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公开(公告)号：CN107142276B
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN201710368951.8
申请日：2017-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在作物种子胚乳合成花青素的转基因育种方法。本发明通过在作物中转入包含6个表达结构蛋白的基因和2个表达转录因子的基因的基因组合，获得种子胚乳为紫色的、合成花青素的转基因作物；6个结构蛋白为CHS、CHI、F3H、F3’H、DFR和ANS；2个转录因子为转录因子Pl和转录因子Lc。本发明是基于发明人发现2个调节基因和6个结构基因是在胚乳中高水平合成花青素所必需的，得到的研究成果。本发明首次在作物水稻的胚乳中实现了花青素的合成，并获得了无筛选标记的转基因“紫米”产品，可以直接用于食用，也可以作为原材料用于生产花青素的原料。本发明对于新的功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。
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公开(公告)号：CN105907780B
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201610283794.6
申请日：2016-04-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在作物种子胚乳生产虾青素的转基因育种方法。具体步骤为S1.根据育种作物的密码子偏好性，优化PSY、CrtI、BHY和BKT的4个基因的序列，将序列优化后的4个基因分别与育种作物胚乳表达启动子和质体转运肽融合，分别构建基因表达盒；将S1中的4个基因表达盒构建成植物转化载体，获得含PSY、CrtI、BHY和BKT的植物转化载体；将S2所述植物转化载体转化育种作物，获得种子胚乳为橙红色的合成虾青素的转基因作物。本发明实现虾青素在作物（尤其是水稻）种子胚乳中的合成，其产品即可以直接用于食用，也可以作为生产虾青素的原料，对于新型功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。
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公开(公告)号：CN111560395A
公开(公告)日：2020-08-21
申请号：CN202010273133.1
申请日：2020-04-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种调控作物种子直链淀粉含量和胶稠度的方法及应用。所述方法为利用序列特异核酸酶基因组编辑技术对作物Wx基因的起始密码子上游部分进行位点特异性突变，创建作物Wx基因表达水平改变的突变系。利用本发明方法不同程度地降低了水稻突变系胚乳的OsWx基因表达量，快速有效地获得了胚乳直链淀粉含量适度下降、胚乳胶稠度适度增加的蒸煮和食味特性更好的新品系。利用该方法获得不同直链淀粉含量和胶稠度的作物突变系，大大丰富了作物的种质资源，快速培育优质新品种；因此，该方法在调控作物种子直链淀粉含量和/或胶稠度、以及培育优质水稻品系或品种中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN107142276A
公开(公告)日：2017-09-08
申请号：CN201710368951.8
申请日：2017-05-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在作物种子胚乳合成花青素的转基因育种方法。本发明通过在作物中转入包含6个表达结构蛋白的基因和2个表达转录因子的基因的基因组合，获得种子胚乳为紫色的、合成花青素的转基因作物；6个结构蛋白为CHS、CHI、F3H、F3’H、DFR和ANS；2个转录因子为转录因子Pl和转录因子Lc。本发明是基于发明人发现2个调节基因和6个结构基因是在胚乳中高水平合成花青素所必需的，得到的研究成果。本发明首次在作物水稻的胚乳中实现了花青素的合成，并获得了无筛选标记的转基因“紫米”产品，可以直接用于食用，也可以作为原材料用于生产花青素的原料。本发明对于新的功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。
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公开(公告)号：CN111560395B
公开(公告)日：2022-10-04
申请号：CN202010273133.1
申请日：2020-04-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种调控作物种子直链淀粉含量和胶稠度的方法及应用。所述方法为利用序列特异核酸酶基因组编辑技术对作物Wx基因的起始密码子上游部分进行位点特异性突变，创建作物Wx基因表达水平改变的突变系。利用本发明方法不同程度地降低了水稻突变系胚乳的OsWx基因表达量，快速有效地获得了胚乳直链淀粉含量适度下降、胚乳胶稠度适度增加的蒸煮和食味特性更好的新品系。利用该方法获得不同直链淀粉含量和胶稠度的作物突变系，大大丰富了作物的种质资源，快速培育优质新品种；因此，该方法在调控作物种子直链淀粉含量和/或胶稠度、以及培育优质水稻品系或品种中具有广泛的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105907780A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610283794.6
