本发明涉及蛋白质技术领域，特别涉及SAG1蛋白突变体及其制备方法和应用。本发明提供了SAG1蛋白突变体及其制备方法，以及SAG1蛋白突变体在制备IgM检测试剂盒、IgG检测试剂盒或弓形虫疫苗中的应用。本发明通过定向突变N糖基化氨基酸使其非糖基化表达SAG1蛋白表达量由28％提高至100％，在不影响SAG1的结构与功能下，可以提高SAG1的产量和降低成本，并使得SAG1蛋白可以分泌到上清中，降低纯化分离工艺难度，提高收率。