本发明涉及用于制作麻花发酵面肥的组合菌种、麻花发酵面肥、麻花和应用，所述面肥的生产步骤如下：将瑞士乳杆菌MRS 1、鼠李糖乳杆菌PCA2和库德里阿兹威毕赤酵母PDA1在斜面活化后，再分别进行纯菌种培养，培养完成后将三种菌液接到面粉中，再补加水，在25‑37℃条件下，发酵36‑60h，发酵制作面肥，即得发酵面肥。本面肥使用瑞士乳杆菌MRS 1、鼠李糖乳杆菌PCA2和库德里阿兹威毕赤酵母PDA1进行发酵，不同于传统面肥的开放、天然发酵工艺，生产工艺更易控制，能够实现工业化生产，并且能够产生丰富的醇、醛、酸、酯等风味物质或风味前体物质，改善麻花的风味。