- 专利标题: 一种用于枯草芽孢杆菌基因组编辑的CRISPRCas9系统及其构建方法
- 专利标题(英): CRISPR Cas9 system system for Bacillus subtilis genome edition and establishment method thereof
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申请号: CN201610122595.7申请日: 2016-03-03
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公开(公告)号: CN105671070A公开(公告)日: 2016-06-15
- 发明人: 吴敬 , 段绪果 , 张康
- 申请人: 江南大学 , 江南大学(如皋)食品生物技术研究所
- 申请人地址: 江苏省无锡市蠡湖大道1800号
- 专利权人: 江南大学,江南大学(如皋)食品生物技术研究所
- 当前专利权人: 江南大学,江南大学(如皋)食品生物技术研究所
- 当前专利权人地址: 江苏省无锡市蠡湖大道1800号
- 代理机构: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司
- 代理商 耿晓岳
- 主分类号: C12N15/75
- IPC分类号: C12N15/75 ; C12N15/31
摘要:
本发明公开了一种用于枯草芽孢杆菌基因组编辑的CRISPRCas9系统及其构建方法,属于基因工程技术领域。本发明构建敲除质粒PHY300dsrf,该质粒包含特异性靶向目的基因的sgRNA、cas9基因、同源修复臂、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的复制原点及抗性筛选标记。本发明所设计的特异性靶向srfA-C基因的sgRNA,可以指引cas9蛋白在srfA-C基因的特异性位点切割双链,然后再同源修复臂的指导下对基因组进行精确地同源性重组,在断裂处引入XhoI酶切位点。在对srfA-C基因敲除成功的枯草芽孢杆菌进行上罐发酵培养,泡沫显著减少,证明该CRISPR/Cas9基因编辑系统可以有效的对枯草芽孢杆菌基因组进行基因编辑。
公开/授权文献
- CN105671070B 一种用于枯草芽孢杆菌基因组编辑的CRISPRCas9系统及其构建方法 公开/授权日:2019-03-19
IPC分类: