本发明提供了一种活性UL36‑480‑GST蛋白及其制备方法，以MDV病毒编码的UL36‑480去泛素化酶作为靶点，并在其C端融合一个促进蛋白溶解便于纯化的GST标签、Thrombin蛋白酶切位点、Gly‑Gly‑Gly‑Ser柔性连接肽段，并利用杆状病毒‑昆虫细胞表达系统表达纯化获取UL36‑480‑GST。利用此酶体外筛选特异性抑制剂，用于抗肿瘤、抗病毒的治疗的方法；建立了一种新的获取活性病毒编码去泛素化酶UL36‑480‑GST的制备方法，为有效防控MDV病毒提供一种新的特异性药物靶点。