓝染色试验验证了醋甲唑胺能够在体外有效地杀伤细粒棘球蚴和多房棘球蚴,且杀伤效率强于阿苯达唑,故可以作为主要或辅助杀伤肝包虫的药物或药物组分,为研制替代阿苯达唑的抗肝包虫病药物提供参考。

    一种ddPCR检测包虫病的扩增引物及其构建方法、应用

    公开(公告)号:CN113637774A

    公开(公告)日:2021-11-12

    申请号:CN202110962259.4

    申请日:2021-08-20

    摘要: ddPCR检测肝包虫病的引物构建方法、扩增引物及其应用,该方法包括以下步骤:筛选细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫的共同基因片段,基于共同基因片段设计多个第一引物;采用第一引物扩增第一病患组的血浆cfDNA样本,将能够扩增第一病患组的血浆cfDNA样本的第一引物作为第二引物;采用反应体系包括第二引物的ddPCR检测第二病患组的血浆cfDNA样本,筛选出阳性检出率大于预设值的第二引物作为目标扩增引物。本发明得到的扩增引物能够扩增释放进入外周血液中的以血浆游离DNA的形式存在的棘球绦虫的DNA片段,结合ddPCR方法能够通过检测人体血浆诊断是否感染包虫病,实现了细粒棘球绦虫与多房棘球绦虫的超早期诊断,为研发包虫病精准疗法提供了足够灵敏的检测工具。

    甲氧氟烷在制备抗肝包虫病的药物中的应用

    公开(公告)号:CN115671084B

    公开(公告)日:2023-09-15

    申请号:CN202110823866.2

    申请日:2021-07-21

    IPC分类号: A61K31/08 A61P33/10

    摘要: 本发明提供了甲氧氟烷在制备抗肝包虫病的药物中的应用,甲氧氟烷能够通过甲氧氟烷能够通过在细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴体内通过去氧甲基化生成氟化物和二氯乙酸,这两种甲氧氟烷的代谢产物可发挥协同作用,促进细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴发生细胞坏死,通过碱性磷酸酶试验和台盼蓝染色试验验证了甲氧氟烷能够在体外有效地杀伤细粒棘球蚴和多房棘球蚴,且杀伤效率明显强于阿苯达唑,故可以作为主要或辅助杀伤肝包虫的药物或药物组分,为研制替代阿苯达唑的抗肝包虫病药物提供参考。

    霉酚酸在抑制肝包虫病中的应用

    公开(公告)号:CN115671095A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110824550.5

    申请日:2021-07-21

    IPC分类号: A61K31/365 A61P33/10

    摘要: 本发明提供了一种霉酚酸在抑制肝包虫病中的应用,霉酚酸能够抑制细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴体内肌苷5'‑单磷酸脱氢酶的作用,阻断嘌呤核苷酸的合成,导致细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴发生细胞凋亡,通过碱性磷酸酶试验和台盼蓝染色试验验证了霉酚酸能够在体外有效地杀伤细粒棘球蚴和多房棘球蚴,故可以作为主要或辅助杀伤肝包虫的药物或药物组分,为研制替代阿苯达唑的抗肝包虫病药物提供参考。

    甲氧氟烷在制备抗肝包虫病的药物中的应用

    公开(公告)号:CN115671084A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110823866.2

    申请日:2021-07-21

    IPC分类号: A61K31/08 A61P33/10

    摘要: 本发明提供了甲氧氟烷在制备抗肝包虫病的药物中的应用,甲氧氟烷能够通过甲氧氟烷能够通过在细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴体内通过去氧甲基化生成氟化物和二氯乙酸,这两种甲氧氟烷的代谢产物可发挥协同作用,促进细粒棘球蚴和/或多房棘球蚴发生细胞坏死,通过碱性磷酸酶试验和台盼蓝染色试验验证了甲氧氟烷能够在体外有效地杀伤细粒棘球蚴和多房棘球蚴,且杀伤效率明显强于阿苯达唑,故可以作为主要或辅助杀伤肝包虫的药物或药物组分,为研制替代阿苯达唑的抗肝包虫病药物提供参考。