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公开(公告)号：CN114699066A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210349822.5
申请日：2022-04-02
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明提供一种检测生猪跛行的装置及其方法，包括步态采集步道，步态采集步道中间纵向的设有垂直的凸起；所述的步态采集步道最底部为玻璃板；玻璃板上留有空间，空间上方架设框架，框架上依次铺设压力印迹装置、柔性薄膜应力板、防滑防腐蚀轻薄橡胶垫；玻璃板下方设有两个相机；还包括数据采集处理系统和压力印迹归位装置、光电感应装置，将相机与柔性薄膜应力板连接数据采集处理系统，根据蹄形图像处理与薄膜应力板的压力信号，生猪以自然状态通过时候精准识别出生猪跛行姿态。本发明可以直观并全面地获取猪的蹄部印迹及压力数据，同时在数据处理系统中，对印迹图片进行图像识别，结合压力数据对生猪跛行的姿态和部位进行精准分析。
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公开(公告)号：CN106092862A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610398881.6
申请日：2016-06-06
Applicant: 四川农业大学
IPC: G01N15/10
CPC classification number: G01N15/10 , G01N2015/1006
Abstract: 本发明公开了一种评估动物前体脂肪细胞分化程度的检测方法，包括脂肪细胞诱导分化后用hoechst33258工作液对细胞核染色，测定吸光度值；胞核染色后用PBS清洗，用尼罗红工作液对胞内脂滴进行染色，测定吸光度值；定义一个新的用于评估脂肪细胞平均分化程度的数值：校正尼罗红OD值＝尼罗红OD值/hoechst33258的OD值，用于反应单位细胞分化程度；在荧光显微镜下对胞核和脂滴进行观察、拍照，并用Image‑Pro Plus软件merge胞核和脂滴图片，用于评估脂肪细胞分化程度。本发明使用细胞总数对尼罗红OD值进行校正，消除由于细胞数目不同或细胞不均带来的误差；操作方法简单、准确度高、杂质少。
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公开(公告)号：CN116356040A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310192092.7
申请日：2023-03-02
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种评价公猪精液精子活性的分子标记及应用，属于家畜分子标记制备技术领域。其分子标记为ssc‑miR‑26a‑5p，所述ssc‑miR‑26a‑5p的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明发现ssc‑miR‑26a‑5p与猪PTEN基因存在潜在结合位点，利用双荧光素酶报告系统和精液精子细胞转染试验验证了ssc‑miR‑26a‑5p与猪PTEN基因的靶标关系。ssc‑miR‑26a‑5p可作为评价公猪精液精子活性的分子标记，对猪育种改良有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN107236822A
公开(公告)日：2017-10-10
申请号：CN201710675766.3
申请日：2017-08-09
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2563/107 , C12Q2545/101 , C12Q2525/207
Abstract: 本发明提供了一种将miRNA转染进猪精子并评估其转染效率的方法，主要步骤为：将稀释后的新鲜猪精液45度立于CO2培养箱中孵育1小时；用巴氏吸管吸出适量上层精子悬浮液；离心浓缩精子后加入等体积稀释液进行稀释；通过X‑tremeGENE siRNA Transfection转染试剂将miRNA转染进精子，将其放置在17℃保温箱上，转染6小时；通过离心沉淀精子，并使用Trizol LS抽提精子中的Total RNA；对抽提出的Total RNA进行miRNA反转以及相关miRNA的定量。该发明有利于日后进行精子转染miRNA的研究实验。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN114699066B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202210349822.5
申请日：2022-04-02
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明提供一种检测生猪跛行的装置及其方法，包括步态采集步道，步态采集步道中间纵向的设有垂直的凸起；所述的步态采集步道最底部为玻璃板；玻璃板上留有空间，空间上方架设框架，框架上依次铺设压力印迹装置、柔性薄膜应力板、防滑防腐蚀轻薄橡胶垫；玻璃板下方设有两个相机；还包括数据采集处理系统和压力印迹归位装置、光电感应装置，将相机与柔性薄膜应力板连接数据采集处理系统，根据蹄形图像处理与薄膜应力板的压力信号，生猪以自然状态通过时候精准识别出生猪跛行姿态。本发明可以直观并全面地获取猪的蹄部印迹及压力数据，同时在数据处理系统中，对印迹图片进行图像识别，结合压力数据对生猪跛行的姿态和部位进行精准分析。
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公开(公告)号：CN106544317B
公开(公告)日：2021-02-23
申请号：CN201610975313.8
申请日：2016-11-07
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N5/076
Abstract: 本发明提供一种从猪精液中分离纯化精子细胞和外泌体的方法，步骤为：采集公猪精液按比例稀释，经过滤后离心分离沉淀和上清液；沉淀用体细胞裂解液裂解后再经离心沉降精子细胞得到精子细胞沉淀；上清液离心后保留上清，连续过滤除掉其中的细胞碎片，再通过超高速离心沉淀exosome，加入PBS溶液悬浮exosome。抽提精子细胞和exosome悬浮液中的总RNA，反转录mRNA和miRNA，并通过定量标记mRNA和miRNA对细胞和exosome纯度进行检测。本发明方法可提高猪精液精子细胞和exosome的分离准确率，并有效保证分离后的精子细胞和exosome的纯度，操作方法简单易行、杂质少。
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公开(公告)号：CN105779586B
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201511000193.1
申请日：2015-12-28
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明提供了一种从动物血浆中分离外泌体并进行纯度检测的方法，主要步骤为：首先用PBS溶液以1:1的比例稀释血浆；通过离心去除血浆中的细胞成分和细胞碎片；通过超高速离心沉淀外泌体；使用250μl PBS溶液悬浮外泌体；使用Trizol LS抽提外泌体悬浮液中的总RNA；对抽提出的总RNA进行poly(A)反转和相关基因的定量，并对纯度进行检测。该发明有利于日后对血浆外泌体内容物和外泌体相关功能的研究。
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公开(公告)号：CN106544317A
公开(公告)日：2017-03-29
申请号：CN201610975313.8
申请日：2016-11-07
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N5/076
CPC classification number: C12N5/061 , C12N2509/00
Abstract: 本发明提供一种从猪精液中分离纯化精子细胞和外泌体的方法，步骤为：采集公猪精液按比例稀释，经过滤后离心分离沉淀和上清液；沉淀用体细胞裂解液裂解后再经离心沉降精子细胞得到精子细胞沉淀；上清液离心后保留上清，连续过滤除掉其中的细胞碎片，再通过超高速离心沉淀exosome，加入PBS溶液悬浮exosome。抽提精子细胞和exosome悬浮液中的总RNA，反转录mRNA和miRNA，并通过定量标记mRNA和miRNA对细胞和exosome纯度进行检测。本发明方法可提高猪精液精子细胞和exosome的分离准确率，并有效保证分离后的精子细胞和exosome的纯度，操作方法简单易行、杂质少。
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