公开(公告)号：CN103627720A

公开(公告)日：2014-03-12

申请号：CN201210232385.5

申请日：2012-07-06

Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院

Inventor： 范忠泽 ,  王金玉 ,  孙珏 ,  李琦 ,  赵成根 ,  张隆 ,  殷佩浩 ,  李大力 ,  叶乃菁

IPC: C12N15/79 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T-GFP真核表达载体，是包含ATP4B启动子序列、SV40T基因序列、以及携带绿色荧光蛋白GFP基因序列的载体质粒DNA序列的基因融合重组质粒；该真核表达载体通过以下步骤构建：步骤1，克隆ATP4B启动子序列；步骤2，将步骤1所得的ATP4B启动子序列插入携带GFP基因序列的载体质粒中，并进行验证；步骤3，将SV40T基因序列插入步骤2所得的携带ATP4B启动子序列和GFP基因序列的载体质粒，并进行酶切鉴定和测序。本发明提供的胃黏膜上皮细胞ATP4B启动子驱动的SV40T-GFP真核表达载体，对细胞无损伤，且具有经济简便的优点，并可以为进一步研究胃癌发生机制及开展胃癌的诊断与基因治疗奠定提供研究对象，奠定实验基础。

公开(公告)号：CN103060355A

公开(公告)日：2013-04-24

申请号：CN201110325905.2

申请日：2011-10-21

Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院 ,  华东理工大学

Inventor： 范忠泽 ,  肖海娟 ,  许建华 ,  刘建文 ,  孙珏 ,  崔大苓 ,  徐可 ,  梁欣 ,  李琦 ,  殷佩浩 ,  高虹 ,  赵成根 ,  陆海 ,  金泉克 ,  王国娟 ,  余文燕 ,  朱晏伟 ,  张勇

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明属生物技术领域，涉及BCL2基因3-UTR双荧光素酶报告基因质粒及其构建方法。本发明通过将凋亡抑制基因BCL2的3-UTR区域插入双荧光素酶报告质粒pGL3-promoter的Xba I位点，构建包含BCL2的3-UTR区域的双荧光素报告基因质粒pGL3-p-BCL2-3-UTR，用于检测hsa-mir-1915对BCL2基因的调控作用，从而便于对细胞内microRNA调控的检测。本发明检测细胞内hsa-mir-1915的表达，从而标示细胞内特异的microRNA表达水平，为细胞内microRNA检测提供新的研究方法；所构建的BCL2基因的3-UTR区双荧光素酶报告基因质粒可用于检测细胞内hsa-mir-1915对BCL2基因的调控作用；进一步用于microRNA的抗肿瘤研究中，具有极佳的应用前景。