公开(公告)号：CN114657154B

公开(公告)日：2024-01-12

申请号：CN202011528341.8

申请日：2020-12-22

Applicant: 吉林大学

Inventor： 赵魁 ,  周艳龙 ,  关继羽 ,  吕品 ,  高丰 ,  贺文琦 ,  宋德光 ,  兰云刚 ,  李姿 ,  田静

IPC: C12N7/04 ,  C12N15/63 ,  A61K39/275 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法，通过将目标基因突变的方式制备，所述目标基因为羊传染性脓疱病毒ORF120基因。所述缺失ORF120基因的羊传染性脓疱病毒是采用基因工程手段，利用同源重组的方法从ORFV‑SY17分离株全基因组中敲除ORF120基因，以此达到毒力减弱的目的，并以绿色荧光蛋白EGFP作为标记蛋白代替缺失的基因，命名为ORFV‑SY17Δ120减毒株。在此基础上，拯救出其互补株ORFV‑SY17‑Rv120，并以红色荧光蛋白RFP作为筛选标识。经过本源动物羔羊动物接种实验表明，本发明所述的ORF120单基因缺失羊传染性脓疱病毒减毒株具有良好的使用安全性，为羊传染性脓疱病毒减毒活疫苗的开发以及ORF120基因功能的探究提供技术支持。

公开(公告)号：CN114657154A

公开(公告)日：2022-06-24

申请号：CN202011528341.8

申请日：2020-12-22

Applicant: 吉林大学

Inventor： 赵魁 ,  周艳龙 ,  关继羽 ,  吕品 ,  高丰 ,  贺文琦 ,  宋德光 ,  兰云刚 ,  李姿 ,  田静

IPC: C12N7/04 ,  C12N15/63 ,  A61K39/275 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法，通过将目标基因突变的方式制备，所述目标基因为羊传染性脓疱病毒ORF120基因。所述缺失ORF120基因的羊传染性脓疱病毒是采用基因工程手段，利用同源重组的方法从ORFV‑SY17分离株全基因组中敲除ORF120基因，以此达到毒力减弱的目的，并以绿色荧光蛋白EGFP作为标记蛋白代替缺失的基因，命名为ORFV‑SY17Δ120减毒株。在此基础上，拯救出其互补株ORFV‑SY17‑Rv120，并以红色荧光蛋白RFP作为筛选标识。经过本源动物羔羊动物接种实验表明，本发明所述的ORF120单基因缺失羊传染性脓疱病毒减毒株具有良好的使用安全性，为羊传染性脓疱病毒减毒活疫苗的开发以及ORF120基因功能的探究提供技术支持。

公开(公告)号：CN114350623A

公开(公告)日：2022-04-15

申请号：CN202210037761.9

申请日：2022-01-13

Applicant: 吉林大学

Inventor： 赵魁 ,  王帅 ,  何师师 ,  方梓煜 ,  周艳龙 ,  关继羽 ,  陆慧君 ,  吕品 ,  徐梦实 ,  贺文琦 ,  高丰

IPC: C12N7/04 ,  C12N15/39 ,  C12N15/85 ,  A61K39/275 ,  A61P31/20 ,  C12Q1/70 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法，将羊传染性脓疱病毒毒力基因突变失活，所述毒力基因突变为ORFs 120/121双基因突变。缺失ORFs 120/121基因后ORFV的致病性显著降低。本发明通过敲除ORFV‑SY17毒株ORFs 120/121基因获得双基因缺失的羊传染性脓疱病毒减毒株，具备作为制备羊传染性脓疱病基因缺失减毒活疫苗生产毒株的潜在应用价值。缺失的ORFs 120/121基因也可作为标志基因，建立用于ORFV疫苗毒和野毒检测的鉴别诊断方法。