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公开(公告)号：CN116716298A
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202310471764.8
申请日：2023-04-27
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/62
摘要： 本发明提供一种引导编辑系统和目的基因序列的定点修饰方法。所述引导编辑系统包含nCas9切口酶与逆转录酶的融合蛋白模块、pegRNA模块和Nicking sgRNA模块，其中pegRNA模块为优化的pegRNA分子或包含编码优化的pegRNA分子的DNA序列的表达载体。所述目的基因序列的定点修饰方法包括使用引导编辑系统以及任选地加入头孢菌素C锌和/或去乙酰化酶抑制剂的步骤。实验结果表明，本发明提供的引导编辑系统和目的基因序列的定点修饰方法能够显著提高基因编辑效率，并拓宽了引导编辑系统在农业和生物医学领域的应用范围。
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公开(公告)号：CN115181170A
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN202110359672.1
申请日：2021-04-02
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/10 , C12N15/85 , C12N15/873 , C12N5/10 , A01K67/027 , C12Q1/6888
摘要： 本发明提供一种猪TMC1突变基因，其中，与野生型猪TMC1基因相比，所述突变基因编码的蛋白质具有p.M417K突变。本发明提供了一种构建体，所述构建体用于制备包含所述TMC1突变基因的重组细胞。本发明还提供了一种重组细胞，所述重组细胞由所述构建体转染受体细胞获得。本发明提供了一种制备人类耳聋猪模型的方法。利用本发明提供的TMC1突变基因制备人类耳聋的猪模型，研究人类耳聋的发病机理，对于临床预防、诊断和治疗人类耳聋具有重大的指导意义。
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公开(公告)号：CN110846321A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201810952704.7
申请日：2018-08-21
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C12N15/12 , C12N5/10 , C12Q1/6888 , A01K67/027
摘要： 本发明提供一种小型猪的ABCA12突变基因，所述突变基因与野生型猪ABCA12基因相比，具有IVS49-727A>G的突变。本发明提供了一种构建体，所述构建体包含所述ABCA12突变基因。本发明还提供了一种重组细胞，所述重组细胞由所述构建体转化受体细胞获得。本发明提供了一种制备人类斑色鱼鳞癣小型猪模型的方法，所述方法包括：改变小型猪的ABCA12基因，使ABCA12基因的位于第49号内含子的第727位碱基由A变为G。利用本发明提供的ABCA12突变基因制备大型人类斑色鱼鳞癣猪模型，研究人类斑色鱼鳞癣的发病机理，对于临床预防、诊断和治疗人类斑色鱼鳞癣具有重大的指导意义。
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公开(公告)号：CN110846330A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201810952553.5
申请日：2018-08-21
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C12N15/54 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
摘要： 本发明提供一种小型猪的RIPK4突变基因，所述突变基因与野生型猪RIPK4基因相比，具有c.1397_1398insA的突变。本发明提供了一种构建体，所述构建体包含所述RIPK4突变基因。本发明还提供了一种重组细胞，所述重组细胞由所述构建体转化受体细胞获得。本发明提供了一种制备蹼足病小型猪模型的方法，所述方法包括：改变小型猪的RIPK4基因，使RIPK4基因的位于第8号外显子的第1397位碱基和1398位碱基之间插入腺嘌呤A。利用本发明提供的RIPK4突变基因制备大型蹼足病猪模型，研究蹼足病的发病机理，对于临床预防、诊断和治疗蹼足病具有重大的指导意义。
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公开(公告)号：CN117309533A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202210728182.9
申请日：2022-06-24
申请人： 中国科学院动物研究所
摘要： 本发明提供一种用于大动物骨骼染色的染色液，其包含软骨染色液和硬骨染色液；其中所述软骨染色液由阿尔新蓝、乙酸和乙醇组成，在所述软骨染色液中，所述阿尔新蓝的含量为0.25～0.35％w/v，所述乙酸和乙醇的体积比为1:3～5；所述硬骨染色液由茜素红和氢氧化钾的水溶液组成，在所述硬骨染色液中，所述茜素红的含量为0.1～0.2％w/v，所述氢氧化钾水溶液的浓度为0.8～1.2％w/v。本发明还提供了用于大动物骨骼染色的试剂盒、使用本发明所述的染色液进行大动物骨骼染色的方法和制备大动物骨骼染色标本的方法。本发明的染色液和染色方法适用于针对大动物骨骼(例如巴马小型猪的新生猪或胎猪的骨骼)进行染色，染色效率高、效果好，弥补了当前缺乏针对大动物骨骼染色的有效方法的缺陷。
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公开(公告)号：CN110846321B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN201810952704.7
申请日：2018-08-21
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C12N15/12 , C12N5/10 , C12Q1/6888 , A01K67/027
