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公开(公告)号:CN105063232B
公开(公告)日:2019-04-05
申请号:CN201510593430.3
申请日:2015-09-17
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种牛乳脂代谢相关基因C4BPA定量PCR检测方法,其方法为:第一步、设计特异性的定量引物;第二步、乳腺组织RNA的提取;第三步、将乳腺组织RNA反转录为cDNA;第四步、进行荧光定量PCR反应。有益效果:提供了一种简单、快速、低成本、精确度高、便于在基因组水平上筛查和检测C4BPA基因与奶牛乳脂代谢的相关性的定量PCR方法。为进一步研究该基因及探讨可能影响奶牛乳脂的基因提供了依据及可靠的研究方法。本发明筛查获得C4BPA基因与奶牛乳脂代谢相关,可用于奶牛的育种工作,以便满足不同人群对牛奶中乳脂含量的要求。
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公开(公告)号:CN104745716A
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201510195275.X
申请日:2015-04-23
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q2600/124 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种牛AGPAT6基因单核苷酸多态性的检测方法,其方法为:第一步、用牛的全血进行全基因组DNA提取;第二步、以提取的全基因组DNA为模板,分别以引物对A、B为引物,PCR扩增牛AGPAT6基因;第三步、用PCR混合产物测序,找出SNP位点;第四步、用限制性内切酶对PCR产物进行酶切;第五步、将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,然后根据电泳条带判定其多态性。有益效果:本发明利用PCR-RFLP技术对牛AGPAT6基因第1外显子的303bp处的T>C单核苷酸多态性和第12外显子的299bp处的G>A单核苷酸多态性进行检测。提供了一种低成本、简单、精准、便于推广应用的在DNA水平上筛查和检测与牛肉质性状和胴体性状密切相关的遗传标记,可用于牛的辅助选择和分子育种。
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公开(公告)号:CN105567863B
公开(公告)日:2018-10-23
申请号:CN201610152992.9
申请日:2016-03-17
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明公开了一种利用PRSS2基因作为乳蛋白含量分子标记的检测方法,具体为:第一步;采取牛的血液进行全基因组DNA的提取,利用琼脂糖凝胶电泳的方法,检查DNA的质量;第二步:以全基因组DNA为模板,以引物A为引物进行PCR扩增牛PRSS2基因片段;第三步:用全基因组DNA进行混池PCR,找到多态性的位点,第四步:对单个样品进行测序,根据测序结果进行多态性关联分析;有益效果:发现了5个SNP位点与牛的乳品质中乳蛋白性状的相关性。提供了一种简单,快速的在DNA水平上筛查和检测与牛乳品质性状密切相关的遗传标记,可应用于牛的分子育种。解决了SSCP、PCR—PFLP技术的繁琐性,提高了准确性和精确度。
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公开(公告)号:CN104611349B
公开(公告)日:2017-10-03
申请号:CN201410678775.4
申请日:2014-11-24
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明公开了一种影响中国西门塔尔牛脂肪沉积的FDFT1基因关键位点,涉及中国西门塔尔牛脂肪沉积性状相关FDFT1基因单核苷酸多态性的检测方法,该方法以中国西门塔尔牛基因组DNA或包含中国西门塔尔牛FDFT1基因的DNA序列为模板,利用PCR引物对P1和P2,扩增中国西门塔尔牛FDFT1基因功能区域片段,通过测序筛查,限制性内切酶Hae‑III和Hpa‑II进行酶切、电泳分析,从而确定中国西门塔尔牛FDFT1基因第4内含子第130位的SNP1(T>C)和第8外显子第500位的SNP2(C>T)。筛查获得的SNPs中SNP1位点的T等位基因和TT基因型及SNP2位点的C等位基因和CC基因型可作为显著提高中国西门塔尔牛脂肪沉积和肌间脂肪酸含量性状的有效分子遗传标记,以用于肉牛肉质性状早期标记辅助选择分子育种。
