本发明属于微生物菌剂技术领域，公开了一种促进脂肪沉积的微生物菌剂及其分离方法与应用，促进脂肪沉积的微生物菌剂为宁乡猪粪便分离的约氏乳杆菌(保藏号：CCTCC M 20211241)；促进脂肪沉积的微生物菌剂的验证方法包括：选取体重为36.5g、健康状况相似的ICR雄鼠分为3个组：对照组，高脂组和高脂+约氏乳杆菌灌胃组，每组10只小鼠；约氏乳杆菌灌胃组为每日上午9：00进行，灌胃量为0.3ml/只，菌液浓度为1×10^9CFU/ml；鼠房采用12h光照和12h黑暗循环的管理方法，温度和湿度适宜，自由饮水和采食。实验结果表明，本发明提供的宁乡猪粪便来源约氏乳杆菌可以促进脂肪在机体的沉积。