摘要： 本发明提供一种小型猪的ABCA12突变基因，所述突变基因与野生型猪ABCA12基因相比，具有IVS49‑727A>G的突变。本发明提供了一种构建体，所述构建体包含所述ABCA12突变基因。本发明还提供了一种重组细胞，所述重组细胞由所述构建体转化受体细胞获得。本发明提供了一种制备人类斑色鱼鳞癣小型猪模型的方法，所述方法包括：改变小型猪的ABCA12基因，使ABCA12基因的位于第49号内含子的第727位碱基由A变为G。利用本发明提供的ABCA12突变基因制备大型人类斑色鱼鳞癣猪模型，研究人类斑色鱼鳞癣的发病机理，对于临床预防、诊断和治疗人类斑色鱼鳞癣具有重大的指导意义。
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公开(公告)号：CN116837025A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202210291164.9
申请日：2022-03-23
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027 , C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/57
摘要： 本发明提供一种哺乳动物基因组编辑方法，包括在哺乳动物基因组的ApoE基因位点上插入人源PCSK9基因。本发明还提供了用于在哺乳动物基因组的ApoE基因位点上插入人源PCSK9基因的构建体、由所述构建体转染受体细胞获得的重组细胞及其制备方法、以及制备动脉粥样硬化哺乳动物模型的方法。利用本发明提供的方法制备人动脉粥样硬化的哺乳动物模型，研究人动脉粥样硬化疾病的发病机理，对于临床预防、诊断和治疗人动脉粥样硬化疾病具有重大的指导意义。
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公开(公告)号：CN114181944A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202010959862.2
申请日：2020-09-14
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C12N15/12 , C12N5/10 , C12N15/01 , C12N15/85 , A01K67/027 , C12Q1/6888
摘要： 本发明提供一种小型猪的SLC13A1突变基因，所述突变基因与野生型猪SLC13A1基因相比，具有p.W47R的突变。本发明提供了一种构建体，所述构建体包含所述SLC13A1突变基因。本发明还提供了一种重组细胞，所述重组细胞由所述构建体转化受体细胞获得。本发明提供了一种制备骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症的小型猪模型的方法。利用本发明提供的SLC13A1突变基因制备骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症的猪模型，研究人类或动物的骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症的发病机理，对于临床预防、诊断和治疗人类或动物的骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症具有重大的指导意义。
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公开(公告)号：CN110846330B
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN201810952553.5
申请日：2018-08-21
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C12N15/54 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
摘要： 本发明提供一种小型猪的RIPK4突变基因，所述突变基因与野生型猪RIPK4基因相比，具有c.1397_1398insA的突变。本发明提供了一种构建体，所述构建体包含所述RIPK4突变基因。本发明还提供了一种重组细胞，所述重组细胞由所述构建体转化受体细胞获得。本发明提供了一种制备蹼足病小型猪模型的方法，所述方法包括：改变小型猪的RIPK4基因，使RIPK4基因的位于第8号外显子的第1397位碱基和1398位碱基之间插入腺嘌呤A。利用本发明提供的RIPK4突变基因制备大型蹼足病猪模型，研究蹼足病的发病机理，对于临床预防、诊断和治疗蹼足病具有重大的指导意义。
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公开(公告)号：CN114181944B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202010959862.2
申请日：2020-09-14
申请人： 中国科学院动物研究所
IPC分类号： C12N15/12 , C12N5/10 , C12N15/01 , C12N15/85 , A01K67/027 , C12Q1/6888
摘要： 本发明提供一种小型猪的SLC13A1突变基因，所述突变基因与野生型猪SLC13A1基因相比，具有p.W47R的突变。本发明还提供了一种包含所述SLC13A1突变基因的构建体，由所述构建体转化受体细胞获得的重组细胞，制备骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症小型猪模型的方法，筛选SLC13A1基因突变的骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症小型猪模型的方法或试剂盒，及其用途。利用本发明提供的SLC13A1突变基因制备骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症的猪模型，研究人类或动物的骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症的发病机理，对于临床预防、诊断和治疗人类或动物的骨骼发育不良、软骨发育不全或短肢性侏儒症具有重大的指导意义。
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