本发明属于基因工程与酶工程技术领域，具体公开了一种酸性蛋白酶突变体及其应用。本发明以Aspergillus niger来源的基因组DNA为基础，经PCR扩增得到亲本酸性蛋白酶基因序列，通过易错PCR进行随机突变，筛选获得酶活力提高的酸性蛋白酶突变体及其重组菌株。改造后，在最适条件下，酸性蛋白酶突变体的酶活力为251.64U/mL，与亲本酸性蛋白酶（203.64U/mL）对比酶活力提高了23.43%，同时在反应过程中不易失活，具有更高的稳定性，能够耐受强酸和高盐环境，且在酶解胶原蛋白中表现出较高的转化率，在皮革软化中具有良好的应用前景。