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公开(公告)号：CN110004149A
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201910308366.8
申请日：2019-04-17
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/68 , G01N33/574 , A61K47/26 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种程序性死亡受体-配体1(PD-L1)的核酸适体及其应用，涉及一种核酸。提供能够高特异性识别、高亲和力结合PD-L1的核酸适体。所述核酸适体可通过基于琼脂糖微珠分离-流式细胞术分析的蛋白SELEX方法筛选制备。所述核酸适体具有富含G碱基、具有茎环结构、易合成和标记、成本低、稳定性好、非免疫原性等特点，并且利用该核酸适体实现了PD-L1蛋白、表达PD-L1蛋白的肿瘤细胞系及肿瘤细胞系分泌的表达PD-L1蛋白外泌体的特异性识别，验证了其在生化分析检测领域中的应用，并有望作为检测PD-L1表达水平的分子识别工具，而应用于临床医学肿瘤免疫研究领域PD-1/PD-L1抑制剂疗效的精准预测和动态监测。
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公开(公告)号：CN110004147A
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201910164327.5
申请日：2019-03-05
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种在人血浆中筛选的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法和应用，提供在人血浆复杂生理环境中能够高特异性识别、高亲和力结合上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体，发展了以人血浆模拟复杂生理环境的核酸适体筛选方法，可获得直接应用于外周血中捕获CTCs的核酸适体；最终获得的核酸适体具有易获得、成本低、不易失活、非免疫原性和无毒性等特点，并且利用该些序列实现了EpCAM蛋白、表达EpCAM蛋白的肿瘤细胞系的特异性识别及CTCs的捕获；另外，该些核酸适体在人血浆中具有高亲和力，确保其在生物分析和临床医学中的应用，并有望作为CTCs检测的分子识别工具而应用于液体活检。
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公开(公告)号：CN113122543B
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202110358738.5
申请日：2021-04-01
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/574
Abstract: 本发明公开了一种唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素‑15(Sialic acid‑bindingimmunoglobulin‑like lectin‑15，Siglec‑15)蛋白的核酸适配体，所述的核酸适配体包括如SEQ IDNO：1至SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列。本发明的核酸适配体能够提供Siglec‑15蛋白的快速、精准检测，同时适配体能够阻断其与T细胞表面受体相互作用，一定程度上恢复T细胞增殖活性，从而使得肿瘤微环境的免疫正常化，且不会引起严重的自身免疫反应。Siglec‑15核酸适配体可作为药物用于肿瘤微环境高表达Siglec‑15的癌症，成为肿瘤免疫治疗的潜在核酸药物，可能对抗PD‑L1治疗无效的患者有效，进而补充现有肿瘤诊断和免疫治疗体系。
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公开(公告)号：CN113252616A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110127881.3
申请日：2021-01-29
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种外泌体的糖基化研究方法，包括如下步骤：1)将分泌外泌体的细胞与非天然单糖共培养，细胞泌出含有非天然单糖的外泌体；2)将功能性探针标记到非天然糖上,所述的功能性探针具有第一标记；3)检测第一标记，获取外泌体信息。本发明方法操作简单，无需复杂的样品前处理；且无需裂解外泌体。
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公开(公告)号：CN110004149B
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN201910308366.8
申请日：2019-04-17
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/68 , G01N33/574 , A61K47/26 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种程序性死亡受体‑配体1(PD‑L1)的核酸适体及其应用，涉及一种核酸。提供能够高特异性识别、高亲和力结合PD‑L1的核酸适体。所述核酸适体可通过基于琼脂糖微珠分离‑流式细胞术分析的蛋白SELEX方法筛选制备。所述核酸适体具有富含G碱基、具有茎环结构、易合成和标记、成本低、稳定性好、非免疫原性等特点，并且利用该核酸适体实现了PD‑L1蛋白、表达PD‑L1蛋白的肿瘤细胞系及肿瘤细胞系分泌的表达PD‑L1蛋白外泌体的特异性识别，验证了其在生化分析检测领域中的应用，并有望作为检测PD‑L1表达水平的分子识别工具，而应用于临床医学肿瘤免疫研究领域PD‑1/PD‑L1抑制剂疗效的精准预测和动态监测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113252616B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN202110127881.3