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公开(公告)号:CN105567863A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201610152992.9
申请日:2016-03-17
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q2600/124 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种利用PRSS2基因作为乳蛋白含量分子标记的检测方法,具体为:第一步;采取牛的血液进行全基因组DNA的提取,利用琼脂糖凝胶电泳的方法,检查DNA的质量;第二步:以全基因组DNA为模板,以引物A为引物进行PCR扩增牛PRSS2基因片段;第三步:用全基因组DNA进行混池PCR,找到多态性的位点,第四步:对单个样品进行测序,根据测序结果进行多态性关联分析;有益效果:发现了5个SNP位点与牛的乳品质中乳蛋白性状的相关性。提供了一种简单,快速的在DNA水平上筛查和检测与牛乳品质性状密切相关的遗传标记,可应用于牛的分子育种。解决了SSCP、PCR—PFLP技术的繁琐性,提高了准确性和精确度。
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公开(公告)号:CN105063232A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510593430.3
申请日:2015-09-17
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2527/107
Abstract: 本发明公开了一种牛乳脂代谢相关基因C4BPA定量PCR检测方法,其方法为:第一步、设计特异性的定量引物;第二步、乳腺组织RNA的提取;第三步、将乳腺组织RNA反转录为cDNA;第四步、进行荧光定量PCR反应。有益效果:提供了一种简单、快速、低成本、精确度高、便于在基因组水平上筛查和检测C4BPA基因与奶牛乳脂代谢的相关性的定量PCR方法。为进一步研究该基因及探讨可能影响奶牛乳脂的基因提供了依据及可靠的研究方法。本发明筛查获得C4BPA基因与奶牛乳脂代谢相关,可用于奶牛的育种工作,以便满足不同人群对牛奶中乳脂含量的要求。
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公开(公告)号:CN104611349A
公开(公告)日:2015-05-13
申请号:CN201410678775.4
申请日:2014-11-24
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明公开了一种影响中国西门塔尔牛脂肪沉积的FDFT1基因关键位点,涉及中国西门塔尔牛脂肪沉积性状相关FDFT1基因单核苷酸多态性的检测方法,该方法以中国西门塔尔牛基因组DNA或包含中国西门塔尔牛FDFT1基因的DNA序列为模板,利用PCR引物对P1和P2,扩增中国西门塔尔牛FDFT1基因功能区域片段,通过测序筛查,限制性内切酶Hae-III和Hpa-II进行酶切、电泳分析,从而确定中国西门塔尔牛FDFT1基因第4内含子第130位的SNP1(T>C)和第8外显子第500位的SNP2(C>T)。筛查获得的SNPs中SNP1位点的T等位基因和TT基因型及SNP2位点的C等位基因和CC基因型可作为显著提高中国西门塔尔牛脂肪沉积和肌间脂肪酸含量性状的有效分子遗传标记,以用于肉牛肉质性状早期标记辅助选择分子育种。
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公开(公告)号:CN104745716B
公开(公告)日:2017-03-01
申请号:CN201510195275.X
申请日:2015-04-23
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种牛AGPAT6基因单核苷酸多态性的检测方法,其方法为:第一步、用牛的全血进行全基因组DNA提取;第二步、以提取的全基因组DNA为模板,分别以引物对A、B为引物,PCR扩增牛AGPAT6基因;第三步、用PCR混合产物测序,找出SNP位点;第四步、用限制性内切酶对PCR产物进行酶切;第五步、将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳,然后根据电泳条带判定其多态性。有益效果:本发明利用PCR-RFLP技术对牛AGPAT6基因第1外显子的303bp处的T>C单核苷酸多态性和第12外显子的299bp处的G>A单核苷酸多态性进行检测。提供了一种低成本、简单、精准、便于推广应用的在DNA水平上筛查和检测与牛肉质性状和胴体性状密切相关的遗传标记,可用于牛的辅助选择和分子育种。
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