本发明涉及甾体类药物中间体的生产方法，具体涉及一种甲睾酮C1,2位的生物脱氢方法。本发明以甲睾酮为底物，以简单诺卡氏菌菌液为酶源，同时将大豆油100‑200ml/L和吐温‑80 0.1‑2g/L加入转化体系中，于29‑31℃下进行转化反应，反应完全，反应物经分离纯化得到脱氢甲睾酮。本发明在采用普通直接转化法的基础上，通过加入大豆油和吐温‑80，可以大幅度提高转化率，转化率可达到99％以上；同时产物的降解率可降低至，反应专一性强，转化时间相对较快，产品质量高；并且无需无菌环境，常规室外操作即可，操作简单，适合工业化大批量生产。