本发明涉及药物成分分析技术领域，公开了一种妥洛特罗中有关物质的分析方法，所述分析方法是结合高效液相色谱法进行的；色谱柱为耐纯水相色谱柱；流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为缓冲盐和磷酸缓冲液的混合溶液，所述流动相B为有机溶剂；稀释剂为含有HCl溶液的流动相A。采用本发明的分析方法，可以得到保留时间合适的峰型，提高乙酸钠的出峰灵敏度、改善主峰峰型，减少干扰峰，响应良好；且通过对稀释剂的改进可以使得样品完全溶解，提高样品分析准确度。