本发明提供了一种悬浮细胞专用的培养皿及其使用方法，属于细胞培养技术领域。本培养皿包括包括培养皿盖、培养皿主体和细胞隔离部件；细胞隔离部件设置在培养皿主体的内部，培养皿盖盖设在培养皿主体的上方；细胞隔离部件包括折叠部、转轴、滤网和侧网，折叠部和转轴之间设置有滤网；折叠部的上方连接有侧网；折叠部包括两部分，两部分均能够绕着转轴旋转；滤网和侧网的孔径均小于培养皿内部所培养悬浮细胞的尺寸。本发明提供的悬浮细胞专用的培养皿及其使用方法，便于悬浮细胞换液、收集和共培养，能够有效避免悬浮细胞在换液、收集和共培养时发生损失和破坏。