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公开(公告)号：CN118325854A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410750444.0
申请日：2024-06-12
摘要： 本发明公开了一种表达varIBDV VP2基因的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒株及其构建方法与应用。所述的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒株是利用重组克隆技术，将包含CMV启动子序列、varIBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入Meq基因缺失的马立克氏病病毒株rMSΔMeq US2基因内部，并替换rMSΔMeq基因组第156501‑157116位之间的核苷酸序列获得的，命名为rMDV‑varVP2。研究表明，本发明获得的重组Meq基因缺失马立克氏病病毒rMDV‑varVP2具有与亲本病毒rMSΔMeq株同等的体外复制能力以及良好的遗传稳定性，并且，rMDV‑varVP2免疫鸡后可对IBDV变异株提供良好的保护效果。本发明为重组MDV活载体疫苗的研制提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN116836945A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310747124.5
申请日：2023-06-21
摘要： 本发明公开了一株基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒变异株及其在制备疫苗中的应用。所述的基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒变异株，命名为ARV‑JS20‑9304，其保藏号为：CGMCCNO.45564。将本发明分离得到的ARV‑JS20‑9304毒株制备灭活疫苗免疫SPF鸡，攻毒后连续观察10天，每日观察鸡只临床症状并记录发病情况。实验结果发现，灭活疫苗免疫组在整个观察期内，鸡只未出现任何发病状态，所有鸡只精神状态良好，爪垫也未出现任何肿胀状态，表明ARV‑JS20‑9304毒株制备灭活疫苗可为同基因型强毒提供完全保护。本发明的提出为当前鸡呼肠孤病毒新基因型疫苗储备研究提供了新的候选疫苗株，同时也为了解我国ARV变异株的流行及遗传进化特征提供了重要的理论依据。
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公开(公告)号：CN116574696A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202211057927.X
申请日：2022-08-30
摘要： 本发明公开了一种构建表达IBDVVP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒疫苗株的方法、该疫苗株和应用，属于医学或兽医学技术领域。所述的表达IBDVVP2基因的重组火鸡疱疹病毒是由含有HVT基因组DNA片段的重组粘粒H1、H2、H3、H5以及含有VP2表达框架的重组粘粒H4UL55‑VP2共转染CEF细胞后，通过病毒拯救获得的。具体地，本发明利用重组克隆技术，将包含IBDVVP2基因以及CMV启动子的基因片段CMV‑VP2插入到火鸡疱疹病毒(HVT)的UL55和HVT066基因之间的间隔区中，构建获得在UL55和HVT066基因之间插入CMV‑VP2表达框架的重组粘粒，由其拯救获得表达IBDVVP2基因的重组HVT疫苗株rHVTUL55‑VP2。本发明还涉及该重组HVT疫苗株在制备鸡传染性法氏囊病疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN115704032A
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202210114184.9
申请日：2022-01-30
IPC分类号： C12N15/12 , C12N15/113 , C12N5/10 , C12N15/55 , C12N15/85 , C07K14/705
摘要： 本发明公开了一种突变后的A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)受体基因及其在抗A亚群禽白血病病毒感染中的应用。本发明鉴定了介导A亚群禽白血病病毒(ALV‑A)感染鸡细胞的受体蛋白Tva的关键功能性氨基酸位点为L55及W69，发现将这两个位点突变后，将导致ALV‑A无法感染宿主细胞。进一步的，本发明还公开了一种构建抗ALV‑A感染的DF‑1细胞系的方法，该方法利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选，将Tva基因作为ALV‑A受体的关键氨基酸位点L55及W69进行突变。结果表明，含有L55及W69位点突变的替换序列可高效定点替换Tva基因的相应序列；Tva基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑A的感染。本发明的提出为进一步研究Tva基因的功能及建立抗ALV‑A感染新技术奠定基础。
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公开(公告)号：CN112501129B
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202011466765.6
申请日：2020-12-14
IPC分类号： C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
摘要： 本发明公开了抗IBDV VP2蛋白的单克隆抗体组合及其在鉴别检测IBDV中的用途。所述的单克隆抗体组合由抗IBDV VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D以及25C所分泌的单克隆抗体组成，其中杂交瘤细胞株7D以及25C的菌种保藏编号分别为CGMCC NO.21009以及CGMCC NO.21008。实验证明，7D对IBDV经典毒、超强毒和变异株均能识别，而25C只能识别IBDV经典毒和超强毒，不能识别IBDV变异株。此外，本发明还利用该两株单克隆抗体建立了间接免疫荧光技术，可鉴别检测IBDV变异株和非变异株(经典毒和超强毒)，因此，本发明的提出为IBDV的鉴别提供了新的技术手段，对于IBD的综合防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111235117B
