本发明公开了一种需氧微生物的培养液及其体外检测试剂盒，属于生物化学检测技术领域。所述培养液包括胰蛋白胨、明胶蛋白胨、脑心浸液、L‑精氨酸、牛肉膏、葡萄糖、维生素、硫酸镁、碳酸氢盐、聚茴香脑磺酸、对氨基苯甲酸；所述试剂盒包括培养液、过滤材料、培养瓶瓶体、瓶盖和感受器。该试剂盒中通过培养液各成分之间相互配合，能够有效地促进菌种活性，进而提高需氧微生物的阳性检出率并缩短检出时间，准确性较高；检测需氧微生物的最低检出限能达到50copies/mL，灵敏性较高。