公开(公告)号：CN102577954B

公开(公告)日：2013-09-18

申请号：CN201210033642.2

申请日：2012-02-15

Applicant: 南京大学

Inventor： 杨柳燕 ,  杜宏伟 ,  武俊 ,  刘露 ,  肖琳 ,  吕志刚 ,  许超 ,  张全兴

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种宽叶香蒲根尖诱导愈伤组织并分化成苗的方法，将宽叶香蒲的种子干燥、消毒、发芽生根；对生根后的根尖诱导愈伤组织并分化成苗，具体方法为从生根后的苗根上获取2-3mm的根尖，转接到愈伤组织诱导培养基上无光条件下培养9周；将愈伤组织转接到愈伤组织分化培养基上，在25℃、连续光照的条件下分化培养4周；将分化培养后得到的苗转接到生根培养基上培养4周；将生根培养后的苗转移到含有花肥的小花盆中，将苗置于25℃的温室中生长，在第一周的时候苗的上方要覆盖一层塑料薄膜，防止水分的蒸发，3天浇水一次，培养40天后转移到更大的花盆中并保持3～5cm的水。

公开(公告)号：CN101870968A

公开(公告)日：2010-10-27

申请号：CN201010175228.6

申请日：2010-05-18

Applicant: 南京大学

Inventor： 武俊 ,  李丽观 ,  胥苏海 ,  杨柳燕 ,  杜宏伟 ,  蒋丽娟 ,  张琼 ,  王晓琳 ,  肖琳

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C02F3/00 ,  C02F103/34

Abstract: 本发明公开了一种三苯基甲烷类染料脱色酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还公开了表达上述三苯基甲烷类染料脱色酶的基因，其核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示，该基因来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida KT2440)的三苯基甲烷染料脱色酶基因。本发明还公开了上述三苯基甲烷类染料脱色酶的纯化方法，以及上述三苯基甲烷类染料脱色酶在去除三苯基甲烷类染料中的应用。本发明的三苯基甲烷类染料脱色酶对三苯基甲烷类染料具有高效的脱色活性，具有巨大的应用前景。

公开(公告)号：CN101816287B

公开(公告)日：2011-12-14

申请号：CN201010162983.0

申请日：2010-05-05

Applicant: 南京大学 ,  江苏九久环境科技有限公司

Inventor： 杨柳燕 ,  杜宏伟 ,  武俊 ,  肖琳 ,  李丽观 ,  陈洪龄 ,  许超 ,  华海峰 ,  张全兴

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种黄菖蒲愈伤组织的培养方法：当黄菖蒲种子胚芽上的愈伤组织直径超过0.5cm时，将其从种子胚芽上切除，接种到新鲜的固体继代培养基上，进行继代培养，此后每2周继代培养一次；取出一粒愈伤组织在无菌滤纸上用镊子夹成小块，放入新鲜的培养液中，在25℃、90转/分钟条件下培养2周，形成愈伤组织悬浮液，将愈伤组织悬浮液按1∶30(v/v)接种到新鲜的培养液中进行继代培养，继代培养周期为2周；当需要使用愈伤组织进行快速繁殖或者转基因时，使用50目孔径的无菌尼龙膜过滤愈伤组织悬浮液，得到的大块愈伤组织转接到固体继代培养基上备用，过滤后剩余的愈伤组织悬浮液继续培养。本发明工艺简单，愈伤组织诱导迅速。

公开(公告)号：CN102586163A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210033343.9

申请日：2012-02-15

Applicant: 南京大学

Inventor： 杨柳燕 ,  杜宏伟 ,  武俊 ,  刘露 ,  肖琳

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/78 ,  C02F3/34 ,  C12R1/40 ,  C02F101/10

Abstract: 本发明公开了一种聚磷转基因恶臭假单胞工程菌，它是DNA整合串联表达聚磷激酶ppk基因的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。本发明还公开了上述聚磷转基因恶臭假单胞工程菌的构建方法及其在废水除磷中的应用。本发明工艺简单，所得基因工程菌具有高效去磷能力。

公开(公告)号：CN101899413A

公开(公告)日：2010-12-01

申请号：CN201010163000.5

申请日：2010-05-05

Applicant: 南京大学 ,  江苏江达生态科技有限公司

Inventor： 武俊 ,  杜宏伟 ,  杨柳燕 ,  肖琳 ,  李丽观 ,  吕志刚 ,  陈洪龄 ,  凌小君 ,  张全兴

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/63 ,  C02F1/58 ,  C02F3/34 ,  C12R1/40 ,  C02F101/10

Abstract: 本发明公开了一种重组恶臭假单胞菌，它是DNA整合表达聚磷激酶ppk基因的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。本发明还公开了上述重组恶臭假单胞菌的构建方法及其在废水除磷中的应用。本发明工艺简单，所得基因工程菌具有高效去磷能力。

公开(公告)号：CN101816287A

公开(公告)日：2010-09-01

申请号：CN201010162983.0

申请日：2010-05-05

Applicant: 南京大学 ,  江苏九久环境科技有限公司

Inventor： 杨柳燕 ,  杜宏伟 ,  武俊 ,  肖琳 ,  李丽观 ,  陈洪龄 ,  许超 ,  华海峰 ,  张全兴

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种黄菖蒲愈伤组织的培养方法：当黄菖蒲种子胚芽上的愈伤组织直径超过0.5cm时，将其从种子胚芽上切除，接种到新鲜的固体继代培养基上，进行继代培养，此后每2周继代培养一次；取出一粒愈伤组织在无菌滤纸上用镊子夹成小块，放入新鲜的培养液中，在25℃、90转/分钟条件下培养2周，形成愈伤组织悬浮液，将愈伤组织悬浮液按1∶30(v/v)接种到新鲜的培养液中进行继代培养，继代培养周期为2周；当需要使用愈伤组织进行快速繁殖或者转基因时，使用50目孔径的无菌尼龙膜过滤愈伤组织悬浮液，得到的大块愈伤组织转接到固体继代培养基上备用，过滤后剩余的愈伤组织悬浮液继续培养。本发明工艺简单，愈伤组织诱导迅速。

公开(公告)号：CN102577954A

公开(公告)日：2012-07-18

申请号：CN201210033642.2

申请日：2012-02-15

Applicant: 南京大学

Inventor： 杨柳燕 ,  杜宏伟 ,  武俊 ,  刘露 ,  肖琳 ,  吕志刚 ,  许超 ,  张全兴

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种宽叶香蒲根尖诱导愈伤组织并分化成苗的方法，将宽叶香蒲的种子干燥、消毒、发芽生根；对生根后的根尖诱导愈伤组织并分化成苗，具体方法为从生根后的苗根上获取2-3mm的根尖，转接到愈伤组织诱导培养基上无光条件下培养9周；将愈伤组织转接到愈伤组织分化培养基上，在25℃、连续光照的条件下分化培养4周；将分化培养后得到的苗转接到生根培养基上培养4周；将生根培养后的苗转移到含有花肥的小花盆中，将苗置于25℃的温室中生长，在第一周的时候苗的上方要覆盖一层塑料薄膜，防止水分的蒸发，3天浇水一次，培养40天后转移到更大的花盆中并保持3～5cm的水。