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202010090643.5
申请日：2020-02-13
摘要： 本发明公开了一株自然适应体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典株及其应用。所述的鸡传染性法氏囊病病毒经典株命名为IBD17JL01，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.19291。该病毒株为本发明首次分离鉴定的一株自然适应DF1和CEF体外细胞培养的鸡传染性法氏囊病病毒经典毒株，该株病毒能够直接在体外传代细胞系DF1细胞、CEF细胞或DT40细胞上增殖。将该毒株灭活后制备成灭活疫苗，可使免疫雏鸡对强毒攻击产生100％的保护效果。因此，该病毒株(IBD17JL01株)可以作为天然适应体外细胞培养的疫苗候选株，用于IBDV的免疫防控。
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公开(公告)号：CN113151193A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110308742.0
申请日：2021-03-23
IPC分类号： C12N7/00 , C12N15/63 , C12N15/66 , A61K39/235 , A61P31/20
摘要： 本发明公开了一株血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rR188I及其构建方法和应用。本发明的疫苗株rR188I是在我国FAdV‑4新近分离株HLJFAd15基因组全长的感染性克隆粘粒Fos‑rFAdV4基础上将Hexon基因的第563位碱基由G突变为A，即编码的第188位氨基酸由R突变为I，获得感染性克隆粘粒Fos‑rR188I，然后利用Fos‑rR188I成功拯救出疫苗株rR188I。致病性实验显示rR188I对SPF鸡无致病性(突变之前具有100％的死亡率)。免疫保护实验证明，接种rR188I的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株的攻毒感染，证明rR188I具有非常好的免疫原性，可以作为疫苗候选毒株，同时致弱毒株大大降低了强毒株生物安全的隐患。
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公开(公告)号：CN112538464A
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN202011419903.5
申请日：2020-12-07
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12N15/34 , A61K39/235 , A61P31/20 , A61P1/16 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20及其构建方法和应用。本发明构建了我国FAdV‑4新近分离株HLJFAd15基因组全长的感染性克隆粘粒Fos‑rFAdV4，在此基础上将Hexon基因替换为国外弱毒株ON1的Hexon基因获得感染性克隆粘粒Fos‑rHN20。利用Fos‑rHN20成功拯救出疫苗株rHN20。致病性实验显示rHN20对SPF鸡不再有致病性(突变之前具有100％的死亡率)。免疫保护实验证明，接种rHN20的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株的攻毒感染，证明rHN20具有非常好的免疫原性，可以作为疫苗候选毒株，同时致弱毒株大大降低了强毒株生物安全的隐患。
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公开(公告)号：CN112500458A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011473614.3
申请日：2020-12-15
摘要： 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行，本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计，引入了利于其正确构象形成的元件，构建了重组原核表达质粒，制备了重组大肠杆菌基因工程菌，经过表达条件和纯化条件的摸索，高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒，将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗，试验结果显示，该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100％的免疫保护，而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN110261599A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910406683.3
申请日：2019-05-16
IPC分类号： G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/537
摘要： 本发明公开了一种检测A、B亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-A gp85蛋白以及截短表达的ALV-B gp85蛋白的酶标板，其中，所述的截短表达的ALV-A gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的截短表达的ALV-B gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用截短表达的A、B亚群禽白血病病毒的gp85蛋白建立了A、B亚群禽白血病病毒的抗体间接ELISA检测方法，试验表明，该试剂盒用于检测A、B亚群禽白血病病毒抗体时，其敏感性与同类进口试剂盒相当，但特异性优于同类进口试剂盒，与J亚群禽白血病病毒抗体无交叉反应。本发明的提出为A、B亚群禽白血病病毒的检测和流行病学调查以及早期诊断提供了有效技术手段。
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