公开(公告)号：CN105085605A

公开(公告)日：2015-11-25

申请号：CN201510582527.4

申请日：2015-09-14

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 杨林 ,  刘烨 ,  李慧 ,  王正旋 ,  梁明才

IPC: C07K1/14

Abstract: 一种大米清蛋白和球蛋白混合蛋白的提取方法，涉及一种清蛋白和球蛋白混合蛋白的提取方法。是要解决现有大米中清蛋白或球蛋白较难分离提取的问题。方法：一、将大米研磨成米粉；二、将米粉用正己烷脱脂3～5次，得到脱脂米粉；三、将脱脂米粉用盐溶法得到蛋白提取液；四、对蛋白提取液用三氯乙酸溶液将蛋白沉淀；五、将沉淀真空冷冻干燥，即得大米清蛋白和球蛋白的混合蛋白。该方法可以简单、快速、高效提取大米清球混合蛋白，适于工业化生产应用，所提取的大米清球蛋白提取率高达97％以上，大米清球混合蛋白纯度可达90％以上。用于大米蛋白提取领域。

公开(公告)号：CN105285314A

公开(公告)日：2016-02-03

申请号：CN201510582411.0

申请日：2015-09-14

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 杨林 ,  王正旋 ,  刘烨 ,  李慧 ,  梁明才

IPC: A23J3/14

Abstract: 一种13KDa大米醇溶蛋白的提取方法，涉及一种大米醇溶蛋白的提取方法。本发明是要解决现有醇溶蛋白的提取方法提取率较低，纯度较低，无法大规模工业化生产的问题。方法：一、将大米用粉碎机研磨成米粉；二、将米粉用正己烷脱脂，得脱脂米粉；三、将脱脂米粉用洗脱液浸提，再将沉淀用纯水清洗；四、将步骤三清洗后的沉淀用浓度为60％的正丙醇溶液浸提，取上清；五、将上清用三氯乙酸溶液将蛋白沉淀；六、将步骤五的沉淀真空冷冻干燥，即得到13KDa大米醇溶蛋白。本发明方法提取的大米醇溶蛋白纯度可达90％～94％，适于大规模工业化提取大米醇溶蛋白。

公开(公告)号：CN105085605B

公开(公告)日：2018-09-07

申请号：CN201510582527.4

申请日：2015-09-14

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 杨林 ,  李慧 ,  王正旋 ,  梁明才 ,  刘烨

IPC: C07K1/14

Abstract: 一种大米清蛋白和球蛋白混合蛋白的提取方法，涉及一种清蛋白和球蛋白混合蛋白的提取方法。是要解决现有大米中清蛋白或球蛋白较难分离提取的问题。方法：一、将大米研磨成米粉；二、将米粉用正己烷脱脂3～5次，得到脱脂米粉；三、将脱脂米粉用盐溶法得到蛋白提取液；四、对蛋白提取液用三氯乙酸溶液将蛋白沉淀；五、将沉淀真空冷冻干燥，即得大米清蛋白和球蛋白的混合蛋白。该方法可以简单、快速、高效提取大米清球混合蛋白，适于工业化生产应用，所提取的大米清球蛋白提取率高达97％以上，大米清球混合蛋白纯度可达90％以上。用于大米蛋白提取领域。

公开(公告)号：CN105076667A

公开(公告)日：2015-11-25

申请号：CN201510582528.9

申请日：2015-09-14

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 杨林 ,  李慧 ,  王正旋 ,  刘烨 ,  梁明才

IPC: A23J1/12

Abstract: 一种高纯度大米谷蛋白的提取方法，涉及一种大米谷蛋白的提取方法。本发明是要解决现有用稀碱提取谷蛋白的方法导致蛋白质的变性和水解，美拉德反应加剧，产生黑褐色物质的问题。方法：一、将大米研磨成米粉；二、将米粉用正己烷脱脂，得到脱脂米粉；三、将脱脂米粉去除清蛋白、球蛋白和醇溶蛋白，得到沉淀；四、对步骤三得到的沉淀用乳酸浸提谷蛋白；五、合并每次浸提收集的上清液，用TCA溶液将上清液进行蛋白沉淀；六、用PBS缓冲液清洗沉淀，将清洗后的沉淀真空冷冻干燥，即得到大米谷蛋白。本发明方法所提取的谷蛋白纯度可高达93.67％～96.71％，可广泛应用于工业化大批量提取大米谷蛋白。

公开(公告)号：CN105044191A

公开(公告)日：2015-11-11

申请号：CN201510443579.3

申请日：2015-07-24

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 杨林 ,  刘烨 ,  蔡继翔 ,  梁明才 ,  李慧 ,  王正旋

IPC: G01N27/447 ,  G01N21/84

Abstract: 一种鱼类肌肉组织细胞基因损伤检测的彗星实验方法，它属于环境对鱼体遗传毒理学评价领域。方法：一、制备鱼肌肉组织的细胞悬液；二、彗星实验采用双层凝胶结构，进行裂解；三、裂解后冲洗，放入电泳缓冲液中电泳；四、电泳结束后载玻片经冲洗、晾干后移去盖玻片，染色后清洗，盖上盖玻片，用荧光显微镜观察彗星图像，然后计算细胞受损率或分析图像，再分析结果，即完成。本发明优点在于具有高灵敏性，无需放射性示踪，并且这种技术只需要少量细胞，操作简单、直观、检测快速和具有良好经济性，相比试剂盒更为廉价；还为鱼体遗传毒性进行定性、定量化评价提供支持，了解其江河水产质量、水质情况及其鱼体遗传毒理现状。

公开(公告)号：CN105076667B

公开(公告)日：2019-04-30

申请号：CN201510582528.9

申请日：2015-09-14

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 杨林 ,  王正旋 ,  梁明才 ,  李慧 ,  刘烨

IPC: A23J1/12

Abstract: 一种高纯度大米谷蛋白的提取方法，涉及一种大米谷蛋白的提取方法。本发明是要解决现有用稀碱提取谷蛋白的方法导致蛋白质的变性和水解，美拉德反应加剧，产生黑褐色物质的问题。方法：一、将大米研磨成米粉；二、将米粉用正己烷脱脂，得到脱脂米粉；三、将脱脂米粉去除清蛋白、球蛋白和醇溶蛋白，得到沉淀；四、对步骤三得到的沉淀用乳酸浸提谷蛋白；五、合并每次浸提收集的上清液，用TCA溶液将上清液进行蛋白沉淀；六、用PBS缓冲液清洗沉淀，将清洗后的沉淀真空冷冻干燥，即得到大米谷蛋白。本发明方法所提取的谷蛋白纯度可高达93.67％～96.71％，可广泛应用于工业化大批量提取大米谷蛋白。