公开(公告)号：CN116926021A

公开(公告)日：2023-10-24

申请号：CN202310837922.7

申请日：2023-07-10

Applicant: 吉林大学

Inventor： 高巍 ,  袁宝 ,  任文陟 ,  陈健 ,  杜崇涛 ,  高飞 ,  马一然 ,  罗婷婷 ,  尚熙龙 ,  胡进平 ,  张金玉

IPC: C12N7/04 ,  C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/35 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种猫泛白细胞减少症病毒假病毒的构建方法，先提取猫泛白细胞减少症病毒ATCCVR‑648株病毒DNA，进行PCR扩增获得VP2基因，将其连接到pDONR221载体，得到中间载体pDown‑{FPV‑VP2}，将其与携带启动子的pUp‑EF1A载体、骨架载体pLV.Des2d.C/EGFP:T2A:Puro重组，得到重组表达质粒，将其进行慢病毒包装，即得。与现有技术相比，本发明构建的猫泛白细胞减少症病毒假病毒无复制活性、生物安全性高、稳定性好，在猫泛白细胞减少症病毒核酸检测时可用作阳性对照标准品和内控标准品，可应用于猫泛白细胞减少症病毒的研究、抗病毒制剂的筛选和疫苗的研发。

公开(公告)号：CN116790666A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310749595.X

申请日：2023-06-25

Applicant: 吉林大学

Inventor： 高巍 ,  任文陟 ,  袁宝 ,  陈健 ,  权福实 ,  杜崇涛 ,  马一然 ,  罗婷婷

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/40 ,  C12N7/04 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种猫杯状病毒假病毒的制备方法，先通过PCR扩增获得gp2基因，然后采用BP反应构建得到含有gp2基因序列的入门克隆载体pDown‑{FCV‑gp2}，接着采用LR反应将携带启动子的pUp‑EF1A载体、pDown‑{FCV‑gp2}以及pLV.Des2d.C/EGFP:T2A:Puro重组，得到重组表达载体pLV[Exp]‑EGFP:T2A:Puro‑EF1A>{FCV‑gp2}，将其和慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞，即得。该方法制备得到的猫杯状病毒假病毒无复制活性,生物安全性高,能够为猫杯状病毒的研究、抗病毒制剂和疫苗评价提供强有力的筛选工具,具备广泛的应用价值。