申请日：2016-04-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种在作物种子胚乳生产虾青素的转基因育种方法。具体步骤为S1.根据育种作物的密码子偏好性，优化PSY、CrtI、BHY和BKT的4个基因的序列，将序列优化后的4个基因分别与育种作物胚乳表达启动子和质体转运肽融合，分别构建基因表达盒；将S1中的4个基因表达盒构建成植物转化载体，获得含PSY、CrtI、BHY和BKT的植物转化载体；将S2所述植物转化载体转化育种作物，获得种子胚乳为橙红色的合成虾青素的转基因作物。本发明实现虾青素在作物（尤其是水稻）种子胚乳中的合成，其产品即可以直接用于食用，也可以作为生产虾青素的原料，对于新型功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。
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公开(公告)号：CN117659210A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311635845.3
申请日：2023-11-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/82 , C12N15/113 , C12N15/12
Abstract: 本发明公开了一种用作植物双碱基编辑器的重组融合蛋白及其应用，所述重组融合蛋白包含从N端到C端依次连接的1个胞嘧啶脱氨酶、1个腺嘌呤脱氨酶、1个单链DNA结合结构域、1个SpCas9变体和2个尿嘧啶糖基化酶抑制蛋白。本发明克服了目前单碱基编辑器的碱基替换类型单一以及双碱基编辑器的编辑成功率低的技术缺陷，提供了一种高效的植物双碱基编辑器，同时编辑双碱基的效率高，具有无靶序列偏好性、编辑窗口窄且脱靶率低的优势，能够广靶向识别NG‑PAM并进行多靶点编辑，在植物的基因功能的研究和遗传改良方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN115925969A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202210810655.X
申请日：2022-07-11
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种可实现DNA小片段精准删除的腺嘌呤碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含融合蛋白ABE8e‑EndoV，所述融合蛋白从N端到C端，依次包含腺嘌呤脱氨酶、Cas核酸酶的缺刻酶变体及肌苷I碱基删除修复核酸内切酶。本发明所述DNA小片段精准删除腺嘌呤碱基编辑器除了具有高效A‑G的碱基替换外，还具有可以产生从被脱氨的A碱基到Cas核酸酶蛋白切割位点区间的9‑13bp的小片段删除的特点。所述腺嘌呤碱基编辑器特别适用于动植物基因组中顺式作用元件的挖掘和研究，同时在目标基因的单碱基替换与饱和突变筛选等方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN112266420B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202011189809.5
申请日：2020-10-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种植物高效胞嘧啶单碱基编辑器及其构建与应用。该编辑器包含SpCas9变体融合蛋白PeCBE‑NG，从N端到C端，依次包含1个核定位bpNLS功能元件，1个脱氨酶eCBE功能元件，1个SpCas9变体Cas9n‑NG编码序列，2个串联的尿嘧啶糖基化酶抑制蛋白UGI功能元件，以及1个核定位bpNLS功能元件。相比现有植物胞嘧啶单碱基编辑器，本发明构建的胞嘧啶单碱基编辑器具有高效、无靶序列偏好性、编辑窗口适中、自靶向sgRNA效率低、脱靶效率低、以及广靶向识别NG‑PAM的特点，将有利于植物基因功能研究和作物遗传改良的发展，在植物单碱基替换与饱和突变筛选等方面具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN114524879B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202111603075.5
申请日：2021-12-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效的植物广靶向腺嘌呤单碱基编辑器及其构建与应用。所述腺嘌呤单碱基编辑器包含水稻密码子序列偏好性优化的核酸序列编码的SpCas9变体融合蛋白TadA8e‑DBD‑SpRY(hyABE8e‑SpRY)，从N端到C端，依次核定位信号bpNLS，脱氨酶TadA8e，DNA单链结合域DBD，SpCas9缺刻酶变体SpRYn，以及核定位信号bpNLS。相比现有植物腺嘌呤单碱基编辑器，本发明构建的腺嘌呤单碱基编辑器具有高效、广靶向识别几乎所有NNN‑PAM、更宽的编辑窗口、无靶序列偏好性、可检测的自靶向sgRNA效应、以及脱靶效率低的特点。
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