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公开(公告)号:CN114592088B
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202210151323.5
申请日:2022-02-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有多重PCR引物组。所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物,和分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ以及ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物组成,其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ、ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2‑5所示。实验结果表明,该方法敏感性高,特异性良好,对人工感染动物试验样品检测结果表明,mPCR与常规PCR方法检测结果一致,符合率为100%,适用于禽病毒性关节炎临床诊断、流行病学调查以及临床监测工作。
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公开(公告)号:CN112500458B
公开(公告)日:2022-12-16
申请号:CN202011473614.3
申请日:2020-12-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行,本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计,引入了利于其正确构象形成的元件,构建了重组原核表达质粒,制备了重组大肠杆菌基因工程菌,经过表达条件和纯化条件的摸索,高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒,将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗,试验结果显示,该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100%的免疫保护,而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN114592088A
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202210151323.5
申请日:2022-02-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测或区分禽呼肠孤病毒4种不同基因型的多重PCR试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有多重PCR引物组。所述的多重PCR引物组由1条通用上游引物,和分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ以及ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物组成,其中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,分别用于扩增ARV‑Ⅰ、ARV‑Ⅰ‑sub、ARV‑Ⅱ、ARV‑Ⅴ特异性基因区域的4条特异性下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2‑5所示。实验结果表明,该方法敏感性高,特异性良好,对人工感染动物试验样品检测结果表明,mPCR与常规PCR方法检测结果一致,符合率为100%,适用于禽病毒性关节炎临床诊断、流行病学调查以及临床监测工作。
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公开(公告)号:CN114231503A
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202111349642.9
申请日:2021-11-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/40 , A61K39/12 , A61K39/235 , A61P31/14 , A61P31/20 , A61P9/00 , A61P7/10 , A61P1/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒、血清4型禽腺病毒二联灭活疫苗及其制备方法和应用。本发明在血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20的基础上,在FAdV‑4基因组开放阅读框42和43之间的长度为1966‑bp天然核苷酸缺失位点插入传染性法氏囊病病毒超强毒的VP2基因,获得了一种表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)VP2蛋白的重组血清4型禽腺病毒(FAdV‑4)疫苗株,命名为rHN20‑vvIBDV‑VP2。将该疫苗株制备成二联灭活疫苗,免疫保护实验证明,接种rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株以及IBDV超强毒的攻毒感染,证明rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗具有非常好的免疫原性。本发明的提出为防治鸡心包积液‑肝炎综合征以及鸡传染性法氏囊病提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN114107226A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111249164.4
申请日:2021-10-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/40 , C12N15/861 , C12N15/66 , A61K39/295 , A61K39/235 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20 , A61P9/00 , A61P1/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达vvIBDV‑VP2蛋白的重组4型禽腺病毒活载体疫苗株及其构建方法和应用。本发明在血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20的基础上,在FAdV‑4基因组开放阅读框42和43之间的长度为1966‑bp天然核苷酸缺失位点插入传染性法氏囊病病毒超强毒的VP2基因,获得了一种表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)VP2蛋白的重组血清4型禽腺病毒(FAdV‑4)活载体疫苗株,命名为rHN20‑vvIBDV‑VP2。免疫保护实验证明,免疫rHN20‑vvIBDV‑VP2的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株以及IBDV超强毒株的攻毒感染,说明rHN20‑vvIBDV‑VP2具有非常好的免疫原性,可以作为防治鸡心包积液‑肝炎综合征以及鸡传染性法氏囊病的活载体疫苗毒株。
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公开(公告)号:CN111235117A
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN202010090643.5
申请日:2020-02-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其应用。所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株命名为IBD17JL01,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其保藏编号为CGMCC No.19291。该病毒株为本发明首次分离鉴定的一株自然适应DF1和CEF体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典毒株,该株病毒能够直接在体外传代细胞系DF1细胞、CEF细胞或DT40细胞上增殖。将该毒株灭活后制备成灭活疫苗,可使免疫雏鸡对强毒攻击产生100%的保护效果。因此,该病毒株(IBD17JL01株)可以作为天然适应体外细胞培养的疫苗候选株,用于IBDV的免疫防控。
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公开(公告)号:CN118325855B
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202410751672.X
申请日:2024-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/40 , C12N15/85 , A61K39/145 , A61K39/12 , A61P31/16 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达H9N2亚型AIV HA和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术,将包含CMV启动子序列、IBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入MDV基因缺失疫苗株(rMSΔMeq株)US2基因内部,同时,将包含SV40启动子序列、H9N2亚型AIV HA基因及终止子序列的基因片段SV40‑HA插入rMSΔMeq株UL41基因内部,得到表达H9N2亚型AIV HA基因和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株,命名为rMDV‑VP2‑HA。rMDV‑VP2‑HA具有与亲本病毒rMSΔMeq同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性,并且免疫鸡后可对IBDV超强毒株及H9N2亚型AIV均提供良好的保护效果。本发明的提出为同时预防IBDV及H9N2亚型AIV感染的重组MDV活载体疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN116478937A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310686418.1
申请日:2023-06-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株基因III型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。本发明从送检的病鸡关节组织中成功分离到1株基因III型禽呼肠孤病毒变异株,命名为ARV‑HLJ21‑1690401,该变异株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC NO.45563。σC基因遗传进化分析结果表明,该变异株位于ARV基因III型分支。该变异株对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性,可引起接种鸡胚90%死亡,接种6周龄SPF鸡100%发病。将其制备灭活疫苗,免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平,并能为同基因型毒株提供完全免疫保护。本发明的提出为预防禽呼肠孤病毒病提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN116445493A
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202211216666.1
申请日:2022-09-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种突变后的Tva基因及其在抗A亚群及K亚群禽白血病病毒感染中的应用。所述的突变后的禽白血病病毒受体基因(Tva)所编码的Tva蛋白的第58位的氨基酸G突变为N、第59位的H突变为D,第69位的W突变为L、第70位的G突变为PQR。本发明发现Tva作为A亚群及K亚群禽白血病病毒的共受体分子,将其关键功能性氨基酸位点G58、H59、W69及G70突变后,构建相应的Tva表达质粒,将其转染Tva缺失的DF‑1细胞后,其无法介导A、K亚群ALV感染宿主细胞,丧失了其作为禽白血病病毒受体的功能。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立同时抗A、K亚群ALV感染的细胞系提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN115287270B
公开(公告)日:2023-01-06
申请号:CN202211223789.8
申请日:2022-10-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , A61K39/155 , A61P31/14 , A61P11/02 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种B亚型禽偏肺病毒传代致弱株及其应用。本发明通过在Vero细胞中连续传代来致弱LN16‑V毒株,获得了致弱株LN16‑A,命名为LN16‑A株,其保藏号为:CGMCC NO.45261。将传代致弱株LN16‑A免疫3周龄SPF鸡并进行了系统的免疫保护评价,结果表明LN16‑A免疫机体后,可以诱导产生较高水平的aMPV特异性抗体和中和抗体,对强毒的攻击可提供100%的免疫保护,具有良好的免疫保护效果,可以有效预防强毒攻击造成的病理损伤。本发明为B亚型禽偏肺病毒病的防控提供了新的技术手段,对家禽业健康发展具有重要意义。
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