申请日：2021-01-29
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种外泌体的糖基化研究方法，包括如下步骤：1)将分泌外泌体的细胞与非天然单糖共培养，细胞泌出含有非天然单糖的外泌体；2)将功能性探针标记到非天然糖上,所述的功能性探针具有第一标记；3)检测第一标记，获取外泌体信息。本发明方法操作简单，无需复杂的样品前处理；且无需裂解外泌体。
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公开(公告)号：CN110004147B
公开(公告)日：2021-01-08
申请号：CN201910164327.5
申请日：2019-03-05
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种在人血浆中筛选的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法和应用，提供在人血浆复杂生理环境中能够高特异性识别、高亲和力结合上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体，发展了以人血浆模拟复杂生理环境的核酸适体筛选方法，可获得直接应用于外周血中捕获CTCs的核酸适体；最终获得的核酸适体具有易获得、成本低、不易失活、非免疫原性和无毒性等特点，并且利用该些序列实现了EpCAM蛋白、表达EpCAM蛋白的肿瘤细胞系的特异性识别及CTCs的捕获；另外，该些核酸适体在人血浆中具有高亲和力，确保其在生物分析和临床医学中的应用，并有望作为CTCs检测的分子识别工具而应用于液体活检。
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公开(公告)号：CN113122543A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202110358738.5
申请日：2021-04-01
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/574
Abstract: 本发明公开了一种唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素‑15(Sialic acid‑bindingimmunoglobulin‑like lectin‑15，Siglec‑15)蛋白的核酸适配体，所述的核酸适配体包括如SEQ IDNO：1至SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列。本发明的核酸适配体能够提供Siglec‑15蛋白的快速、精准检测，同时适配体能够阻断其与T细胞表面受体相互作用，一定程度上恢复T细胞增殖活性，从而使得肿瘤微环境的免疫正常化，且不会引起严重的自身免疫反应。Siglec‑15核酸适配体可作为药物用于肿瘤微环境高表达Siglec‑15的癌症，成为肿瘤免疫治疗的潜在核酸药物，可能对抗PD‑L1治疗无效的患者有效，进而补充现有肿瘤诊断和免疫治疗体系。
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公开(公告)号：CN110108885B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201910308759.9
申请日：2019-04-17
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115
Abstract: 本发明公开了一种程序性死亡受体‑配体1(PD‑L1)的核酸适体检测细胞外囊泡表面PD‑L1蛋白的方法，包括如下步骤：1)配制恒定浓度的PD‑L1核酸适体与不同浓度的细胞外囊泡样品混合物；2)将样品混合物放置到微量热泳动(Microscale Thermophoresis，MST)装置进行测量；3)测量每个不同细胞外囊泡浓度的样品混合物的荧光，并且将得到的归一化荧光相对于时间作图，拟合MST轨迹线，再根据MST轨迹线的归一化荧光相对于细胞外囊泡的浓度作图，拟合细胞外囊泡浓度与归一化荧光相关的结合曲线，从而实现对细胞外囊泡表面PD‑L1蛋白的检测。与现有技术相比，本发明的方法灵敏度高，操作简便，检测快速高效、样品消耗少量，价格经济实惠，具有广泛推广的潜力。
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公开(公告)号：CN110108885A
公开(公告)日：2019-08-09
申请号：CN201910308759.9
申请日：2019-04-17
Applicant: 厦门大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/532 , G01N33/533
Abstract: 本发明公开了一种程序性死亡受体-配体1(PD-L1)的核酸适体检测细胞外囊泡表面PD-L1蛋白的方法，包括如下步骤：1)配制恒定浓度的PD-L1核酸适体与不同浓度的细胞外囊泡样品混合物；2)将样品混合物放置到微量热泳动(Microscale Thermophoresis，MST)装置进行测量；3)测量每个不同细胞外囊泡浓度的样品混合物的荧光，并且将得到的归一化荧光相对于时间作图，拟合MST轨迹线，再根据MST轨迹线的归一化荧光相对于细胞外囊泡的浓度作图，拟合细胞外囊泡浓度与归一化荧光相关的结合曲线，从而实现对细胞外囊泡表面PD-L1蛋白的检测。与现有技术相比，本发明的方法灵敏度高，操作简便，检测快速高效、样品消耗少量，价格经济实惠，具有广泛推广的潜力。
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