公开(公告)号：CN104593402A

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201510030041.X

申请日：2015-01-21

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 孙旸 ,  陈光 ,  孙春玉 ,  迟惠 ,  王刚 ,  陈欢 ,  王聪 ,  孙宁宁 ,  张斯童

IPC: C12N15/70 ,  C07K7/08 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种运用大肠杆菌作为生物反应器生产重组的抗肿瘤19肽的方法，将人工合成肿瘤抑素中185－203位氨基酸(19肽)所对应的核苷酸序列连接至融合蛋白表达载体上；经过进一步酶切和测序鉴定后，转化到大肠杆菌中进行诱导表达得到融合蛋白；表达的融合蛋白经几丁质亲和层析、二硫苏糖醇(DTT)的柱内还原，可以直接获得抗肿瘤19肽。本发明提供的一种运用大肠杆菌作为生物反应器生产重组的抗肿瘤19肽的方法，生产重组的抗肿瘤19肽产量大，效率高，成本低，生产过程稳定。

公开(公告)号：CN104558100A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201510056591.9

申请日：2015-02-04

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 孙旸 ,  陈光 ,  孙春玉 ,  迟惠 ,  王刚 ,  陈欢 ,  王聪 ,  孙宁宁 ,  张斯童

IPC: C07K1/14

Abstract: 本发明涉及一种包涵体的预处理方法，其包括一个细胞破碎的步骤、一个包涵体的洗涤步骤、一个包涵体的溶解步骤。将经过离心收集的细胞培养物在高压氮气的作用下采用超声波破碎，再加入絮凝剂澄清，弃去上清液得到富集包涵体的沉淀，再将得到的富集包涵体的沉淀采用由变性剂、除垢剂、电解质组成的缓冲剂经过3－10次浆化－微孔过滤得到洗涤后的包涵体，将洗涤后的包涵体采用由质量分数0.01－0.2％PMSF、3－6mol/l尿素和1－3mol/l盐酸胍配制的强变性剂进行溶解，溶解完毕后经过澄清，将上清液倒去即可得到纯净的包涵体。本发明提供的一种包涵体的预处理方法，预处理时间短，工艺简单，试剂消耗少，成本低且蛋白质的活性不易受损。

公开(公告)号：CN118166012A

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202410421640.3

申请日：2024-04-09

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 孙春玉 ,  石雨婷 ,  刘宁 ,  季彦伟 ,  李竹 ,  迟惠 ,  孙旸

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C07K14/47 ,  A61K38/17 ,  A61P35/00 ,  C12R1/19

Abstract: 一种抗肿瘤19肽的制备方法，是先制备电转感受态大肠杆菌，通过电转法转化大肠杆菌将重组质粒pCanTaB‑5E‑19肽用电转化方法转化到感受态大肠杆菌中制成重组菌，经诱导表达得到周质蛋白溶液，最后进行纯化处理得抗肿瘤19肽。本发明中通过重组质粒pCanTaB‑5E‑19肽转化到感受态大肠杆菌HB2151中，形成重组菌pCanTaB‑5E‑19肽‑HB2151，经诱导表达、纯化后得的抗肿瘤19肽，具有可以抑制HCT‑15细胞的增殖的优异效果，此外，还能诱导肠癌类器官凋亡，抑制肠癌类器官增殖的作用，进一步为pCanTaB‑5E‑19肽‑HB2151的应用提供了更大的空间。